免疫荧光干式定量法检测全血CRP的临床应用评估

钱英超 陈丽华

免疫荧光干式定量法检测全血CRP的临床应用评估

钱英超 陈丽华

目的 评估免疫荧光干式定量法检测全血C-反应蛋白(CRP)的临床应用价值。方法 150例住院患者, 采用免疫荧光干式定量法检测全血CRP, 采用常规免疫比浊法检测血清CRP, 检测结果用统计学软件进行分析。结果 与常规免疫比浊法检测血清比较, 使用免疫荧光干式定量法检测全血, 两种方法所得的CRP检测结果相符, 差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 采用免疫荧光干式定量法检测全血CRP, 具有快速、简便、结果可靠等特点, 可作为临床一种快速检测感染过程和自身免疫疾病的工具。

免疫荧光干式定量法；C-反应蛋白；全血

近年来对于CRP的关注越来越多, 其在感染、心脑血管疾病、糖尿病、代谢综合征、外周血管疾病等多种疾病中对临床诊断和治疗有较高的应用价值, CRP的检测方法也在不断发展, 常用的有免疫比浊法、免疫单抗法、胶乳凝集法、火箭电泳法等［1］。本院检验科于2013年8月采购了i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪, 使用免疫荧光定量检测技术, 干化学层析法快速检测EDTAK2抗凝全血中的CRP水平。与常规生化仪上使用的免疫比浊法相比, 方法学的改变, 省去了分离血清的步骤, 可在3 min内得到检测结果, 而免疫比浊法的检测时间为10 min。本文就以上两种方法分别对150份EDTAK2抗凝全血标本和血清标本中的CRP进行检测分析, 探讨免疫荧光定量检测全血CRP的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选择150例2014年3～5月在本院住院的患者, 同一患者的血液分别使用EDTAK2抗凝真空采血管采集全血, 使用真空促凝管采集新鲜血清。

1.2 仪器和试剂 i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪由杭州丽珠医疗器械有限公司提供, 使用其配套测试卡；HITACHI7600-020全自动生化分析仪由日立公司提供, 所使用CRP试剂由日本和光公司提供；EDTAK2抗凝真空采血管、真空促凝管由广州阳普公司提供。所用仪器均使用配套的校准品校准。

1.3 方法 采用免疫荧光干式定量法检测全血中的CRP, EDTAK2抗凝真空采血管采集的全血马上进行处理, 使用i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪检测；采用免疫比浊法检测血清中的CRP, 真空促凝管采集的标本1 h内分离血清,避免溶血和脂血标本, 在HITACHI7600-020全自动生化分析仪上检测。以上仪器均严格按照仪器操作说明书进行操作,所有室内质控均在控。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

两种检测方法检测的CRP结果 与常规免疫比浊法检测血清比较, 使用免疫荧光干式定量法检测全血, 两种方法所得的CRP检测结果相符, 差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1(正常和异常以参考值范围划分)。

表1 150例患者使用两种检测方法检测的CRP结果( x-±s, mg/L)

3 讨论

CRP即C-反应蛋白(C-reactive protein), 于1930年被发现,是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白, 由肝脏合成, 正常人血清中含量极低, 一般＜10 mg/L。在人体发生细菌感染、非特异性疾病和创伤等情况下可以迅速升高到500 mg/L, CRP浓度的测量已经被临床用作一种检测感染过程和自身免疫疾病的工具, 如细菌与病毒感染的鉴别诊断可通过CRP升高的程度加以区分(细菌性感染时CRP明显高于病毒感染)；用于治疗监测, 连续监测CRP下降水平, 是治疗效果满意的指标；类风湿性关节炎时, CRP可高于200 mg/L, 高低与临床症状和治疗效果密切相关［2］。CRP和血清胆固醇一起被认为是动脉硬化的一项指标, 可以作为心血管疾病(如心肌梗死)的诊断指标, 同时也是冠状动脉疾病的一种独立的危险因子［3,4］。

目前, 国内大多数实验室用于检测CRP的方法主要是免疫透射比浊法和免疫散射比浊法, 在生化分析仪上, 利用抗原抗体结合动态测定血清中的CRP浓度。比浊法容易受到脂血的影响, 当抗原或抗体大大过剩时, 可出现可溶性复合物而造成误差。免疫荧光干式定量法是基于免疫荧光定量检测技术的干化学层析法：将检测缓冲液和血液样本在检测瓶中进行混合, 缓冲液中的荧光标记抗CRP抗体和血液中的CRP抗原形成抗原抗体复合物, 当混合样本被放到反应板的样品上并通过毛细血管作用扩散到硝酸纤维基质的测试带上, 该复合物被测试带上的抗CRP抗体所捕获, 荧光抗体的信号强度反映了被捕获的CRP数量, 经过i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪的处理, 能够反映出血液样品中CRP的浓度。在实际工作中, 免疫荧光干式定量法可直接检测全血中的CRP水平, 不需要分离血清, 操作简单, 用血量少(可以采集末梢血), 可用检测血常规的标本进行检测, 3 min就能得出结果, 特别适用于急诊检查。本文的实验结果显示,应用免疫荧光干式定量法检测全血中的CRP含量, 与常规比浊法检测血清中的CRP含量相比, 检测结果差异无统计学意义(P＞0.05), 可在临床上广泛应用。

［1］ Pepys MB, Hirschfield GM.C-reactive protein: a critical update.J Clin Invest, 2003, 111(12):1805-1812.

［2］ 黄家财,莫甲光.免疫散射比浊法和化学发光酶免疫分析法检测C反应蛋白的结果评价.现代医药卫生, 2010, 26(15):2284-2285.

［3］ 巫一中.C反应蛋白临床应用研究近况.实用心脑肺血管病杂志, 2010, 18(10):1558-1559.

［4］ 孟秀芹,张善辉.两种分析仪C反应蛋白检测结果的比对.中国实用医药, 2010, 5(34):23-24.

2014-07-10］

528415 南方医科大学附属小榄人民医院检验科