不孕不育403例支原体感染及药敏结果分析

周芳芳

(长江大学荆州临床医学院 荆州市中心医院妇科，湖北 荆州 434020)

江涛

(长江大学荆州临床医学院 荆州市中心医院检验科，湖北 荆州 434020)

近年来不孕不育症的发病率呈上升趋势，研究发现生殖系统支原体感染与不孕不育症的发病有着密切关联[1-2]。解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum ,Uu)和人型支原体(Mycoplasma hominis ,Mh)为目前常见的造成泌尿生殖道感染的支原体类型。尽管治疗支原体感染的新药不断面市，但是由于普遍存在的不合理用药问题，导致支原体对各种药物的耐药率逐渐上升。我们对本院生殖中心不孕不育患者进行Uu和Mh的检测和药敏分析，以期指导临床合理用药和提高疗效。

1 对象与方法

1.1 对象

研究对象为2011年1月到2013年1月来我院生殖中心接受检查和治疗的不孕不育患者共403例，其中女性267例，年龄24～37(28.27±3.12)岁；男性136例，年龄25～39(29.48±3.39)岁。女性病例排除生殖器官畸形、卵巢功能障碍、子宫内膜异位症、染色体异常者，男性病例排除性功能障碍、精索静脉曲张、无精症者，均符合不孕不育症诊断标准。

1.2 标本采集

男性病人禁欲3～7d后手淫法取精液于干燥消毒量杯内，女性病人用无菌拭子取宫颈分泌物置无菌管内立即送检，已使用抗生素者收集样本前5d停药。

1.3 试剂与仪器

试剂为法国生物-梅里埃公司生产的Mycoplasma IST 2支原体培养鉴定及药敏试剂盒，仪器为上海跃进医疗器械厂生产的PYX—DHS型恒温培养箱。

1.4 检测方法

严格按照试剂操作手册要求进行。将试剂盒放置室温平衡温度后，将棉拭子或200μl液体标本放入肉汤(R1)中，混匀后，将肉汤倒入R2(冻干尿素-精氨酸肉汤)内，震荡使之彻底溶解，在试条中的每个小杯中加入上述溶液55μl，然后在每个小杯中加入两滴无菌矿物油，盖好试条。放入(35±1)℃培养24h后观察Uu培养结果，48h后观察Mh培养结果。若鉴定及培养各微孔混浊且变红表示有污染，应做其他检查或重新试验；培养及鉴定孔观察显示由黄变红，提示有支原体生长。Uu培养孔 24h后变红表示有Uu感染，Uu≥104ccu/ml；Mh培养孔48h后变红表示有Mh感染，Mh≥104ccu/ml；上述2孔在48h均变红提示Uu、Mh混合感染。观察药敏孔，若有变红表现，提示Mh和(或)Uu生长，表示对此药物有耐药性；若观察显示药敏感孔未变色，提示对此药物敏感。

1.5 统计学分析

所有统计学处理均运用Excel软件完成，不同性别间支原体感染率的比较采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别患者支原体感染情况

总标本数为403例，阳性标本数为109例，总阳性率为27.0%。其中女性患者的阳性率为31.0%,而男性患者阳性率为19.1%，女性患者的阳性率显著高于男性患者(P<0.01)；女性患者Uu阳性率为30.3%，显著高于男性患者的17.6%(P<0.01)。不同性别患者支原体感染情况见表1。

表1 不同性别患者支原体感染情况

注：*与女性患者阳性率比较，P<0.01。

2.2 支原体阳性标本药敏试验结果

由于Mh单独感染和Uu+Mh混合感染标本数有限，其药敏结果在此暂不做分析，Uu对强力霉素和原始霉素最敏感，而对红霉素耐药性最严重，6种药物的敏感性分析结果见表2。

表2 Uu对6种药物的敏感性分析

3 讨论

支原体广泛存在于自然界中，是一类无细胞壁的最小原核型微生物，能感染人类的支原体约10余种，其中Uu和Mh最为常见，常引起女性宫颈炎、子宫内膜炎、输卵管炎等疾病而导致不孕[3]，而在男性则可以引起前列腺炎，影响精子活动度、浓度、形态及DNA结构从而导致不育[4]。本研究中，不孕不育患者的支原体总感染率为27.0%，女性患者的支原体感染率显著高于男性，可能与女性的生殖道结构更易受支原体感染有关。

由表2可看出，Uu的耐药率最高为红霉素(40.6%)，其次为氧氟沙星(34.6%)、四环素(20.8%)，与国内其它报道相似[5]。中介度最高为氧氟沙星(28.8%)，其次为红霉素(21.8%)、四环素(17.8%)，但氧氟沙星具有细胞内浓度分布高的特点，所以其中介度可视为有效。另外据国内外的研究报道，左旋氧氟沙星的抗菌活性比氧氟沙星强两倍，是目前比较理想的喹诺酮类抗支原体药物[6]。常用抗Uu药物中，敏感率由高到低依次为强力霉素>原始霉素>交沙霉素>四环素>红霉素>氧氟沙星，原始霉素毒性较大。因此治疗UU感染，在未做药敏实验的条件下，应首选强力霉素及交沙霉素。

支原体无细胞壁，所以抑制细胞壁合成的抗菌药物如β-内酰胺类对支原体无作用，目前用于治疗支原体感染的药物其机制主要是阻碍支原体组蛋白合成或抑制核酸形成，如大环内酯类及喹诺酮类。以前对于支原体耐药的机理研究比较少，随着近年来支原体感染率及耐药率的不断上升，对于其耐药机理的研究在不断深入，可用于治疗支原体感染的新药也不断出现，已有研究证明长期接触低浓度药物会使支原体产生耐药性，其原因可能是由于低浓度药物会诱导某些耐药基因的点突变[7-8]。因此，对于支原体感染病人，应尽可能先进行药敏实验，然后选择敏感药物进行治疗，并且治疗过程用药要足量，疗程尽可能短，以避免低浓度药物与支原体长期接触而产生耐药性。

[参考文献]

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[3] Gupta A，Gupta A，Gupta S，et al.Correlation of mycoplasma with unexplained infertility[J].Archives of Gynecology and Obstetrics，2009，280(6)：981-985.

[4] Rybar R,Prinosilova P,Kopecka V,et al.The effcet of bacterial contamination of semen on sperm chmmatin integrity and standard semen parameters in men from infertile couples[J].Andrologia,2012,44 (Suppl 1):410-418.

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[8] Bebear CM, Renaudin J, Charron A,et al.Mutations in the gyr A,par C,and par E genes associated with fluoroquinolone resistance in clinical isolates of Mycoplasma hominis[J].Antimicrob Agents Chemother,1999,43(4):954-956.