一例黄牛魏氏梭菌和巴氏杆菌混合感染的诊断

2014-08-15海正虎宁夏固原市原州区炭山乡兽医站756000

现代畜牧科技 2014年4期

海正虎（宁夏固原市原州区炭山乡兽医站756000）

魏氏梭菌是革兰氏阳性大杆菌，属条件性致病菌，广泛存在于自然界，是肠道中常在菌群。该菌能产生外毒素和酶类，其中外毒素是主要的致病因子。动物一旦感染，死亡率可达70%～100%。巴氏杆菌是革兰氏阴性，两极浓染的短小球杆菌，是呼吸道常在的菌群。现将一例黄牛魏氏梭菌和巴氏杆菌混合感染，诊断情况报告如下。

1 基本情况

2013年5月3日固原市原州区彭堡镇撒门村村民马某报告自家饲养4头牛突然死亡，当日赴现场采样。主诉其饲养的牛有一头于3天前出现流延，怀疑有病，随在固原市城区一家兽药店买来“痘病5号”（主要成分为板蓝根）等药物用于治疗，于2013年5月3日早7点左右注射后，外出劳动，14点左右回来后发现4头牛全部死亡。在病料中分离出1株有荚膜革兰氏阳性的粗大杆菌和大量的两极浓染的革兰氏阴性的球杆菌，在CDC厌氧鲜血琼脂平板上培养后形成溶血圈，能使牛奶暴烈发酵，肠毒素能使小白鼠在24小时内死亡。

2 流行情况

不同品种、性别的牛都可感染发病，除牛发病外，马、羊、猪、犬也大量发病。一般呈零星散发，个别的呈区域性流行。一年四季均可发生，但春季气候变化较大时增多。有统计发病率只有0.41%～0.97%，但致死率高达91.0%～95.1%，造成巨大的经济损失。本病各种年龄牛都可发生，但青壮年膘情较好牛发病较多。在同一地区，有的村牲畜发病，而邻近村不发病，在同一村中，有的户牲畜发病，有的户牲畜却不发病。

3 症状

本病呈急性经过，发病急，死亡快，症状不明显，以猝死为特征，多数不见症状突然死亡。病理稍长者，可达数小时，主要有精神不振，腹痛，呼吸困难，全身肌肉震颤，大量流涎，倒地哞叫，四肢划动，很快死亡。

4 剖检变化

病死牛眼结膜发绀，肛门外翻。胆囊充盈，胆汁清淡，胆囊肿大3倍以上。肝脏肿大出血，脾脏软化不肿大，肺脏呈间质性肺炎变化，瓣胃和瘤胃黏膜脱落，真胃见大米粒大出血点。心室外膜上麸皮样出血斑。小肠弥漫性出血，有糊状红褐色内容物。取肝、脾、肺各50克，小肠一段送实验室检查。

5 实验室检查

显微镜检查。无菌取肝、肺、脾、淋巴结触涂片革兰氏染色镜检，肝肺淋巴结涂片中见有呈撮两极浓染的革兰氏阴性的球杆菌，在肝脾触片中见有少量革兰氏阳性有荚膜成对或单个存在的粗大杆菌。

细菌分离培养。在普通琼脂平皿上37℃培养24小时，生长出边缘整齐、淡灰色、露珠样小菌落，表面闪光。在CDC厌氧鲜血琼脂平皿上37℃厌氧培养24小时，分离出圆形光滑隆起，淡灰色，也有边缘不整齐，表面有辐射状条纹的大菌落，菌落周围有容血环，有时现双重溶血。挑单个菌落纯培养的同进行染色镜检。

生化试验。将形成溶血圈的菌落接种于牛乳培养基中，37℃培养8小时，在牛乳凝固的同时，产生大量的气体，将乳凝块冲成多孔海绵状。

动物试验。肠毒素的检查，取病死牛病变明显的肠内容物，用生理盐水进行1∶1稀释后，43 000转/分钟离心10分钟，取上清液，48 000转/分钟离离心15分钟，然后取上清液，腹腔注射6只小白鼠，同时设对照组3只注射灭菌生理盐水，1毫升/只，72小时内观察结果。注射肠内容物上清液的6只小白鼠于24小时内全部死亡，而对照组的小白鼠全部存活，证明肠道内容物中有毒素存在。

综上所述，初步诊断为黄牛魏氏梭菌和巴氏杆菌混合感染，未做魏氏梭菌毒素定型试验。