进展期不同部位胃癌HER-2蛋白的表达

苗兰芳 雷瑞雪 郭 梅

河南省安阳市肿瘤医院病理科(455000)

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，高居全世界癌症病死率的第二位[1]。在我国，由于早期诊断率低，大多数胃癌患者在确诊时已处于中晚期，以致手术切除率低，死亡率高，5年生存率低，严重危害人们的健康和生命安全。人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, HER-2)属于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)家族成员，在多种肿瘤组织中高表达。宋岩等[2]的研究发现HER-2蛋白在胃癌组织中的过表达与预后不良相关。ToGA试验[3]证实，对HER-2蛋白阳性表达的进展期胃癌患者，化疗联合曲妥珠单抗的靶向治疗有效率达47.3%，中位生存期达13.8个月，显著提高了进展期胃癌患者的生存质量，明显延长了生存期，为HER-2蛋白表达阳性的胃癌患者的治疗带来了曙光。但目前对进展期不同部位胃癌的HER-2蛋白阳性表达率是否存在差异尚未明确。Tanner等[4]认为，食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白表达阳性率高于胃远端腺癌，而陈娟等[5]发现，食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白表达阳性率与胃远端腺癌无明显差异。本研究通过应用免疫组化染色，旨在研究进展期不同部位胃癌HER-2蛋白的表达情况。

对象与方法

一、研究对象

收集2012年2月-2013年8月安阳市肿瘤医院上消化道癌手术切除标本共2 764例，其中食管癌患者1 920例，胃癌患者844例(食管胃交界部腺癌659例、远端胃腺癌185例)。进展期胃癌指癌组织浸润超过黏膜下层或浸润胃壁全层的胃癌，共纳入783例进展期胃癌患者，其中食管胃交界部腺癌622例，胃体腺癌89例，胃窦/幽门部腺癌72例；男621例，女162例；年龄23～82岁，平均62岁。

二、研究方法

采用免疫组化SP法检测HER-2蛋白表达。将组织切片于65 ℃烤箱固定2 h，二甲苯脱蜡40 min，梯度乙醇洗片；水洗组织切片；3% H2O2去除过氧化物酶；柠檬酸高温高压修复1 min，蒸馏水冲洗冷却；PBS缓冲液3 min×3次；滴加多克隆兔抗人C-erbB-2癌蛋白抗体[基因科技(上海)有限公司]，37 ℃温箱孵育1 h；PBS缓冲液3 min×3次；滴加HRP标记的鼠抗兔二抗(Dako REALTM，EnVisonTM)；PBS缓冲液3 min×3 次；DAB显色5～10 min；苏木素染色；乙醇梯度脱水，二甲苯透明；中性树脂封片。每张切片均设有阳性对照。

结果判断[6]：HER-2蛋白结果判定以肿瘤细胞膜表达为主要判断标志。(0)：无染色或<10%的肿瘤细胞膜染色；(1+)：≥10%的肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色；(2+)：≥10%的肿瘤细胞可见弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色；(3+)：≥10%的肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色。(0)和(1+)判断为阴性表达，(2+)为不确定，(3+)为阳性表达。病理诊断结果均经两名高年资病理医师确认。

三、统计学分析

应用SPSS 16.0统计软件，组间比较采用χ2检验以及秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

HER-2蛋白阳性表现为细胞膜棕黄色着色，不同程度的HER-2蛋白表达见图1。622例食管胃交界部腺癌患者中，463例HER-2蛋白表达阴性，80例表达不确定，79例阳性表达，阳性表达率为12.7%；在89例胃体腺癌中，77例HER-2蛋白表达阴性，6例表达不确定，6例阳性表达，阳性表达率为6.7%；在72例胃窦/幽门部腺癌中，58例HER-2蛋白表达阴性，8例表达不确定，6例阳性表达，阳性表达率为8.3%。食管胃交界部腺癌的HER-2蛋白阳性表达率显著高于其余两个部位胃癌(P<0.05)，而胃体腺癌与胃窦/幽门部腺癌之间HER-2蛋白阳性表达率无明显差异(P>0.05)。

讨 论

食管胃交界部腺癌的定义历来存在争议，2000年世界卫生组织明确将发生于远端食管鳞状上皮和贲门腺上皮移行区的癌命名为食管胃交界部腺癌，并提出应区别于下段食管癌和近端胃癌；且不主张沿用有误导含义的术语“贲门癌”[7]。2010年，世界卫生组织重申了上述定义，并提出食管胃交界部腺癌的TNM分期标准依据肿瘤主体位置分别沿用食管腺癌和胃腺癌的标准[8]。因此，无论在治疗还是预后上，两者不能同等对待。

A：肿瘤细胞胞膜完全不显色(0)；B：肿瘤细胞胞膜隐约染色(1+)；C：超过10%的肿瘤细胞胞膜呈弱到中度染色(2+)；D：超过10%的肿瘤细胞胞膜呈强染色(3+)

近年来，我国流行病学资料显示远端胃癌的发生率呈明显下降的趋势，而食管胃交界部腺癌发生率维持在较高水平，在食管癌高发区甚至呈现上升的趋势[9]。本研究共纳入食管癌高发区河南安阳地区的2 764例上消化道肿瘤标本，其中食管胃交界部腺癌、远端胃腺癌分别占23.8%、6.7%，说明在食管癌高发区食管胃交界部腺癌发病率较高，与其他两项食管癌高发区的研究[10-11]结果相符。该现象提示食管癌和食管胃交界部腺癌可能有相同或相似的发病基础，具体发病机制仍需进一步研究证实。

本研究显示，进展期食管胃交界部腺癌HER-2蛋白阳性表达率为12.7%，与多项研究[4，12-14]报道的HER-2蛋白在胃癌中的阳性表达率为9.8%～33%相符，然而较ToGA试验[3]中HER-2蛋白阳性表达率(33.2%)偏低。本研究统计HER-2蛋白阳性表达率时，仅将免疫组化(3+)的结果计算在内。实际上有研究[4]发现HER-2蛋白免疫组化(2+)的病例中约50% FISH检测为阳性，因此可能导致本研究HER-2蛋白阳性表达率偏低。

本研究表明食管胃交界部腺癌HER-2蛋白阳性表达率显著高于胃远端腺癌，与Tanner等[4]的研究结果一致。而国内有研究[15]则认为HER-2阳性表达率与肿瘤位置无关，这可能与该研究统计阳性率时将免疫组化(2+)和(3+)均归为阳性，导致结果不准确有关。

综上所述，HER-2蛋白阳性表达率可能与胃癌发生部位有关，食管胃交界部腺癌的阳性率较高。HER-2的靶向治疗对胃癌患者具有重要意义，而对食管胃交界部腺癌的效果有待进一步临床研究去证实。

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2 宋岩, 黄镜, 王金万. HER2/neu基因扩增和蛋白表达与晚期胃癌患者预后的关系[J]. 癌症, 2010, 29 (1): 76-81.

3 Bang YJ, Van Cutsem E, Feyereislova A, et al; ToGA Trial Investigators. Trastuzumab in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2-positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer (ToGA): a phase 3, open-label, randomised controlled trial[J]. Lancet, 2010, 376 (9742): 687-697.

4 Tanner M, Hollmén M, Junttila TT, et al. Amplification of HER-2 in gastric carcinoma: association with Topoisomerase Ⅱalpha gene amplification, intestinal type, poor prognosis and sensitivity to trastuzumab[J]. Ann Oncol, 2005, 16 (2): 273-278.

5 陈娟, 李东石, 余英豪, 等. Her-2蛋白在胃癌中的表达及其临床意义[J]. 世界华人消化杂志, 2010, 18 (13): 1375-1379.

6 《胃癌HER2检测指南》编写组. 胃癌HER2检测指南[J]. 中华病理学杂志, 2011, 40 (8): 553-557.

7 Hamilton SR, Aaltonen LA. Pathology and genetics of tumours of the digestive system[M]. 3th edition. Lyon: IARC Press, 2000: 32-36.

8 Bosman FT, Carneiro F, Hruban RH, et al. WHO classification of tumours of the digestive system[M]. 4th edition. Lyon: IARC Press, 2010: 40-44.

9 陈万青, 郑荣寿, 陈志峰, 等. 中国4个食管癌高发区上消化道癌的流行现状[J]. 中国肿瘤, 2011, 20 (8): 557-560.

10 赵晨燕, 张祥宏, 薛丽英, 等. 河北省食管癌和胃癌高发区居民胃癌发生部位的变化及趋势分析[J]. 中华肿瘤杂志, 2008, 30 (11): 817-820.

11 李守淼, 张爱国, 李保中, 等. 安阳市10年来消化道肿瘤的发生趋势[J]. 中国现代医生, 2012, 50 (15): 24-26.

12 Shan L, Ying J, Lu N. HER2 expression and relevant clinicopathological features in gastric and gastroesophageal junction adenocarcinoma in a Chinese population[J]. Diagn Pathol, 2013, 8: 76.

13 Gordon MA, Gundacker HM, Benedetti J, et al. Assessment of HER2 gene amplification in adenocarcinomas of the stomach or gastroesophageal junction in the INT-0116/SWOG9008 clinical trial[J]. Ann Oncol, 2013, 24 (7): 1754-1761.

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15 周翡, 李宁, 高勇, 等. HER-2/neu与胃癌临床病理及预后的相关性研究[J]. 临床肿瘤学杂志, 2010, 15 (6): 518-522.