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大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT关系的研究*

2014-09-18钟宝元

中国医学创新 2014年36期
关键词:大肠癌标志物阳性率

钟宝元

大肠癌(结直肠癌)是我国常见的恶性肿瘤,其发病率有逐年增高的趋势。由于大肠癌的早期症状常不典型且不易被发现,确诊时病程已到中晚期。因此,通过研究大肠癌的发生、发展机理,为其治疗提供更多的有效手段就尤为重要。本研究分析与探讨大肠癌中STAT3、Twist的表达及与EMT的关系,具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2005-2011年本院结直肠癌、癌旁组织标本80例,经常规石蜡包埋与10%中性甲醛固定标本。其中男45例,女35例,年龄为32~79岁,平均(51.2±10.5)岁,组织学分级:高中分化30例,低分化50例;44例肿瘤直径未超过5 cm,36例肿瘤直径超过5 cm。

1.2 方法 选用由北京博奥森公司生产的STAT3、Twist及EMT兔抗人多克隆抗体,DAB显色试剂盒、SABC(链霉亲和素-生物素复合物)试剂盒,采用免疫组化方法,切片常规石蜡,并脱蜡至水。用3%的双氧水进行10 min的室温封闭,3次蒸馏水洗,10 min抗原修复。每5分钟PBS洗3次,再加入适量山羊血清封闭液,20 min的室温封闭,多与液体取出,滴加一抗,并在4 ℃环境下过夜。每1分钟PBS洗3次,并适量加入生物素化二抗,室温(37 ℃)封闭20 min,每2分钟PBC洗3次。DAB显色,水洗蒸馏,盐酸乙醇分化,苏木精1 min复染。

1.3 抗体阳性判断标准 STAT3、Twist以细胞浆和/或细胞核呈棕黄色者为阳性细胞,EMT阳性表达为棕褐色,具体在细胞膜上定位,或者线形围绕细胞膜[1-2]。

1.4 统计学处理 采用SPSS 15.0统计学软件进行处理,计数资料采用 字2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 STAT3、Twist及EMT的表达对比 大肠癌中Twist蛋白阳性率为57.5%(46/80),癌旁组织阳性率26.3%(21/80);大肠癌中STAT3蛋白阳性率63.7%(51/80),癌旁组织阳性率17.5%(14/80);大肠癌中EMT阳性率为17.5%(14/80),癌旁阳性率62.5%(50/80),两组比较差异均有统计学意义( 字2=50.00、75.21、66.58,P<0.05),见表 1。

表1 大肠癌及癌旁组织中STAT3、Twist及EMT的表达对比 例

2.2 STAT3、Twist表 达 与 EMT的 关 系 STAT3、Twist的表达和EMT呈现正相关性(r’s=0.262、0.243,P<0.05),见表 2。

表2 STAT3、Twist的表达与EMT的关系 例

3 讨论

STAT3是在1994年作为白细胞介素-6信号传递中的急性期反应因子被纯化的,是酸化激活酪氨酸磷的一个STAT 家族成员[3]。其异常表达与EMT现象在大肠癌中的关系,目前在国内外尚未见相关报道,而且有关STAT3蛋白的异常表达与EMT现象的作用机制的研究尚处于空白。很多实践研究表明,作为JAK/STAT的关键性信号分子,持续性激活STAT3和人体细胞恶性转化进程存在相关性[4-5]。在大肠癌的研究中发现,STAT3的异常激活在结直肠肿瘤中起了重要的作用[6-7]。

在肿瘤进展中,EMT是其关键过程之一,EMT的主要特征在于上皮细胞间质特性的获得与上皮细胞极性的丧失,和肿瘤细胞远处转移及原位侵袭具有相关性[8]。用于对EMT进行验证的分子学标志物有:上皮标志物E-cad和Cytok表达降低以及间质标志物N-cadherin和Vimentin达的增加[9-11]。EMT表型标志有三维侵袭、迁移性、增强抗凋亡能力,主要机制是在调控因子作用下造成E-cad表达降低与β-cat核定位,导致癌细胞膜上具有粘连作用的β-cat与E-cad降低,引发癌细胞的极性变化、粘连消失及形态改变,从而参与肿瘤转移与侵袭全过程[12-15]。本研究显示,大肠癌中,Twist蛋白的阳性率为57.5%,癌旁组织阳性率26.3%。STAT3蛋白阳性率63.7%,癌旁组织阳性率17.5%,大肠癌中,Twist与STAT3蛋白阳性率高于癌旁组织阳性率(P<0.05),EMT阳性率为17.5%,比癌旁阳性率62.5%低(P<0.05),STAT3、Twist的表达和EMT呈现正相关性(P<0.05)。

综上所述,大肠癌中SATA3与Twist表达和肿瘤生物学特征存在相关性,而激活SATA3可能会提升Twist与EMT的表达,对STAT3、Twist及EMT的检测有助于预测肿瘤侵袭转移与判断预后。

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