枳椇多糖体外抗氧化活性研究

魏丕伟　熊俐　王凌云等

摘要：以维生素C作为阳性对照，采用羟自由基体系（·OH）、二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）和超氧阴离子自由基体系（ O-2· ），对枳椇多糖的体外抗氧化活性进行研究。试验结果显示：枳椇粗多糖和精制多糖都具有一定的抗氧化活性，在一定浓度范围内，其抗氧化活性与浓度呈线性关系。总体上说，当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%；当浓度达到1.00 mg/mL时，枳椇粗多糖和精制多糖对DPPH自由基清除率都较高，可达80%左右，与维生素C接近；对超氧阴离子自由基的清除能力较前两者小，当浓度达到1.00 mg/mL时，枳椇粗多糖的清除率为48.24%，精制多糖的清除率为14.79%。

关键词：枳椇；多糖；抗氧化

中图分类号： R284.1 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）07-0316-03

收稿日期：2014-05-20

基金项目：四川理工学院大学生创新基金（编号：cx20120407）。

作者简介：魏丕伟（1983—），男，博士，讲师，主要从事生物技术方面的研究。Tel：（0813）5505979；E-mail：weipiwei2004@163.com。

通信作者：王凌云。E-mail： wanglingyun2004@163.com。枳椇（Hovenia acerba Lindl.）俗称拐枣，是一种遍布我国除东北、新疆、西藏以外大部分省区的鼠李科落叶乔木。枳椇果柄中含有丰富的多糖类化合物，其活性还未见报道。随着番茄红素抗氧化性的报道，番茄红素的保健品备受青睐，具有抗氧化活性的天然化合物的研究成为热潮。抗氧化性的评价有化学方法和生物学方法。化学方法可通过自由基的清除来表示，简单便捷，准确率高。自由基是生物体氧化过程中产生的中间代谢产物，当其过多时，会作用于生物膜磷脂不饱和脂肪酸、膜蛋白、代谢酶，影响细胞代谢的有序性和自调节能力，甚至使DNA分子变得不稳定，造成DNA损伤从而引起基因突变等[1]。尽管活的有机体一定程度上具有清除自由基的能力，但是适当补充外源性抗氧化剂仍然是有必要的。事实上，超氧阴离子自由基（ O-2· ）、二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）和羟自由基（OH·）等与衰老、癌症、心脑血管疾病和炎症的发生与发展密切相关。某些人工合成的抗氧化剂如BHT、BHA及PG等有一定的毒性，会对人体呼吸酶的活性造成不利的影响，甚至还有不同程度的致畸、致癌效应，这也引起了人们对人工化学合成抗氧化剂的担忧[2]。鉴于此，天然抗氧化剂的开发和使用，正成为现代食品工业发展所关注的焦点之一，具有广阔的应用前景。本试验对枳椇多糖的抗氧化活性进行测定，以期为枳椇的深入开发利用提供参考。

1材料与方法

1.1试验原料

枳椇购自安国药材市场，产地湖北。去除种子，取其果梗，蒸馏水清洗，置于烘箱55 ℃烘干，粉碎，过60目筛，粉末备用。

1.2试剂

二苯代苦味酰基自由基（DPPH·），Sigma公司；邻二氮菲，上海中秦化学试剂有限公司；维生素C，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；Tris（别名三羟甲基氨基甲烷、缓血酸胺），成都化学试剂厂；透析袋，成都奥克生物技术有限公司；甲醇、无水乙醇、盐酸、邻苯三酚、氯仿、正丁醇、过氧化氢、七水合硫酸亚铁、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、葡萄糖、蒽酮等均为国产分析纯。

1.3主要仪器设备

UV1000紫外可见分光光度计，上海天美科学仪器有限公司；Alpha1-2 LD plus冷冻干燥机，德国CHRIST；JD100-4G电子天平，沈阳龙腾电子有限公司； RE-52A旋转蒸发器，上海红叶仪器设备公司；SHB-III循环水式真空泵，巩义市宇翔仪器有限公司；TDL-5C低速台式大容量离心机，上海安亭科学仪器厂；粉碎机、电热鼓风干燥箱、恒温水浴锅等。

1.4试验方法

1.4.1枳椇粗多糖及精制多糖的制备由四川理工学院食品质量与安全实验室制备，方法参照文献[3]。

1.4.2枳椇多糖对羟自由基的清除试验枳椇多糖对羟自由基的清除是通过Fenton反应模型实现的，Fe2+与 邻二氮菲在 pH值2～9 的范围内可形成稳定的橙红色络合物，其最大吸收波长为510 nm[4]。Fenton体系中产生的羟自由基，可使Fe2+氧化为Fe3+，从而使在510 nm处的最大吸收峰消失，据此可推知系统中羟自由基的量的变化。当加入抗氧化剂时，枳椇多糖能清除溶液中游离的·OH，因而可以通过测量吸光度间接计算出样品对·OH 的清除率。精确称取一定量的枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C，均配制成0.50、1.00、150、2.00、2.50 mg/mL等5个浓度的待测液。试验分成5个平行组：调空白、空白组、对照组、样品组、本底组。取 0.75 mmol/L 邻二氮菲溶液1.0 mL于试管中，加入 0.2 mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS，pH值7.4）2.0 mL和蒸馏水10 mL，充分混匀后，依次加入1.0 mL新配制的0.75 mmol/L硫酸亚铁溶液，混匀，加入1.0 mL新配制的0.01%双氧水（H2O2），37 ℃下温浴60 min后，在510 nm处测吸光度，所测得的数据为损伤管的吸光度D损伤；未损伤管以1.0 mL蒸馏水代替损伤管中1.0 mL 0.01%双氧水（H2O2），操作方法同损伤管，可测得510 nm未损伤管的吸光度D未损；样品管以1.0 mL样品代替损伤管中的1.0 mL 蒸馏水，操作方法同损伤管，可测得510 nm样品管的吸光度D样 ；将样品组中除样品不变，其余以对应体积蒸馏水代替，可测得510 nm样品管的吸光度D本底（详细加样量如表1）。记录数据，分别计算枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C对羟自由基的清除率。清除率（P）的计算公式为：P=（D样-D本底-D损伤）/（D未损-D损伤）×100%。式中的吸光度D详见表1。endprint

2结果与分析

2.1枳椇多糖对羟自由基的清除作用

羟自由基毒性强、危害大，往往很难消除[7]。它的清除率是反映样品抗氧化活性的重要指标。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除羟自由基的效果如图1所示。由图1可以看出，在试验浓度范围0.50～2.50 mg/mL，清除率与样品浓度有良好的线性关系。三者清除羟自由基的能力大小是维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为1089%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖、维生素C清除羟自由基的能力都是逐渐增大，当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。可见枳椇多糖有明显的清除羟自由基的作用。

2.2枳椇多糖对DPPH自由基清除作用

二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）是一种很稳定的以氮为中心的自由基，其结构中含有3个苯环，1个氮原子上有1个孤对电子，在517 nm有强吸收，其甲醇溶液呈紫色，当在其甲醇溶液中加入自由基清除剂时，DPPH·的单电子被配对，溶液的颜色会变浅，517 nm处的吸光度变小，而且颜色变浅的程度可以反映清除效果的大小[8]。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除DPPH自由基的效果比较见图2。由图2可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖和维生素C对DPPH自由基的清除率逐渐升高，而枳椇精制多糖对DPPH自由基的清除率变化不大，略有升高。当浓度为 0.20 mg/mL 时，枳椇粗多糖的清除率为43.58%，枳椇精制多糖的清除率达到67.57%，甚至高于维生素C的清除率（6081%），这说明在较小浓度范围内枳椇多糖就具有清除DPPH自由基的能力。当浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖与维生素C的清除能力相当，达到了80%左右。

2.3枳椇多糖对超氧阴离子自由基的清除作用

超氧阴离子性质活泼，具有很强的氧化性和还原性，过量生成可致组织损伤，在体内主要通过超氧歧化酶清除[9]。本试验以邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基为模型。邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子在体系中不断增加，生成有颜色的中间代谢产物，加入清除剂，可清除超氧阴离子自由基，阻止产物积累，使325 nm下的吸光度变小。故将枳椇多糖样品溶液及阳性对照物维生素C作为抑制剂加入到超氧阴离子自由基发生体系中，测定其吸光度的变化来判断样品对超氧阴离子自由基的清除效果。

枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液对超氧阴离子自由基的清除效果比较见图3。由图3可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，维生素C的清除率稳定，均高于90%，枳椇粗多糖的清除率略有上升，维持在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度上升，但均低于15%。当浓度达到1.00 mg/mL时，枳椇粗多糖的清除率为48.24%，枳椇精制多糖的清除率仅为14.79%。可见在对超氧阴离子自由基清除效果方面，枳椇粗多糖要优于枳椇精制多糖，而维生素C又明显高于二者，说明枳椇多糖对超氧阴离子自由基有一定的清除作用。

3结论

本试验通过羟自由基体系（·OH）、二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）和超氧阴离子自由基体系（ O-2· ），对枳椇多糖的体外抗氧化活性进行研究，以维生素C作为阳性对照，比较枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对3种自由基的清除效果。研究表明，对Fenton体系产生的羟自由基，枳椇精制多糖有较好清除作用，清除能力大小为：维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为10.89%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。在DPPH自由基体系中，枳椇多糖在较低浓度就表现出对DPPH自由基很高的清除能力，在浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C的清除能力接近，高达80%左右。枳椇多糖对超氧阴离子有一定清除作用，但清除效果不明显，枳椇粗多糖的清除率在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度略有上升，但低于15%；清除作用大小为：维生素C>枳椇粗多糖>枳椇精制多糖。枳椇粗多糖与枳椇精制多糖比较，对羟自由基体系、DPPH自由基的清除效果，是枳椇精制多糖优于枳椇粗多糖，但对超氧阴离子自由基的清除效果是枳椇粗多糖优于枳椇精制多糖，可能是枳椇粗多糖中未除净的色素等杂质也起到了一定的清除超氧阴离子自由基的作用，使得枳椇粗多糖的清除率大于枳椇精制多糖。可见，并不是样品的纯度越高，清除自由基的效果越好。总之，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都有不同程度的清除作用，可以开发成枳椇多糖抗氧化作用的功能性食品。

参考文献：

[1]方允中，李文杰. 自由基与酶[M]. 北京：科学出版社，1989：244.

[2]阎果兰，靳利娥. 食品中抗氧化剂的发展趋势[J]. 山西食品工业，2005（3）：20-22.

[3]魏丕伟，王凌云，熊俐，等. 枳椇多糖提取工艺研究[J]. 江苏农业科学，2012，40（8）：272-274.

[4]凌关庭. 抗氧化食品与健康[M]. 北京：化学工业出版社，2005：340.

[5]索有瑞，王洪伦，汪汉卿. 柴达木盆地唐古特白刺果实降血脂和抗氧化作用研究[J]. 天然产物研究与开发，2004，16（1）：54-58.

[6]施建敏，俞志雄，庞会忠，等.华木莲叶黄酮类化合物抗氧化作用[J]. 江西农业大学学报，2006，28（5）：693-697.

[7]梁引库，吴三桥，李新生. 硫酸酯化黄精多糖抗氧化活性研究[J]. 江苏农业科学，2013，41（2）：254-256.

[8]朱利娜，强伟，史俊友，等. 唐古特白刺果粉的抗氧化作用研究[J]. 中国野生植物资源，2010，29（2）：41-43， 47.

[9]索有瑞. 柴达木盆地白刺研究与开发[M]. 北京：科学出版社，2010：323-330.endprint

2结果与分析

2.1枳椇多糖对羟自由基的清除作用

羟自由基毒性强、危害大，往往很难消除[7]。它的清除率是反映样品抗氧化活性的重要指标。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除羟自由基的效果如图1所示。由图1可以看出，在试验浓度范围0.50～2.50 mg/mL，清除率与样品浓度有良好的线性关系。三者清除羟自由基的能力大小是维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为1089%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖、维生素C清除羟自由基的能力都是逐渐增大，当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。可见枳椇多糖有明显的清除羟自由基的作用。

2.2枳椇多糖对DPPH自由基清除作用

二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）是一种很稳定的以氮为中心的自由基，其结构中含有3个苯环，1个氮原子上有1个孤对电子，在517 nm有强吸收，其甲醇溶液呈紫色，当在其甲醇溶液中加入自由基清除剂时，DPPH·的单电子被配对，溶液的颜色会变浅，517 nm处的吸光度变小，而且颜色变浅的程度可以反映清除效果的大小[8]。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除DPPH自由基的效果比较见图2。由图2可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖和维生素C对DPPH自由基的清除率逐渐升高，而枳椇精制多糖对DPPH自由基的清除率变化不大，略有升高。当浓度为 0.20 mg/mL 时，枳椇粗多糖的清除率为43.58%，枳椇精制多糖的清除率达到67.57%，甚至高于维生素C的清除率（6081%），这说明在较小浓度范围内枳椇多糖就具有清除DPPH自由基的能力。当浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖与维生素C的清除能力相当，达到了80%左右。

2.3枳椇多糖对超氧阴离子自由基的清除作用

超氧阴离子性质活泼，具有很强的氧化性和还原性，过量生成可致组织损伤，在体内主要通过超氧歧化酶清除[9]。本试验以邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基为模型。邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子在体系中不断增加，生成有颜色的中间代谢产物，加入清除剂，可清除超氧阴离子自由基，阻止产物积累，使325 nm下的吸光度变小。故将枳椇多糖样品溶液及阳性对照物维生素C作为抑制剂加入到超氧阴离子自由基发生体系中，测定其吸光度的变化来判断样品对超氧阴离子自由基的清除效果。

枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液对超氧阴离子自由基的清除效果比较见图3。由图3可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，维生素C的清除率稳定，均高于90%，枳椇粗多糖的清除率略有上升，维持在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度上升，但均低于15%。当浓度达到1.00 mg/mL时，枳椇粗多糖的清除率为48.24%，枳椇精制多糖的清除率仅为14.79%。可见在对超氧阴离子自由基清除效果方面，枳椇粗多糖要优于枳椇精制多糖，而维生素C又明显高于二者，说明枳椇多糖对超氧阴离子自由基有一定的清除作用。

3结论

本试验通过羟自由基体系（·OH）、二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）和超氧阴离子自由基体系（ O-2· ），对枳椇多糖的体外抗氧化活性进行研究，以维生素C作为阳性对照，比较枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对3种自由基的清除效果。研究表明，对Fenton体系产生的羟自由基，枳椇精制多糖有较好清除作用，清除能力大小为：维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为10.89%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。在DPPH自由基体系中，枳椇多糖在较低浓度就表现出对DPPH自由基很高的清除能力，在浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C的清除能力接近，高达80%左右。枳椇多糖对超氧阴离子有一定清除作用，但清除效果不明显，枳椇粗多糖的清除率在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度略有上升，但低于15%；清除作用大小为：维生素C>枳椇粗多糖>枳椇精制多糖。枳椇粗多糖与枳椇精制多糖比较，对羟自由基体系、DPPH自由基的清除效果，是枳椇精制多糖优于枳椇粗多糖，但对超氧阴离子自由基的清除效果是枳椇粗多糖优于枳椇精制多糖，可能是枳椇粗多糖中未除净的色素等杂质也起到了一定的清除超氧阴离子自由基的作用，使得枳椇粗多糖的清除率大于枳椇精制多糖。可见，并不是样品的纯度越高，清除自由基的效果越好。总之，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都有不同程度的清除作用，可以开发成枳椇多糖抗氧化作用的功能性食品。

参考文献：

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[7]梁引库，吴三桥，李新生. 硫酸酯化黄精多糖抗氧化活性研究[J]. 江苏农业科学，2013，41（2）：254-256.

[8]朱利娜，强伟，史俊友，等. 唐古特白刺果粉的抗氧化作用研究[J]. 中国野生植物资源，2010，29（2）：41-43， 47.

[9]索有瑞. 柴达木盆地白刺研究与开发[M]. 北京：科学出版社，2010：323-330.endprint

2结果与分析

2.1枳椇多糖对羟自由基的清除作用

羟自由基毒性强、危害大，往往很难消除[7]。它的清除率是反映样品抗氧化活性的重要指标。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除羟自由基的效果如图1所示。由图1可以看出，在试验浓度范围0.50～2.50 mg/mL，清除率与样品浓度有良好的线性关系。三者清除羟自由基的能力大小是维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为1089%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖、维生素C清除羟自由基的能力都是逐渐增大，当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。可见枳椇多糖有明显的清除羟自由基的作用。

2.2枳椇多糖对DPPH自由基清除作用

二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）是一种很稳定的以氮为中心的自由基，其结构中含有3个苯环，1个氮原子上有1个孤对电子，在517 nm有强吸收，其甲醇溶液呈紫色，当在其甲醇溶液中加入自由基清除剂时，DPPH·的单电子被配对，溶液的颜色会变浅，517 nm处的吸光度变小，而且颜色变浅的程度可以反映清除效果的大小[8]。枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液清除DPPH自由基的效果比较见图2。由图2可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，枳椇粗多糖和维生素C对DPPH自由基的清除率逐渐升高，而枳椇精制多糖对DPPH自由基的清除率变化不大，略有升高。当浓度为 0.20 mg/mL 时，枳椇粗多糖的清除率为43.58%，枳椇精制多糖的清除率达到67.57%，甚至高于维生素C的清除率（6081%），这说明在较小浓度范围内枳椇多糖就具有清除DPPH自由基的能力。当浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖与维生素C的清除能力相当，达到了80%左右。

2.3枳椇多糖对超氧阴离子自由基的清除作用

超氧阴离子性质活泼，具有很强的氧化性和还原性，过量生成可致组织损伤，在体内主要通过超氧歧化酶清除[9]。本试验以邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基为模型。邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子在体系中不断增加，生成有颜色的中间代谢产物，加入清除剂，可清除超氧阴离子自由基，阻止产物积累，使325 nm下的吸光度变小。故将枳椇多糖样品溶液及阳性对照物维生素C作为抑制剂加入到超氧阴离子自由基发生体系中，测定其吸光度的变化来判断样品对超氧阴离子自由基的清除效果。

枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C 3种样品溶液对超氧阴离子自由基的清除效果比较见图3。由图3可以看出，在试验浓度范围0.20～1.00 mg/mL，随着样品浓度逐渐增大，维生素C的清除率稳定，均高于90%，枳椇粗多糖的清除率略有上升，维持在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度上升，但均低于15%。当浓度达到1.00 mg/mL时，枳椇粗多糖的清除率为48.24%，枳椇精制多糖的清除率仅为14.79%。可见在对超氧阴离子自由基清除效果方面，枳椇粗多糖要优于枳椇精制多糖，而维生素C又明显高于二者，说明枳椇多糖对超氧阴离子自由基有一定的清除作用。

3结论

本试验通过羟自由基体系（·OH）、二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）和超氧阴离子自由基体系（ O-2· ），对枳椇多糖的体外抗氧化活性进行研究，以维生素C作为阳性对照，比较枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对3种自由基的清除效果。研究表明，对Fenton体系产生的羟自由基，枳椇精制多糖有较好清除作用，清除能力大小为：维生素C>枳椇精制多糖>枳椇粗多糖。在浓度为0.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率为10.89%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率为38.44%；当浓度达到2.50 mg/mL时，枳椇粗多糖对羟自由基的清除率高达68.32%，枳椇精制多糖对羟自由基的清除率高达81.43%。在DPPH自由基体系中，枳椇多糖在较低浓度就表现出对DPPH自由基很高的清除能力，在浓度为1.00 mg/mL时枳椇粗多糖、枳椇精制多糖和维生素C的清除能力接近，高达80%左右。枳椇多糖对超氧阴离子有一定清除作用，但清除效果不明显，枳椇粗多糖的清除率在30%～50%之间，枳椇精制多糖的清除率随浓度略有上升，但低于15%；清除作用大小为：维生素C>枳椇粗多糖>枳椇精制多糖。枳椇粗多糖与枳椇精制多糖比较，对羟自由基体系、DPPH自由基的清除效果，是枳椇精制多糖优于枳椇粗多糖，但对超氧阴离子自由基的清除效果是枳椇粗多糖优于枳椇精制多糖，可能是枳椇粗多糖中未除净的色素等杂质也起到了一定的清除超氧阴离子自由基的作用，使得枳椇粗多糖的清除率大于枳椇精制多糖。可见，并不是样品的纯度越高，清除自由基的效果越好。总之，枳椇粗多糖、枳椇精制多糖对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都有不同程度的清除作用，可以开发成枳椇多糖抗氧化作用的功能性食品。

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