国产和进口微柱凝胶卡鉴定婴幼儿ABO及RhD血型效果比较

刘炜

[摘要] 目的 评价国产和进口微柱凝胶卡鉴定婴幼儿ABO及RhD血型的应用效果。 方法 分别采用国产微柱凝胶血型鉴定卡和进口血型鉴定卡对早产儿、足月新生儿、血液病患儿及其他患儿进行A抗原、B抗原以及D抗原鉴定，比较两种方法的符合情况以及凝集强度。 结果 国产微柱凝胶血型鉴定卡与进口血型鉴定卡对婴幼儿ABO和RhD血型鉴定结果差异无统计学意义（P>0.05）。结论 国产微柱凝胶卡鉴定结果与进口微柱凝胶卡相似，并且费用更低，值得临床推广使用。

[关键词] 国产； 进口；微柱凝胶卡；ABO；RhD

[中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）22-0142-03

[Abstract] Objective To evaluate application of domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood types. Methods ABO and RhD blood types of premature， full-term newborns， blood diseases infants and infants with other diseases were detected by domestic and import micro column gel card. Consistency and agglutination intensity were analyzed. Results Domestic and import micro column gel card in infant ABO and RhD blood type showed no significant difference（P>0.05）. Conclusion Detection of domestic micro column gel card in infant ABO and RhD blood types shows similar results with import micro column gel card， with less cost， worthy of clinical application.

[Key words] Domestic； Import； Micro column gel card； ABO； RhD

微柱凝胶卡是目前临床上用于鉴定ABO血型和RhD血型的主要方法，但临床上主要还是使用进口的微柱凝胶卡进行鉴定[1，2]。随着国产微柱凝胶卡技术的发展，生产工艺的改进，国产微柱凝胶卡也逐渐在临床检验中占据一席之地。本研究通过对比分析国产微柱凝胶卡和进口微柱凝胶卡在鉴定婴幼儿ABO血型和RhD血型的效果，探讨两种鉴定卡鉴定结果的一致性和存在的差异。现报道如下。

1资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年1～12月在我院住院的3岁以下患儿8 944例，其中男5 351例，女3 593例。≤6个月龄者2 142例，其中早产儿53例，足月新生儿195例，需要化疗或者反复输血者311例，其他疾病患儿1 583例。7个月～3岁患儿6 802例。

1.2检测方法

将被测血标本用生理盐水配制成5%的红细胞悬液，采用国产微柱凝胶卡初步鉴定抗凝血标本A抗原、B抗原和D抗原，所有操作严格按照说明书进行，卡式离心机为厂商配套阶梯式离心机。另将被检测血标本采用低离子介质配制成5%的红细胞悬液，采用进口微柱凝胶血型鉴定卡对A抗原、B抗原、D抗原进行复核，所有操作严格按照说明书进行，离心机为厂商提供的配套的离心机。凝集强度判定：强凝集：+++～++++，弱凝集：+～++。

1.3统计学方法

采用SPSS15.0统计学软件进行分析，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两种方法对不同组A抗原凝集强度鉴定结果

两种方法对不同A抗原凝集强度鉴定结果比较，差异无统计意义（P>0.05）。见表1。

2.2两种方法对不同组B抗原凝集强度鉴定结果

两种方法对不同B抗原凝集强度鉴定结果比较，差异无统计意义（P>0.05）。见表2。

2.3两种方法对不同组RhD抗原凝集强度鉴定结果

两种方法对不同RhD抗原凝集强度鉴定结果比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。

3讨论

维也纳大学的Karl Landsteiner于1900年发现了人类红细胞的同种凝集现象，随后发现了人类第1个血型系——ABO血型系。A抗原和B抗原的构成受控于H座位基因和ABO座位基因。H基因编码岩藻糖转移酶，形成H抗原，A基因和B基因编码糖基转移酶分别产生A抗原和B抗原。O基因是无效基因。ABO抗原在胚胎早期产生，2～4岁发育完成。在出生时ABO抗体没有产生，或者产生较弱，3个月时反应和成年人一样，5～10岁时抗体产生达到高峰，老年时抗体水平较年轻人低。A型血指红细胞上有A抗原，血清中有抗B抗体，B血型为红细胞上有B抗原，血清中有抗A抗体，AB型为红细胞上有A抗原和B抗原，血清中没有抗A抗体和抗B抗体，O型血为红细胞上无A抗原和B抗原，血清中有抗A抗体和抗B抗体。Landsteiner原则指只有在ABO血型系统红细胞缺乏某抗原的血清中一定预计地含有该抗原的抗体[3]。ABO鉴定的原理是根据ABO血型的分型原则及其独特的特质，利用凝集试验技术通过红细胞定型和血清定型两组试验并核对结果，从而鉴定ABO血型。对新生儿ABO血型的鉴定红细胞定型常常反应较弱，而血清定型不可靠。ABO血型鉴定的方法主要有玻片法、试管法、凝胶法。endprint

Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质，故而命名[4]。凡是人体血液红细胞上有Rh凝集原者，为Rh阳性，反之为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别被划分为Rh阳性和阴性两种。随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。Rh血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康都有非常重要的作用。Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测，根据患者红细胞是否带有D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。

微柱凝胶法由Lpierre博士于1986年发明，用于检测红细胞抗原抗体反应，具有操作简单、结果直观、容易标准化等优点，并且能够自动化检测，因此在临床上迅速得到推广应用[5-8]。微柱凝胶卡法目前被广泛应用于血型鉴定、不规则抗体筛选、交叉配合、鉴定及直接或间接抗人球白实验中的检验方法，其原理是通过在微柱中加入凝胶，红细胞膜抗原与相应的抗体在凝胶介质中发生免疫反应，利用凝胶的分子筛作用，通过调节凝胶孔径，只允许红细胞通过，而红细胞的凝块不能通过，利用重力的作用将凝集红细胞和游离红细胞分离[9，10]。1994 年微柱凝胶技术获得美国 FDA批准为免疫学检测技术，欧美等发达国家已经将微柱凝胶技术作为常规性的检测技术而在临床广泛推广。微柱凝胶技术的核心技术是凝胶分子筛，凝胶分子之间存在的间隙排阻能够将发生凝集反应的红细胞阻滞在凝胶内，而未发生凝集的单个红细胞则可以穿过微孔运动到达柱底，从而辨别是否存在凝集反应。红细胞与抗体发生凝集时，红细胞聚集分布在凝胶的上部或凝胶中，则判断存在凝集，为阳性，未发生凝集反应的红细胞则沉积于管底，则判断无凝集反应，为阴性。微柱凝胶卡有较高的灵敏度和特异性，尤其是检测规则抗体时，对反定型弱凝集也具有不错的优势。微柱凝集卡倒置会导致分子胶及上层黏液层发生变化，凝胶空隙发生不规则变化，会在血型鉴定过程中出现假阳性结果，因此在运输、储存微柱凝胶卡时应严禁剧烈的颠簸以及倒置，对于已经发生倒置的微柱凝胶卡，通过离心的方法可以恢复[11，12]。有研究比较微柱凝胶卡与传统方法对的抗球蛋白的筛选以及不规则抗体的检测，认为柱凝胶法具有对抗体敏感性高的优点，并且反应结果容易判读，在操作过程中采用微柱凝胶法对间接抗人球蛋白进行试验时可以不同进行洗涤红细胞的步骤，传统抗球蛋白试验需要加入质控细胞，但是微柱凝胶法不用，其还可以检出传统方法不能检测出的抗体，微柱凝胶法更容易自动化、标准化。微柱凝胶技术属于微试管柱凝集技术，该技术国外已经成为红细胞血型血清学检测的常规方法。国内的微柱凝集技术主要是凝胶凝集技术、玻璃珠柱凝集技术以及国产Bioxnn微柱凝胶免疫检测试剂卡等[13，14]。

目前进口微柱凝胶卡在临床检验中应用较广，但是费用相对较高。随着我国国产微柱凝胶卡生产技术的改进，其在临床上的应用也逐渐推广。本研究主要采用两种微柱凝胶卡对婴幼儿ABO和RhD血型的鉴定。结果显示，两种方法对不同年龄段以及6个月以下不同病因的患者鉴定结果比较差异无统计学意义。凝集效应为弱凝集的患儿多为早产儿。除了早产儿，两种方法ABO血型鉴定中达到强凝集的比例均超过了95%，而RhD血型鉴定中，除了早产儿和少量足月新生儿为弱凝集，其他均为强凝集，也说明RhD抗原在出生时基本已发育完成。

综上所述，微柱凝胶卡在婴幼儿ABO和RhD血型鉴定中具有操作简便、结果直观等优点，而国产微柱凝胶卡鉴定结果与进口微柱凝胶卡没有显著差异，并且费用更低，值得临床推广使用。

[参考文献]

[1] 袁晓华，胡惠萍. 国产微柱凝胶卡对血型鉴定的结果分析[J]. 国际检验医学杂志，2013，34（12）： 1585-1586.

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[3] 杨宝成，苏宇清，魏天莉，等. Landsteiner-Wiener血型系统测序分型技术的建立[J]. 江西医学检验，2007，25（3）：206，223-224.

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[5] 金鑫，沈健，施欣慰. 输血与检验[J]. 临床血液学杂志，2012，25（4）： 491-494.

[6] 闫朝春，蒋玲，陈丽梅，等.导致微柱凝胶卡式交叉配血试验假阳性结果的原因分析[J]. 国际检验医学杂志，2011，32（15）： 1737-1738.

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[9] Novaretti MC，Jens E，Pagliarini T，et al. Comparison of conventional tube test technique and gel microcolumn assay fordirect antiglobulin test：a large study[J]. J Clin Lab Anal，2004，18（5）：255-258.

[10] 周安祥，王思丽，张默吟. 微柱凝胶卡式血型鉴定的干扰因素分析及处理[J]. 吉林医学，2012，33（23）： 5044-5045.

[11] 陈维佳，王冬倩，童军. 微柱凝胶免疫实验技术基础[M]//李勇，马学严.实用免疫血液学[M]. 第2版.西安：科学出版社，2006：562-570.

[12] 赵祥胜. 柱凝聚技术检测孕妇血清IgG抗体水平[J]. 临床输血与检验，2000，2（3）：32-33.

[13] 吴定昌，江慧. 微柱凝胶法检测201例孕妇ABO血结果分析[J]. 江西医学检验，2007，25（1）：82，91.

[14] 武建. 柱凝集技术的临床应用及其实验研究现状[J]. 中国输血杂志，2003，16（5）：369-370.

（收稿日期：2014-04-08）endprint

Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质，故而命名[4]。凡是人体血液红细胞上有Rh凝集原者，为Rh阳性，反之为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别被划分为Rh阳性和阴性两种。随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。Rh血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康都有非常重要的作用。Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测，根据患者红细胞是否带有D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。

微柱凝胶法由Lpierre博士于1986年发明，用于检测红细胞抗原抗体反应，具有操作简单、结果直观、容易标准化等优点，并且能够自动化检测，因此在临床上迅速得到推广应用[5-8]。微柱凝胶卡法目前被广泛应用于血型鉴定、不规则抗体筛选、交叉配合、鉴定及直接或间接抗人球白实验中的检验方法，其原理是通过在微柱中加入凝胶，红细胞膜抗原与相应的抗体在凝胶介质中发生免疫反应，利用凝胶的分子筛作用，通过调节凝胶孔径，只允许红细胞通过，而红细胞的凝块不能通过，利用重力的作用将凝集红细胞和游离红细胞分离[9，10]。1994 年微柱凝胶技术获得美国 FDA批准为免疫学检测技术，欧美等发达国家已经将微柱凝胶技术作为常规性的检测技术而在临床广泛推广。微柱凝胶技术的核心技术是凝胶分子筛，凝胶分子之间存在的间隙排阻能够将发生凝集反应的红细胞阻滞在凝胶内，而未发生凝集的单个红细胞则可以穿过微孔运动到达柱底，从而辨别是否存在凝集反应。红细胞与抗体发生凝集时，红细胞聚集分布在凝胶的上部或凝胶中，则判断存在凝集，为阳性，未发生凝集反应的红细胞则沉积于管底，则判断无凝集反应，为阴性。微柱凝胶卡有较高的灵敏度和特异性，尤其是检测规则抗体时，对反定型弱凝集也具有不错的优势。微柱凝集卡倒置会导致分子胶及上层黏液层发生变化，凝胶空隙发生不规则变化，会在血型鉴定过程中出现假阳性结果，因此在运输、储存微柱凝胶卡时应严禁剧烈的颠簸以及倒置，对于已经发生倒置的微柱凝胶卡，通过离心的方法可以恢复[11，12]。有研究比较微柱凝胶卡与传统方法对的抗球蛋白的筛选以及不规则抗体的检测，认为柱凝胶法具有对抗体敏感性高的优点，并且反应结果容易判读，在操作过程中采用微柱凝胶法对间接抗人球蛋白进行试验时可以不同进行洗涤红细胞的步骤，传统抗球蛋白试验需要加入质控细胞，但是微柱凝胶法不用，其还可以检出传统方法不能检测出的抗体，微柱凝胶法更容易自动化、标准化。微柱凝胶技术属于微试管柱凝集技术，该技术国外已经成为红细胞血型血清学检测的常规方法。国内的微柱凝集技术主要是凝胶凝集技术、玻璃珠柱凝集技术以及国产Bioxnn微柱凝胶免疫检测试剂卡等[13，14]。

目前进口微柱凝胶卡在临床检验中应用较广，但是费用相对较高。随着我国国产微柱凝胶卡生产技术的改进，其在临床上的应用也逐渐推广。本研究主要采用两种微柱凝胶卡对婴幼儿ABO和RhD血型的鉴定。结果显示，两种方法对不同年龄段以及6个月以下不同病因的患者鉴定结果比较差异无统计学意义。凝集效应为弱凝集的患儿多为早产儿。除了早产儿，两种方法ABO血型鉴定中达到强凝集的比例均超过了95%，而RhD血型鉴定中，除了早产儿和少量足月新生儿为弱凝集，其他均为强凝集，也说明RhD抗原在出生时基本已发育完成。

综上所述，微柱凝胶卡在婴幼儿ABO和RhD血型鉴定中具有操作简便、结果直观等优点，而国产微柱凝胶卡鉴定结果与进口微柱凝胶卡没有显著差异，并且费用更低，值得临床推广使用。

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Rh血型Rh是恒河猴（Rhesus Macacus）外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质，故而命名[4]。凡是人体血液红细胞上有Rh凝集原者，为Rh阳性，反之为阴性。这样就使已发现的红细胞A、B、O及AB四种主要血型的人，又都分别被划分为Rh阳性和阴性两种。随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。Rh血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康都有非常重要的作用。Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测，根据患者红细胞是否带有D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。

微柱凝胶法由Lpierre博士于1986年发明，用于检测红细胞抗原抗体反应，具有操作简单、结果直观、容易标准化等优点，并且能够自动化检测，因此在临床上迅速得到推广应用[5-8]。微柱凝胶卡法目前被广泛应用于血型鉴定、不规则抗体筛选、交叉配合、鉴定及直接或间接抗人球白实验中的检验方法，其原理是通过在微柱中加入凝胶，红细胞膜抗原与相应的抗体在凝胶介质中发生免疫反应，利用凝胶的分子筛作用，通过调节凝胶孔径，只允许红细胞通过，而红细胞的凝块不能通过，利用重力的作用将凝集红细胞和游离红细胞分离[9，10]。1994 年微柱凝胶技术获得美国 FDA批准为免疫学检测技术，欧美等发达国家已经将微柱凝胶技术作为常规性的检测技术而在临床广泛推广。微柱凝胶技术的核心技术是凝胶分子筛，凝胶分子之间存在的间隙排阻能够将发生凝集反应的红细胞阻滞在凝胶内，而未发生凝集的单个红细胞则可以穿过微孔运动到达柱底，从而辨别是否存在凝集反应。红细胞与抗体发生凝集时，红细胞聚集分布在凝胶的上部或凝胶中，则判断存在凝集，为阳性，未发生凝集反应的红细胞则沉积于管底，则判断无凝集反应，为阴性。微柱凝胶卡有较高的灵敏度和特异性，尤其是检测规则抗体时，对反定型弱凝集也具有不错的优势。微柱凝集卡倒置会导致分子胶及上层黏液层发生变化，凝胶空隙发生不规则变化，会在血型鉴定过程中出现假阳性结果，因此在运输、储存微柱凝胶卡时应严禁剧烈的颠簸以及倒置，对于已经发生倒置的微柱凝胶卡，通过离心的方法可以恢复[11，12]。有研究比较微柱凝胶卡与传统方法对的抗球蛋白的筛选以及不规则抗体的检测，认为柱凝胶法具有对抗体敏感性高的优点，并且反应结果容易判读，在操作过程中采用微柱凝胶法对间接抗人球蛋白进行试验时可以不同进行洗涤红细胞的步骤，传统抗球蛋白试验需要加入质控细胞，但是微柱凝胶法不用，其还可以检出传统方法不能检测出的抗体，微柱凝胶法更容易自动化、标准化。微柱凝胶技术属于微试管柱凝集技术，该技术国外已经成为红细胞血型血清学检测的常规方法。国内的微柱凝集技术主要是凝胶凝集技术、玻璃珠柱凝集技术以及国产Bioxnn微柱凝胶免疫检测试剂卡等[13，14]。

目前进口微柱凝胶卡在临床检验中应用较广，但是费用相对较高。随着我国国产微柱凝胶卡生产技术的改进，其在临床上的应用也逐渐推广。本研究主要采用两种微柱凝胶卡对婴幼儿ABO和RhD血型的鉴定。结果显示，两种方法对不同年龄段以及6个月以下不同病因的患者鉴定结果比较差异无统计学意义。凝集效应为弱凝集的患儿多为早产儿。除了早产儿，两种方法ABO血型鉴定中达到强凝集的比例均超过了95%，而RhD血型鉴定中，除了早产儿和少量足月新生儿为弱凝集，其他均为强凝集，也说明RhD抗原在出生时基本已发育完成。

综上所述，微柱凝胶卡在婴幼儿ABO和RhD血型鉴定中具有操作简便、结果直观等优点，而国产微柱凝胶卡鉴定结果与进口微柱凝胶卡没有显著差异，并且费用更低，值得临床推广使用。

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