真空采血管内壁处理剂对血清TT3和TT4及TSH检测的影响
2014-08-27邓勇莹陆中奎侯有矶
邓勇莹+陆中奎+侯有矶
【摘要】 ；目的 ；评价一种真空采血管内壁处理剂对甲功三项检测结果的影响。方法 ；采用内壁处理剂处理的玻璃管与未经过内壁处理剂处理的玻璃管生产的无抗凝真空采血管， 对20例健康人进行采血测试， 考察两种无抗凝管的血清分离效果及在三个不同的检测平台上总三碘甲状原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）、促甲状腺激素（TSH）检测值的差异。结果 ；经过内壁处理剂处理的玻璃无抗凝管与未经过内壁处理的玻璃无抗凝管采血后分离血清， 经过内壁处理的玻璃无抗凝管没有纤维蛋白挂壁情况；TT3、TT4、TSH在贝克曼DXI800、西门子Centaur、雅培i2000检测平台上检测， 经过内壁处理的玻璃无抗凝管的TT3均值分别为3.10、2.38、2.07 nmol/L， 标准差分别为0.42、0.38、0.31；TT4均值分别为102.44、102.34、103.15 nmol/L， 标准差分别为15.49、16.25、17.56；TSH均值分别为2.25、2.21、2.29 mIU/L， 标准差分别为1.29、1.27、1.38；未经内壁处理的玻璃无抗凝管的TT3均值分别为2.06、1.99、2.08 nmol/L， 标准差分别为0.28、0.48、0.30；TT4均值分别为102.82、103.46、101.80 nmol/L， 标准差分别为16.48、16.66、16.17；TSH均值分别2.26、2.25、2.23 mIU/L， 标准差分别为1.33、1.28、1.28。TT3在贝克曼DXI800检测平台差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 ；在某些检测平台上， 真空采血管内壁处理剂L-720会对血清TT3检测造成干扰。
【关键词】 ；表面活性剂； L-720；真空采血管
Effect of vacuum tube inner surface treating agent on TT3， TT4 and TSH detection DENG Yong-ying， LU Zhong-kui， HOU You-ji. Department of Laboratory， Longjiang Hospital of Shunde District， Foshan 528318， China
【Abstract】ObjectiveTo evaluate effect of vacuum tube inner surface teating agent onthyroid function tests. MethodsUsed anticoagulation vacuum blood vessels made of glass tube with or without inner surface treating agent processing for blood tests on 20 healthy people， two anticoagulant tube serum separation effect and on three different detection platform TT3， TT4， TSH values differences were observed. ResultsThere was no fibrin hang wall for vacuum tube with inner surface treating agent. TT3， TT4， TSH in Beckman DXI800， Siemens Centaur， Abbott i2000 detection platform， through the lining of processing glass without anticoagulant tube For vacuum tube with inner surface treating agent， average of TT3 were 3.10 nmol/L， 2.38 nmol/L， 2.07 nmol/L， the standard deviation were 0.42， 0.38， 0.31， respectively；the average TT4 were 102.44 nmol/L， 102.34 nmol/L， 103.15 nmol/L， standard deviation were 15.49， 16.25， 17.56， respectively； average of TSH were 2.25 mIU/mIU mIU/L， 2.29 L， 2.21/L， standard deviation were 1.29， 1.27， 1.38， respectively； for vacuum tube without inner surface treating agent， average of total T3 were 2.06 nmol/L， 1.99 nmol/L， 2.08 nmol/L， the standard deviation were 0.28， 0.48， 0.30， respectively； the average of TT4 were 102.82 nmol/L， 103.46 nmol/L， 101.80 nmol/L， standard deviation were 16.48， 16.66， 16.17， respectively； average of TSH were 2.26 mIU/L， 2.25 mIU/L， 2.23 mIU， respectively， the standard deviation were 1.33， 1.28， 1.28， respectively. There were significant differences on Beckman DXI800 test platform. ConclusionIn some platform， vacuum tube treatment L-720 can cause interference to the total serum T3 detection.endprint
【Key words】Surfactant； L-720； Vacuum blood tube真空采血管是由多个部件共同组成的用于实验室分析所需的血清或血浆的采血管。例如， 玻璃真空采血管， 玻璃内表面本身对凝血系统的激活起着关键作用， 而现在广泛使用的塑料真空采血管， 由于塑料内表面不利于凝血系统的激活， 所以额外添加了以二氧化硅为主要成分的活化剂， 以促进凝血系统的激活。这些二氧化硅粒子需要涂上一层化合物， 如聚乙烯吡咯烷酮， 以帮助二氧化硅粒子黏附在塑料管壁上和让它能迅速进入血液中[1-3]。真空采血管的内表面通常涂上一层表面活性剂， 改善血液流动， 减少血细胞的黏附， 更有助于防止溶血及更好地让附在管壁的二氧化硅发挥作用。如果没有表面活性剂， 随着时间的推移， 细胞溶血和血清的不完全分离会改变血清的成分。本文所研究的是一种有机硅的表面活性剂L-720， 通过使用该活性剂进行内壁处理的真空采血管与没有经过内壁处理的真空采血管同时采血测试， 评价经过该表面活性剂内壁处理的真空采血管对甲状腺激素检测的影响。
1材料与方法
1. 1仪器与试剂贝克曼DXI800化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；西门子Centaur化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；雅培i2000化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；表面活性剂L-720；玻璃管为重庆万州神宇药用玻璃制品有限公司生产；水为超纯水。
1. 2实验方法①试管内壁处理液配制：用1 ml移液管精确吸取1 ml表面活性剂L-720于1 L容量瓶中， 用超纯水定容， 即得到1%体积比的内壁处理液。②玻璃管内壁处理：取一干净的不锈钢容器， 倒入之前配制好的内壁处理液， 然后放入经过超声清洗的玻璃管， 内壁处理液要完全浸泡玻璃管， 浸泡10 min后取出沥干， 置于80°烘箱烘2 h。③真空采血管制备：各取50支经过内壁处理的玻璃管和50支只经过超声波清洗的玻璃管， 分别进行真空压塞， 制成无抗凝真空采血管。④采血测试：20例30～60岁志愿献血者， 男女各10例， 每人各采2管血， 一管为经过内壁处理玻璃无抗凝管， 另一管是没有经过内壁处理玻璃无抗凝管。采血后竖直放置于试管架中， 静置2 h后1300 g， 离心10 min。离心后观察血清分离情况。⑤上机测试：吸取每支管的分离血清分成3份， 分别在贝克曼DXI800化学发光仪、西门子Centaur化学发光仪、雅培i2000化学发光分析仪上检测TT3、TT4、TSH检测值。
1. 3统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2. 1血清分离情况离心后仔细观察各支采血管是否存在溶血及纤维蛋白、血细胞附壁情况， 结果见表1。
2. 2不同检测平台检测项目结果比较两种无抗凝分离血清后， 直接吸出血清到样本杯里， 同时在各个平台上检测TT3、TT4、TSH三个项目。检测结果显示TT3这个项目， 在贝克曼DXI800检测平台上差异具有统计学意义（P<0.01）， 在西门子Centaur检测平台上有较明显增高的趋势， 在雅培i2000检测平台上差异无统计学意义（P>0.05）， 见表2。其余两个项目TT4、TSH在三个检测平台差异无统计学意义（P>0.05）。见表3， 表4。
3讨论
虽然真空采血管已经在国内应用多年， 但一直很少有人意识到真空采血管附加剂或处理剂会影响某些生化或免疫项目的检测值。本文所使用的这个有机硅表面活性剂就是其中一种， 它应用在血清类采血管目的是减少血细胞挂壁及溶血发生的概率。表面活性剂L-720是一种包含有亲水性聚乙二醇链的非离子硅酮类表面活性剂， 它们以均聚物或聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物连接在一个疏水性的聚二甲基硅氧烷形式存在[1， 4-6]。从小批量样本的实验结果看来， 应用了这种表面活性剂处理过的内壁的无抗凝玻璃管对减少纤维蛋白挂壁有较好的效果， 但后来取两种管的血清在不同检测平台上检测时发现， 应用L-720处理过内壁的玻璃管生产的真空采血管对甲状腺功能检测的三个比较常用的项目中的TT3有明显的影响[7， 8]。从检测原理分析， 可能是血清中的表面活性剂有促进抗-T3抗体从固相载体的表面解离下来， 降低化学发光信号而导致增加了T3浓度。用于血液采集的真空采血管中的附加剂是分析前误差的重要来源之一， 也是目前比较容易忽视的地方。临床实验室的检验人员应十分警惕真空采血管的改变带来的检测性能的变化。同时试剂生产厂家也要考虑建立表面活性剂导致抗体解吸附和（或）变性的可能性评估体系。
参考文献
[1] Cohen RR， Dastane AN. Additive preparation and method of use thereof： U.S. Patent 6， 225， 123. 2001-5-1.
[2] Anraku H， Shoji Y. Vacuum blood-collection tube： U.S. Patent 4， 856， 533. 1989-8-15.
[3] Kessler SB.Apparatus for the separation of blood components： US Patent 2， 578， 864， 1981-8-25.
[4] Zhang XD， Macosko CW， Davis HT， et al. Role of silicone surfactant in flexible polyurethane foam. J Colloid Interface Sci， 1999， 215（2）：270-279.
[5] Byun JW， Kim JU， Chung WJ， et al. Surface-grafted polystyrene beads with comb-like poly（ethylene glycol） chains： preparation and biological application. Macromol Biosci， 2004， 4（5）：512-519.
[6] Wang A， Jiang L， Mao G， et al. Direct force measurement of silicone- and hydrocarbon-based ABA triblock surfactants in alcoholic media by atomic force microscopy. J Colloid Interface Sci， 2002， 256（2）：331-340.
[7] 李岩， 王玉梅， 魏敏.浅谈临床应用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测甲状腺素的效果.中国地方病防治杂志， 2012， 27（5）：393-394.
[8] 丁金国， 姚冬明， 房玉珠， 等.促甲状腺激素在不同化学发光分析系统间的对比分析和偏倚评估.海南医学， 2010， 21（4）： 102-104.
[收稿日期：2014-04-08]endprint
【Key words】Surfactant； L-720； Vacuum blood tube真空采血管是由多个部件共同组成的用于实验室分析所需的血清或血浆的采血管。例如， 玻璃真空采血管， 玻璃内表面本身对凝血系统的激活起着关键作用， 而现在广泛使用的塑料真空采血管， 由于塑料内表面不利于凝血系统的激活， 所以额外添加了以二氧化硅为主要成分的活化剂， 以促进凝血系统的激活。这些二氧化硅粒子需要涂上一层化合物， 如聚乙烯吡咯烷酮， 以帮助二氧化硅粒子黏附在塑料管壁上和让它能迅速进入血液中[1-3]。真空采血管的内表面通常涂上一层表面活性剂， 改善血液流动， 减少血细胞的黏附， 更有助于防止溶血及更好地让附在管壁的二氧化硅发挥作用。如果没有表面活性剂， 随着时间的推移， 细胞溶血和血清的不完全分离会改变血清的成分。本文所研究的是一种有机硅的表面活性剂L-720， 通过使用该活性剂进行内壁处理的真空采血管与没有经过内壁处理的真空采血管同时采血测试， 评价经过该表面活性剂内壁处理的真空采血管对甲状腺激素检测的影响。
1材料与方法
1. 1仪器与试剂贝克曼DXI800化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；西门子Centaur化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；雅培i2000化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；表面活性剂L-720；玻璃管为重庆万州神宇药用玻璃制品有限公司生产；水为超纯水。
1. 2实验方法①试管内壁处理液配制：用1 ml移液管精确吸取1 ml表面活性剂L-720于1 L容量瓶中， 用超纯水定容， 即得到1%体积比的内壁处理液。②玻璃管内壁处理：取一干净的不锈钢容器， 倒入之前配制好的内壁处理液， 然后放入经过超声清洗的玻璃管， 内壁处理液要完全浸泡玻璃管， 浸泡10 min后取出沥干， 置于80°烘箱烘2 h。③真空采血管制备：各取50支经过内壁处理的玻璃管和50支只经过超声波清洗的玻璃管， 分别进行真空压塞， 制成无抗凝真空采血管。④采血测试：20例30～60岁志愿献血者， 男女各10例， 每人各采2管血， 一管为经过内壁处理玻璃无抗凝管， 另一管是没有经过内壁处理玻璃无抗凝管。采血后竖直放置于试管架中， 静置2 h后1300 g， 离心10 min。离心后观察血清分离情况。⑤上机测试：吸取每支管的分离血清分成3份， 分别在贝克曼DXI800化学发光仪、西门子Centaur化学发光仪、雅培i2000化学发光分析仪上检测TT3、TT4、TSH检测值。
1. 3统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2. 1血清分离情况离心后仔细观察各支采血管是否存在溶血及纤维蛋白、血细胞附壁情况， 结果见表1。
2. 2不同检测平台检测项目结果比较两种无抗凝分离血清后， 直接吸出血清到样本杯里， 同时在各个平台上检测TT3、TT4、TSH三个项目。检测结果显示TT3这个项目， 在贝克曼DXI800检测平台上差异具有统计学意义（P<0.01）， 在西门子Centaur检测平台上有较明显增高的趋势， 在雅培i2000检测平台上差异无统计学意义（P>0.05）， 见表2。其余两个项目TT4、TSH在三个检测平台差异无统计学意义（P>0.05）。见表3， 表4。
3讨论
虽然真空采血管已经在国内应用多年， 但一直很少有人意识到真空采血管附加剂或处理剂会影响某些生化或免疫项目的检测值。本文所使用的这个有机硅表面活性剂就是其中一种， 它应用在血清类采血管目的是减少血细胞挂壁及溶血发生的概率。表面活性剂L-720是一种包含有亲水性聚乙二醇链的非离子硅酮类表面活性剂， 它们以均聚物或聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物连接在一个疏水性的聚二甲基硅氧烷形式存在[1， 4-6]。从小批量样本的实验结果看来， 应用了这种表面活性剂处理过的内壁的无抗凝玻璃管对减少纤维蛋白挂壁有较好的效果， 但后来取两种管的血清在不同检测平台上检测时发现， 应用L-720处理过内壁的玻璃管生产的真空采血管对甲状腺功能检测的三个比较常用的项目中的TT3有明显的影响[7， 8]。从检测原理分析， 可能是血清中的表面活性剂有促进抗-T3抗体从固相载体的表面解离下来， 降低化学发光信号而导致增加了T3浓度。用于血液采集的真空采血管中的附加剂是分析前误差的重要来源之一， 也是目前比较容易忽视的地方。临床实验室的检验人员应十分警惕真空采血管的改变带来的检测性能的变化。同时试剂生产厂家也要考虑建立表面活性剂导致抗体解吸附和（或）变性的可能性评估体系。
参考文献
[1] Cohen RR， Dastane AN. Additive preparation and method of use thereof： U.S. Patent 6， 225， 123. 2001-5-1.
[2] Anraku H， Shoji Y. Vacuum blood-collection tube： U.S. Patent 4， 856， 533. 1989-8-15.
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[6] Wang A， Jiang L， Mao G， et al. Direct force measurement of silicone- and hydrocarbon-based ABA triblock surfactants in alcoholic media by atomic force microscopy. J Colloid Interface Sci， 2002， 256（2）：331-340.
[7] 李岩， 王玉梅， 魏敏.浅谈临床应用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测甲状腺素的效果.中国地方病防治杂志， 2012， 27（5）：393-394.
[8] 丁金国， 姚冬明， 房玉珠， 等.促甲状腺激素在不同化学发光分析系统间的对比分析和偏倚评估.海南医学， 2010， 21（4）： 102-104.
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【Key words】Surfactant； L-720； Vacuum blood tube真空采血管是由多个部件共同组成的用于实验室分析所需的血清或血浆的采血管。例如， 玻璃真空采血管， 玻璃内表面本身对凝血系统的激活起着关键作用， 而现在广泛使用的塑料真空采血管， 由于塑料内表面不利于凝血系统的激活， 所以额外添加了以二氧化硅为主要成分的活化剂， 以促进凝血系统的激活。这些二氧化硅粒子需要涂上一层化合物， 如聚乙烯吡咯烷酮， 以帮助二氧化硅粒子黏附在塑料管壁上和让它能迅速进入血液中[1-3]。真空采血管的内表面通常涂上一层表面活性剂， 改善血液流动， 减少血细胞的黏附， 更有助于防止溶血及更好地让附在管壁的二氧化硅发挥作用。如果没有表面活性剂， 随着时间的推移， 细胞溶血和血清的不完全分离会改变血清的成分。本文所研究的是一种有机硅的表面活性剂L-720， 通过使用该活性剂进行内壁处理的真空采血管与没有经过内壁处理的真空采血管同时采血测试， 评价经过该表面活性剂内壁处理的真空采血管对甲状腺激素检测的影响。
1材料与方法
1. 1仪器与试剂贝克曼DXI800化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；西门子Centaur化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；雅培i2000化学发光分析仪， 配套原装试剂、校准品及质控品；表面活性剂L-720；玻璃管为重庆万州神宇药用玻璃制品有限公司生产；水为超纯水。
1. 2实验方法①试管内壁处理液配制：用1 ml移液管精确吸取1 ml表面活性剂L-720于1 L容量瓶中， 用超纯水定容， 即得到1%体积比的内壁处理液。②玻璃管内壁处理：取一干净的不锈钢容器， 倒入之前配制好的内壁处理液， 然后放入经过超声清洗的玻璃管， 内壁处理液要完全浸泡玻璃管， 浸泡10 min后取出沥干， 置于80°烘箱烘2 h。③真空采血管制备：各取50支经过内壁处理的玻璃管和50支只经过超声波清洗的玻璃管， 分别进行真空压塞， 制成无抗凝真空采血管。④采血测试：20例30～60岁志愿献血者， 男女各10例， 每人各采2管血， 一管为经过内壁处理玻璃无抗凝管， 另一管是没有经过内壁处理玻璃无抗凝管。采血后竖直放置于试管架中， 静置2 h后1300 g， 离心10 min。离心后观察血清分离情况。⑤上机测试：吸取每支管的分离血清分成3份， 分别在贝克曼DXI800化学发光仪、西门子Centaur化学发光仪、雅培i2000化学发光分析仪上检测TT3、TT4、TSH检测值。
1. 3统计学方法采用SPSS18.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2. 1血清分离情况离心后仔细观察各支采血管是否存在溶血及纤维蛋白、血细胞附壁情况， 结果见表1。
2. 2不同检测平台检测项目结果比较两种无抗凝分离血清后， 直接吸出血清到样本杯里， 同时在各个平台上检测TT3、TT4、TSH三个项目。检测结果显示TT3这个项目， 在贝克曼DXI800检测平台上差异具有统计学意义（P<0.01）， 在西门子Centaur检测平台上有较明显增高的趋势， 在雅培i2000检测平台上差异无统计学意义（P>0.05）， 见表2。其余两个项目TT4、TSH在三个检测平台差异无统计学意义（P>0.05）。见表3， 表4。
3讨论
虽然真空采血管已经在国内应用多年， 但一直很少有人意识到真空采血管附加剂或处理剂会影响某些生化或免疫项目的检测值。本文所使用的这个有机硅表面活性剂就是其中一种， 它应用在血清类采血管目的是减少血细胞挂壁及溶血发生的概率。表面活性剂L-720是一种包含有亲水性聚乙二醇链的非离子硅酮类表面活性剂， 它们以均聚物或聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物连接在一个疏水性的聚二甲基硅氧烷形式存在[1， 4-6]。从小批量样本的实验结果看来， 应用了这种表面活性剂处理过的内壁的无抗凝玻璃管对减少纤维蛋白挂壁有较好的效果， 但后来取两种管的血清在不同检测平台上检测时发现， 应用L-720处理过内壁的玻璃管生产的真空采血管对甲状腺功能检测的三个比较常用的项目中的TT3有明显的影响[7， 8]。从检测原理分析， 可能是血清中的表面活性剂有促进抗-T3抗体从固相载体的表面解离下来， 降低化学发光信号而导致增加了T3浓度。用于血液采集的真空采血管中的附加剂是分析前误差的重要来源之一， 也是目前比较容易忽视的地方。临床实验室的检验人员应十分警惕真空采血管的改变带来的检测性能的变化。同时试剂生产厂家也要考虑建立表面活性剂导致抗体解吸附和（或）变性的可能性评估体系。
参考文献
[1] Cohen RR， Dastane AN. Additive preparation and method of use thereof： U.S. Patent 6， 225， 123. 2001-5-1.
[2] Anraku H， Shoji Y. Vacuum blood-collection tube： U.S. Patent 4， 856， 533. 1989-8-15.
[3] Kessler SB.Apparatus for the separation of blood components： US Patent 2， 578， 864， 1981-8-25.
[4] Zhang XD， Macosko CW， Davis HT， et al. Role of silicone surfactant in flexible polyurethane foam. J Colloid Interface Sci， 1999， 215（2）：270-279.
[5] Byun JW， Kim JU， Chung WJ， et al. Surface-grafted polystyrene beads with comb-like poly（ethylene glycol） chains： preparation and biological application. Macromol Biosci， 2004， 4（5）：512-519.
[6] Wang A， Jiang L， Mao G， et al. Direct force measurement of silicone- and hydrocarbon-based ABA triblock surfactants in alcoholic media by atomic force microscopy. J Colloid Interface Sci， 2002， 256（2）：331-340.
[7] 李岩， 王玉梅， 魏敏.浅谈临床应用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测甲状腺素的效果.中国地方病防治杂志， 2012， 27（5）：393-394.
[8] 丁金国， 姚冬明， 房玉珠， 等.促甲状腺激素在不同化学发光分析系统间的对比分析和偏倚评估.海南医学， 2010， 21（4）： 102-104.
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