沙棘总黄酮自微乳化制剂处方研究

王月茹 张 莉 张 建 谢 伟 陕西国际商贸学院医药学院（咸阳 712046）

沙棘黄酮类化合物是沙棘的主要有效成分之一，药理研究表明，其具有抗心肌缺血、抗心率失常、增强机体免疫、抗衰老、抗肿瘤、抗菌等广泛的作用[1]。但因沙棘总黄酮类物质在水中溶解度较小，导致药物在胃肠道吸收差、生物利用度低等缺点。自微乳化释药系统（SMEDDS）是由油相、乳化剂和助乳化剂形成均一的透明药液，在胃肠道或环境温度37℃温和搅拌的情况下，能自发乳化形成粒径在100～500nm的乳剂[2]。

为了提高沙棘总黄酮口服生物利用度，本试验拟将成沙棘总黄酮制成自微乳化制剂。

1 仪器与试药 UV-2450紫外－见分光光度计（日本岛津公司）；RCZ-1A型溶出试验仪（上海黄海药检仪器厂）；粒径分析仪（Brookhaven Instruments Corp）；芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号100080-201103）；沙棘总黄酮（青海康普生物科技股份有限公司，批号：20110503）；Transcutol P （法国 Gattefosse公司）；吐温-80（广州化学试剂厂）；油酸乙酯（上海飞祥化工厂）；其它试剂为分析醇。

2 方法与结果

2.1 伪三元相图的绘制 经预实验，选择对沙棘总黄酮溶解度大及乳化能力较好的自乳化辅料，确定以吐温-80作为乳化剂，以Transcutol P为助乳化剂，分别配制不同处方比例的自乳化液2g，搅拌混合均匀后，用蒸馏水稀释50倍，搅拌均匀。以目测的方法进行考察，以能形成澄清或蓝白色乳液作为标准溶液，采用Origin7.5软件，其中以乳化剂、助乳化剂与油相各为一相，以油酸乙酯作为油相。绘制自微乳化区域，进行处方比例的优选[3，4]。

图1 吐温-80-TranscutolP-油酸乙酯

从图1结果可以看出：形成自乳化区域面积的油酸乙酯含量为0%～50%，吐温-80含量为20%～90%，Transcutol P含量为20%～90%，为了进一步优化自微乳化制剂处方配比提供参考依据。

2.2 处方比例优选 A.平均粒径测定：在自微乳化区域中，按照实验设计的处方比例配制自微乳液10g，并加入自微乳液重量5%的药物，搅拌混合均匀后，用蒸馏水稀释50倍后，测定其粒径大小。B.自乳化时间的测定：取含药的自微乳0.5mL，于200mL蒸馏水为溶出介质，温度为 （37±0.5）℃，转速为50r／min，待自微乳液接触溶液开始计时，测定完全形成均匀乳液的时间。

表1 自微乳化处方优选

考虑处方中乳化剂用量过大，可能会刺激胃肠道，易产生毒副作用，以油相用量最多、乳化剂用量最少、粒径较小及自乳化时间较短为评判原则，综合比较后，确定吐温80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10为最优处方。

2.3 沙棘总黄酮SMEDDS的制备 按照优选的自微乳化处方吐温80-Transcutol P-油酸乙酯50∶40∶10，加入5%沙棘总黄酮原料药，搅拌均匀，水浴37℃，放置8h，即得沙棘总黄酮SMEDDS。

2.4 粒 径 取沙棘总黄酮SMEDDS 0.5mL滴入25mL蒸馏水中，轻轻摇匀，用粒径分析仪测定，其粒径大小及分布。结果表明，经水稀释，乳化后的平均粒径111.2nm，PDI 0.201，粒径分布均匀。

2.5 体外溶出度测定

2.5.1 标准曲线的绘制：精密称取芦丁对照品20.0mg，加乙醇适量，放冷，用乙醇定容，稀释成12﹑24﹑36﹑48﹑60﹑72μg／mL系列浓度，加5%NaNO2溶液1mL，摇匀，静置6min，再加入10%Al（NO3）3溶液1mL，摇匀，继续静置6min，加1mol／L NaOH溶液10mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静置15min，以相应试剂为空白，测定510nm处吸光度。计算回归方程为：A＝0.0108C-0.0059，r＝0.9992。

2.5.2 回收率实验：分别称取芦丁对照品15mg、20mg、25mg于100mL容量瓶中，分别加入空白自乳化辅料，加乙醇至稀释至刻度，摇匀，过滤，吸取续滤液1mL，用蒸馏水定容至25mL，再照“标准曲线测定方法”，测定吸光度，计算回收率，结果表明，低、中、高浓度的回收率分别为99.17%、101.26%、101.37%。

2.5.3 溶出度测定：参照中国药典2010年版二部溶出度测定法（附录XC第二法），分别称取沙棘总黄酮SMEDDS0.5g和等量的沙棘总黄酮25mg，以900mL蒸馏水为溶出介质，温度为（37±0.5）℃，转速为50r·min－1，依法操作，分别于5、10、20、30、45、60min取样5mL，滤过后，精密量取滤液2mL，分别置于25mL容量瓶中，按照“标准曲线方法”测定510nm吸光度，计算样品中总黄酮溶出量。实验结果可知：沙棘总黄酮SMEDDS在30min溶出度达65.2%，而原料药45min溶出度仅为17.5%，说明SMEDDS可显著提高水难溶性药物沙棘总黄酮的溶出度。

3 讨 论 乳剂的粒径大小是影响药物吸收的主要因素，乳滴的粒径越小，生物利用度越好。本实验采用动态光散射技术，该方法可用于测定自乳化药液分散后所形成乳液粒子的粒径的大小和分布状况。多分散指数（PDI）是指粒径分布大小的指数，数值越小，则粒径分布范围越窄，表明所制备的粒子大小越均匀。为了保证样品粒径检测的准确性，样品浓度应控制在一定范围内，本次试验稀释倍数在50倍。对沙棘总黄酮自微乳化制剂进行6个月常温稳定性考察，结果该制剂澄清透明，未出现分层或沉淀现象。在今后的研究中，应进一步研究沙棘总黄酮SMEDDS体内药动学研究。

[1]刘凤云.沙棘总黄酮的药理作用概况[J].中药材，2004，27（2）：145-146.

[2]袁海建，陈 彦，贾晓斌.中药自微乳传递系统的研究与应用[J].中华中医药杂志，2008，23（6）：524-527.

[3]张 建，叶珍珍，崔升淼.山楂叶总黄酮固体自乳化颗粒的处方优化和评价[J].中国实验方剂药学，2012，18（4）：15-16.

[4]雷 俊，吴正红，平其能，等.靛玉红自乳化释药系统的体外评价[J].中成药，2008，30（7）：969-970.