APP下载

西南三地区野生香菇ISSR遗传多样性分析

2014-08-08张婉洁何德李翠新李季

湖北农业科学 2014年9期
关键词:遗传多样性聚类分析香菇

张婉洁+何德+李翠新+李季+

摘要:采用ISSR分子标记技术对云南省大姚县、瑞丽市和四川省木里县的41株野生香菇(Lentinula edodes)菌株进行DNA聚类分析,利用NTSYS软件对其遗传多样性进行聚类分析。结果表明,利用18个引物对41个野生香菇菌株的DNA进行ISSR-PCR扩增,共扩增出162条清晰的DNA片段。聚类分析结果表明,相似水平在62%左右时,41株野生香菇菌株分为3个类群,各地香菇资源存在较丰富的遗传多样性且与地域无明显相关性。

关键词:香菇(Lentinula edodes);ISSR;遗传多样性;DNA聚类分析

中图分类号:S646.1+2;Q503文献标识码:A文章编号:0439-8114(2014)09-2093-04

Genetic Diversity of Wild Lentinula edodes from Three Places of

Southwestern China Based on ISSR-PCR

ZHANG Wan-jie, HE De, LI Cui-xin, LI Ji

(College of Life Science, Southwest Forestry University, Kunming 650224, China)

Abstract: The DNA fingerprinting of 41 wild strains of Lentinula edodes from three places Dayao country, Ruili country of Yunnan province and Muli country of Sichuan province were identified with ISSR-POR. The genetic diversity were analyzed by NTSYS-PC software. The results showed that 162 distinct DNA bands were produced from 18 pairs of primers. The results of clustering analysis showed that 41 strains were divided into 3 groups at similarity of 62%, implying that the wild strains of L.edodes had great genetic diversity and there was no obvious correlation with the geographical location.

Key words:Lentinula edodes;ISSR;genetic diversity;DNA clustering analysis

香菇(Lentinula edodes)是一种可食用的大型木腐担子菌[1],具有较高的营养价值和药用价值。含有高蛋白、多糖、低脂肪等诸多的营养[2,3],这使得香菇成为世界上产业发展速度最快的菇类[3]。我国幅员辽阔、气候复杂、地形多变、香菇野生品种繁多,但是由于分化程度低、形态差异小,要以形态特征为依据难以对品种进行有效鉴定;栽培规模的迅速扩大和自然生境的逐渐减少,迫切需要加快香菇种质资源的研究,加紧对野生香菇进行遗传多样性研究。

ISSR分子标记技术(Inter-simple sequence repeat, ISSR)于1994年由Zietkiewicz等[4]提出,利用在真核生物基因组中经常出现的简单重复序列本身来设计引物进行PCR扩增[5]。ISSR分子标记己应用于研究植物种内遗传变异、种间遗传变异[6]、品种鉴定[7,8]、遗传作图[9]和居群遗传学[10]等研究中,在遗传多样性和亲缘关系[11]研究中的应用更为广泛。本研究利用ISSR分子标记技术对西南地区的云南省瑞丽市、大姚县和四川省木里县的野生香菇进行了遗传多样性分析,以期能客观反映香菇属真菌的亲缘关系和地理变迁情况。

1材料与方法

1.1供试菌株

供试41个香菇菌株的编号、采集地点等详见表1。

1.2方法和步骤

1.2.1基因组DNA的提取将低温保存的41个野生香菇菌种接种于PDA斜面培养基上,26 ℃培养 7~10 d。活化后用接种针挑取试管斜面培养基上边缘处生长较旺盛的菌块,接种到液体培养基中,于室温下静置培养1个月后,用滤纸收集香菇菌丝体,用吸水纸吸干,参照 CTAB法[12]并作改良以提取其DNA,于-20 ℃保存备用。

1.2.2 ISSR-PCR扩增扩增反应的体系为15 μL,包含PCR缓冲液1.5 μL、25 mmol/L MgCl2 1.2 μL、2.5 mmol/L dNTPs 1.2 μL、10 μmol/L引物0.3 μL、Ex-Taq DNA聚合酶(大连宝生物工程有限公司)0.075 μL、0.001 μg/mL模板1 μL,最后用去离子水将总体积补至15 μL。

ISSR-PCR反应程序为:94 ℃预变性4 min;94 ℃变性30 s,48~55 ℃范围内退火30 s,72 ℃延伸108 s,33个循环;最后72 ℃延伸10 min,4 ℃保存。

1)引物筛选。以41株野生香菇菌株为DNA模板,通过TM值比较,对P1~P27号引物进行分组和初筛选,TM值相近的为一组,筛选出清晰、重复性好、多态性高的PCR扩增引物。

2)ISSR-PCR 条件优化。由于ISSR 标记易受 PCR 条件的影响,因此需对PCR扩增反应进行优化。

退火温度的优化:使用引物P14和P20对8104菌株模板进行PCR扩增,筛选最佳退火温度。扩增反应在梯度 PCR 仪(Bio-Rad Laboratories, Inc公司)上进行,设最小温度为 47.3 ℃,最大温度为55.3 ℃,自动形成8个温度梯度,分别为55.3、54.9、54.0、52.4、50.5、48.9、47.9、47.3 ℃。

镁离子浓度的优化:使用引物P14对8104菌株模板进行PCR扩增来优化镁离子浓度,Mg2+浓度的优化范围为1.6~2.5 mmol/L(即MgCl2的用量为 0.96~1.5 μL),Mg2+浓度设10个梯度,分别为1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5 mmol/L 。

3)PCR扩增及产物检测。用优化后的反应体系(表2)和筛选出来的18个引物(表3)进行ISSR-PCR扩增。PCR 扩增后,取4 μL的PCR 扩增产物加少量6×Loading buffer,于浓度为1.0%的琼脂糖凝胶(含0.5 μg/mL的EB)上电泳,并于BIO RAD Gel DocTM XR+凝胶成像系统成像。

1.2.3数据分析利用凝胶系统成像软件把条带信息转化为0-1矩阵。即对所有引物的电泳条带进行记录,在相同位置出现条带的记为1,无条带的记为0。然后采用NTSYS软件进行遗传相似性聚类分析,绘制树状聚类图。

2结果与分析

2.1DNA的提取

将所采41个野生香菇菌株用CTAB法进行DNA的提取,结果见图1。如图1所示,得到的野生香菇菌株DNA约23 130 bp,且DNA电泳条带清晰,DNA的纯度、浓度及产率都比较高,无降解,适用于ISSR分子标记分析。

2.2ISSR-PCR扩增结果

用筛选得到的18个引物对所有供试菌株进行ISSR-PCR扩增,扩增产物用1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,所测结果见图2、3。如图2、3所示,可以看到同一引物对不同的香菇菌株扩增后所得到的DNA条带清晰度和多态性均很高,说明所建立的ISSR-PCR反应体系适合野生香菇菌株的PCR扩增,可用于遗传多样性分析。经统计,18个引物对41个野生香菇菌株扩增后,共检测到162条条带,多态性条带为162条,多态率为100%。

2.3聚类分析结果

根据ISSR-PCR分析结果,采用NTSYS软件进行聚类分析,得到41个野生香菇菌株的ISSR聚类分析图(图4),供试的41个野生香菇菌株相似系数为0.60~0.85。其中8041和8043号野生香菇菌株的相似系数达到了0.85以上,说明它们的遗传背景极为相似,而且两者的采集地都来自云南省大姚县,因此可能是相同的菌株,存在同物异名的可能性。在相似系数0.62左右,41个野生香菇菌株可以分为三大类,其中8127、8110、8135号3个野生香菇菌株聚为一类(Ⅲ),都来源于四川省木里县,8110号野生香菇来自于木里县列瓦乡三村,8127和8135号野生香菇都来自木里县集市;聚为第二类(Ⅱ)的菌株有4个:8080、8077、8139、8079号野生香菇菌株,除了8139号野生香菇来自四川省木里县集市,其余3个均来自云南省瑞丽市;其他34个野生香菇菌株聚为第一类(Ⅰ),其中云南省的香菇有9个,四川省的香菇有25个,说明这些菌株的遗传背景相似,亲缘关系比较近。

聚类结果还表明,地理位置来源相同的野生香菇菌株分布在不同的ISSR聚类中,比如第一类中包含了来自木里县、大姚县和瑞丽市的菌株,反映出这3个地方的菌株不同地理群体间差异不大,而第二类中包含了瑞丽市和木里县的菌株,和第一类情况相同,说明ISSR聚类分析与菌株的不同地理来源之间无明显的相关性。

3讨论

遗传多样性一般是指种内的遗传差异水平,反映一个物种适应环境的能力以及其被改造和利用的潜力[13]。本试验中,41个野生香菇菌株的遗传相似系数为0.60~0.85,在不同的聚类分组中,遗传相似系数也存在一定的差异,这些差异可能是野生香菇对环境的适应所造成的,分析表明同一地区不同的野生香菇菌株间遗传差异很大,反映出了丰富的群体内的遗传多样性。这与王子迎等[14]、赵晓清等[15]的研究结论一致。

Xu等[16]的研究结果表明,作为香菇的起源地之一,我国是重要的野生香菇种质资源中心,不同区域的菌株间存在着较大的遗传差异。本研究对四川省木里县和云南省瑞丽市、大姚县3个地区41个野生香菇菌株的ISSR遗传多样性分析表明,3个地区间野生香菇菌株存在混杂现象,不同地理位置的群体并没有表现出地理隔离的差异。

参考文献:

[1] 徐学锋,林范学,程水明,等.中国香菇自然种质的rDNA遗传多样性分析[J]. 菌物学报,2005,24(1):29-35.

[2] 邓旺秋,杨小兵,李泰辉,等.广东省香菇栽培菌株RAPD多态性分析[J].食用菌学报,2004,11(1):7-11.

[3] 张树庭,陈明杰.香菇产业的过去现在和未来[J].食用菌,2003(1):2-4.

[4] ZIETKIEWICZ E,RAFALSHI A,LABUDA D.Genome fingerprinting by simple sequence repeat(SSR) -anchored polymerase chain reaction amplification[J].Genomics,1994,20(2):176-183.

[5] TSUMURA Y,OHBA K,STRAUSS S H. Diversity and inheritance of inter-simple sequence repeat polymorphisms in Douglas-fir(Pseudotauga menziesii) and sugi (Cryptomeuia japoneca) [J].Theoretical Applied Genetics,1996,92(1):40-45.

[6] SUDUPAK M A.Inter and intra-species inter simple sequence repeat (ISSR) variations in the genus Cicer[J]. Euphytica,2004, 135(2):229-238.

[7] NAGOKA T,OGIHARA Y.Applicability of inter-simple sequence repeat markers in wheat for use as DNA markers in comparison to RFLP and RAPD markers[J].Theoretical Applied Genetics,1997,94(5):597-602.

[8] PREVOST A,WILKINSON M J.A new sysmterm of comparing PCR primers applied to ISSR fingerprinting potato cultivars [J]. Theoretical Applied Genetics,1998,98(1):107-112.

[9] SANKAR A A,MOORE G A.Evaluation of inter-simple sequence repeat analysis for mapping in Citrus and extension of the genetic linkage map[J]. Theoretical Applied Genetics,2001,102(2-3):206-214.

[10] JOSHI S P, GUPTA V S, AGGARWAL R K, et al. Genetic diversity and phylogenetic relationship as revealed by inter simple sequence repeat (ISSR) polymorphism in the genus Oryza[J]. Theoretical Applied Genetics,2000,100(8):1311-1320.

[11] 马朝芝,傅廷栋,TUEVESSON S,等.用ISSR标记技术分析中国和瑞典甘蓝型油菜的遗传多样性[J].中国农业科学,2003, 36(11):1403-1408.

[12] 王艺红,林俊芳,张炜阳,等.食用菌DNA提取方法研究[J].食用菌,2008(3):18-20.

[13] 马文辉,何平.RAPD标记在植物系统进化研究中的应用[J].西南师范大学学报(自然科学版),1999,24(4):482-491.

[14] 王子迎,王书通.安徽野生香菇遗传多样性及杂种优势的ISSR分析[J].菌物学报,2006,25(2):211-216.

[15] 赵晓清,王波,王一,等.利用ISSR分析野生蘑菇与双孢蘑菇的遗传多样性[J].四川大学学报(自然科学版),2009,46(4):1130-1134.

[16] XU X F,LIN A Z,CHEN S M,et a1. Reappraisal of phylogenetic status and genetic diversity analysis of Asian populations of Lentinula edodes[J]. Progress in Natural Science,2006,16(3):274-280.

2结果与分析

2.1DNA的提取

将所采41个野生香菇菌株用CTAB法进行DNA的提取,结果见图1。如图1所示,得到的野生香菇菌株DNA约23 130 bp,且DNA电泳条带清晰,DNA的纯度、浓度及产率都比较高,无降解,适用于ISSR分子标记分析。

2.2ISSR-PCR扩增结果

用筛选得到的18个引物对所有供试菌株进行ISSR-PCR扩增,扩增产物用1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,所测结果见图2、3。如图2、3所示,可以看到同一引物对不同的香菇菌株扩增后所得到的DNA条带清晰度和多态性均很高,说明所建立的ISSR-PCR反应体系适合野生香菇菌株的PCR扩增,可用于遗传多样性分析。经统计,18个引物对41个野生香菇菌株扩增后,共检测到162条条带,多态性条带为162条,多态率为100%。

2.3聚类分析结果

根据ISSR-PCR分析结果,采用NTSYS软件进行聚类分析,得到41个野生香菇菌株的ISSR聚类分析图(图4),供试的41个野生香菇菌株相似系数为0.60~0.85。其中8041和8043号野生香菇菌株的相似系数达到了0.85以上,说明它们的遗传背景极为相似,而且两者的采集地都来自云南省大姚县,因此可能是相同的菌株,存在同物异名的可能性。在相似系数0.62左右,41个野生香菇菌株可以分为三大类,其中8127、8110、8135号3个野生香菇菌株聚为一类(Ⅲ),都来源于四川省木里县,8110号野生香菇来自于木里县列瓦乡三村,8127和8135号野生香菇都来自木里县集市;聚为第二类(Ⅱ)的菌株有4个:8080、8077、8139、8079号野生香菇菌株,除了8139号野生香菇来自四川省木里县集市,其余3个均来自云南省瑞丽市;其他34个野生香菇菌株聚为第一类(Ⅰ),其中云南省的香菇有9个,四川省的香菇有25个,说明这些菌株的遗传背景相似,亲缘关系比较近。

聚类结果还表明,地理位置来源相同的野生香菇菌株分布在不同的ISSR聚类中,比如第一类中包含了来自木里县、大姚县和瑞丽市的菌株,反映出这3个地方的菌株不同地理群体间差异不大,而第二类中包含了瑞丽市和木里县的菌株,和第一类情况相同,说明ISSR聚类分析与菌株的不同地理来源之间无明显的相关性。

3讨论

遗传多样性一般是指种内的遗传差异水平,反映一个物种适应环境的能力以及其被改造和利用的潜力[13]。本试验中,41个野生香菇菌株的遗传相似系数为0.60~0.85,在不同的聚类分组中,遗传相似系数也存在一定的差异,这些差异可能是野生香菇对环境的适应所造成的,分析表明同一地区不同的野生香菇菌株间遗传差异很大,反映出了丰富的群体内的遗传多样性。这与王子迎等[14]、赵晓清等[15]的研究结论一致。

Xu等[16]的研究结果表明,作为香菇的起源地之一,我国是重要的野生香菇种质资源中心,不同区域的菌株间存在着较大的遗传差异。本研究对四川省木里县和云南省瑞丽市、大姚县3个地区41个野生香菇菌株的ISSR遗传多样性分析表明,3个地区间野生香菇菌株存在混杂现象,不同地理位置的群体并没有表现出地理隔离的差异。

参考文献:

[1] 徐学锋,林范学,程水明,等.中国香菇自然种质的rDNA遗传多样性分析[J]. 菌物学报,2005,24(1):29-35.

[2] 邓旺秋,杨小兵,李泰辉,等.广东省香菇栽培菌株RAPD多态性分析[J].食用菌学报,2004,11(1):7-11.

[3] 张树庭,陈明杰.香菇产业的过去现在和未来[J].食用菌,2003(1):2-4.

[4] ZIETKIEWICZ E,RAFALSHI A,LABUDA D.Genome fingerprinting by simple sequence repeat(SSR) -anchored polymerase chain reaction amplification[J].Genomics,1994,20(2):176-183.

[5] TSUMURA Y,OHBA K,STRAUSS S H. Diversity and inheritance of inter-simple sequence repeat polymorphisms in Douglas-fir(Pseudotauga menziesii) and sugi (Cryptomeuia japoneca) [J].Theoretical Applied Genetics,1996,92(1):40-45.

[6] SUDUPAK M A.Inter and intra-species inter simple sequence repeat (ISSR) variations in the genus Cicer[J]. Euphytica,2004, 135(2):229-238.

[7] NAGOKA T,OGIHARA Y.Applicability of inter-simple sequence repeat markers in wheat for use as DNA markers in comparison to RFLP and RAPD markers[J].Theoretical Applied Genetics,1997,94(5):597-602.

[8] PREVOST A,WILKINSON M J.A new sysmterm of comparing PCR primers applied to ISSR fingerprinting potato cultivars [J]. Theoretical Applied Genetics,1998,98(1):107-112.

[9] SANKAR A A,MOORE G A.Evaluation of inter-simple sequence repeat analysis for mapping in Citrus and extension of the genetic linkage map[J]. Theoretical Applied Genetics,2001,102(2-3):206-214.

[10] JOSHI S P, GUPTA V S, AGGARWAL R K, et al. Genetic diversity and phylogenetic relationship as revealed by inter simple sequence repeat (ISSR) polymorphism in the genus Oryza[J]. Theoretical Applied Genetics,2000,100(8):1311-1320.

[11] 马朝芝,傅廷栋,TUEVESSON S,等.用ISSR标记技术分析中国和瑞典甘蓝型油菜的遗传多样性[J].中国农业科学,2003, 36(11):1403-1408.

[12] 王艺红,林俊芳,张炜阳,等.食用菌DNA提取方法研究[J].食用菌,2008(3):18-20.

[13] 马文辉,何平.RAPD标记在植物系统进化研究中的应用[J].西南师范大学学报(自然科学版),1999,24(4):482-491.

[14] 王子迎,王书通.安徽野生香菇遗传多样性及杂种优势的ISSR分析[J].菌物学报,2006,25(2):211-216.

[15] 赵晓清,王波,王一,等.利用ISSR分析野生蘑菇与双孢蘑菇的遗传多样性[J].四川大学学报(自然科学版),2009,46(4):1130-1134.

[16] XU X F,LIN A Z,CHEN S M,et a1. Reappraisal of phylogenetic status and genetic diversity analysis of Asian populations of Lentinula edodes[J]. Progress in Natural Science,2006,16(3):274-280.

2结果与分析

2.1DNA的提取

将所采41个野生香菇菌株用CTAB法进行DNA的提取,结果见图1。如图1所示,得到的野生香菇菌株DNA约23 130 bp,且DNA电泳条带清晰,DNA的纯度、浓度及产率都比较高,无降解,适用于ISSR分子标记分析。

2.2ISSR-PCR扩增结果

用筛选得到的18个引物对所有供试菌株进行ISSR-PCR扩增,扩增产物用1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,所测结果见图2、3。如图2、3所示,可以看到同一引物对不同的香菇菌株扩增后所得到的DNA条带清晰度和多态性均很高,说明所建立的ISSR-PCR反应体系适合野生香菇菌株的PCR扩增,可用于遗传多样性分析。经统计,18个引物对41个野生香菇菌株扩增后,共检测到162条条带,多态性条带为162条,多态率为100%。

2.3聚类分析结果

根据ISSR-PCR分析结果,采用NTSYS软件进行聚类分析,得到41个野生香菇菌株的ISSR聚类分析图(图4),供试的41个野生香菇菌株相似系数为0.60~0.85。其中8041和8043号野生香菇菌株的相似系数达到了0.85以上,说明它们的遗传背景极为相似,而且两者的采集地都来自云南省大姚县,因此可能是相同的菌株,存在同物异名的可能性。在相似系数0.62左右,41个野生香菇菌株可以分为三大类,其中8127、8110、8135号3个野生香菇菌株聚为一类(Ⅲ),都来源于四川省木里县,8110号野生香菇来自于木里县列瓦乡三村,8127和8135号野生香菇都来自木里县集市;聚为第二类(Ⅱ)的菌株有4个:8080、8077、8139、8079号野生香菇菌株,除了8139号野生香菇来自四川省木里县集市,其余3个均来自云南省瑞丽市;其他34个野生香菇菌株聚为第一类(Ⅰ),其中云南省的香菇有9个,四川省的香菇有25个,说明这些菌株的遗传背景相似,亲缘关系比较近。

聚类结果还表明,地理位置来源相同的野生香菇菌株分布在不同的ISSR聚类中,比如第一类中包含了来自木里县、大姚县和瑞丽市的菌株,反映出这3个地方的菌株不同地理群体间差异不大,而第二类中包含了瑞丽市和木里县的菌株,和第一类情况相同,说明ISSR聚类分析与菌株的不同地理来源之间无明显的相关性。

3讨论

遗传多样性一般是指种内的遗传差异水平,反映一个物种适应环境的能力以及其被改造和利用的潜力[13]。本试验中,41个野生香菇菌株的遗传相似系数为0.60~0.85,在不同的聚类分组中,遗传相似系数也存在一定的差异,这些差异可能是野生香菇对环境的适应所造成的,分析表明同一地区不同的野生香菇菌株间遗传差异很大,反映出了丰富的群体内的遗传多样性。这与王子迎等[14]、赵晓清等[15]的研究结论一致。

Xu等[16]的研究结果表明,作为香菇的起源地之一,我国是重要的野生香菇种质资源中心,不同区域的菌株间存在着较大的遗传差异。本研究对四川省木里县和云南省瑞丽市、大姚县3个地区41个野生香菇菌株的ISSR遗传多样性分析表明,3个地区间野生香菇菌株存在混杂现象,不同地理位置的群体并没有表现出地理隔离的差异。

参考文献:

[1] 徐学锋,林范学,程水明,等.中国香菇自然种质的rDNA遗传多样性分析[J]. 菌物学报,2005,24(1):29-35.

[2] 邓旺秋,杨小兵,李泰辉,等.广东省香菇栽培菌株RAPD多态性分析[J].食用菌学报,2004,11(1):7-11.

[3] 张树庭,陈明杰.香菇产业的过去现在和未来[J].食用菌,2003(1):2-4.

[4] ZIETKIEWICZ E,RAFALSHI A,LABUDA D.Genome fingerprinting by simple sequence repeat(SSR) -anchored polymerase chain reaction amplification[J].Genomics,1994,20(2):176-183.

[5] TSUMURA Y,OHBA K,STRAUSS S H. Diversity and inheritance of inter-simple sequence repeat polymorphisms in Douglas-fir(Pseudotauga menziesii) and sugi (Cryptomeuia japoneca) [J].Theoretical Applied Genetics,1996,92(1):40-45.

[6] SUDUPAK M A.Inter and intra-species inter simple sequence repeat (ISSR) variations in the genus Cicer[J]. Euphytica,2004, 135(2):229-238.

[7] NAGOKA T,OGIHARA Y.Applicability of inter-simple sequence repeat markers in wheat for use as DNA markers in comparison to RFLP and RAPD markers[J].Theoretical Applied Genetics,1997,94(5):597-602.

[8] PREVOST A,WILKINSON M J.A new sysmterm of comparing PCR primers applied to ISSR fingerprinting potato cultivars [J]. Theoretical Applied Genetics,1998,98(1):107-112.

[9] SANKAR A A,MOORE G A.Evaluation of inter-simple sequence repeat analysis for mapping in Citrus and extension of the genetic linkage map[J]. Theoretical Applied Genetics,2001,102(2-3):206-214.

[10] JOSHI S P, GUPTA V S, AGGARWAL R K, et al. Genetic diversity and phylogenetic relationship as revealed by inter simple sequence repeat (ISSR) polymorphism in the genus Oryza[J]. Theoretical Applied Genetics,2000,100(8):1311-1320.

[11] 马朝芝,傅廷栋,TUEVESSON S,等.用ISSR标记技术分析中国和瑞典甘蓝型油菜的遗传多样性[J].中国农业科学,2003, 36(11):1403-1408.

[12] 王艺红,林俊芳,张炜阳,等.食用菌DNA提取方法研究[J].食用菌,2008(3):18-20.

[13] 马文辉,何平.RAPD标记在植物系统进化研究中的应用[J].西南师范大学学报(自然科学版),1999,24(4):482-491.

[14] 王子迎,王书通.安徽野生香菇遗传多样性及杂种优势的ISSR分析[J].菌物学报,2006,25(2):211-216.

[15] 赵晓清,王波,王一,等.利用ISSR分析野生蘑菇与双孢蘑菇的遗传多样性[J].四川大学学报(自然科学版),2009,46(4):1130-1134.

[16] XU X F,LIN A Z,CHEN S M,et a1. Reappraisal of phylogenetic status and genetic diversity analysis of Asian populations of Lentinula edodes[J]. Progress in Natural Science,2006,16(3):274-280.

猜你喜欢

遗传多样性聚类分析香菇
Modeling and Verification of a Sentiment Analysis System Using Aspect-Oriented Petri Nets
香菇接种三招
茄子种质资源农艺性状遗传多样性分析
西藏野核桃的表型特征及其保育措施
香菇皮炎二例施为