子宫内膜腺癌中热休克蛋白70、90的表达及其临床意义

辛 颖

子宫内膜腺癌中热休克蛋白70、90的表达及其临床意义

辛 颖

目的 分析子宫内膜腺癌组织中的热休克蛋白70、90的表达和其临床意义。方法 使用免疫组化Envision法和图像分析仪，检测正常子宫内膜、增生过长子宫内膜以及子宫内膜腺癌中的热休克蛋白70、90的表达。结果 子宫内膜腺癌中的热休克蛋白70表达灰度值为（209．05±5．35），比正常内膜（145．20±4．08）明显更高，差异显著，具有统计学意义（P＜0．05）。其与增生过长内膜（148．58±4．22）相比也有显著性差异（P＜0．05）；子宫内膜腺癌中热休克蛋白90其表达灰度值为（166．87±5．70），与正常子宫内膜（208．56±3．13）和增生过长子宫内膜（249．72±4．62）差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论 热休克蛋白70、90与子宫内膜腺癌的发生有密切关系，并对子宫内膜腺癌的诊断及判断肿瘤的恶性程度以及治疗有参考价值。

子宫内膜腺癌；热休克蛋白；免疫组织化学

子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，以来源于子宫内膜腺体的腺癌最常见[1]。为女生生殖道三大恶性肿瘤之一，出现概率最高的年龄段是58～61岁，分为雌激素依赖性和非雌激素依赖性两种发病机制[2]。但是关于子宫内膜病变的分子病理学机制的了解还非常少。热休克蛋白体系中热休克蛋白(heat shock protein， HSP) 70、90与肿瘤的发生具有相关性。本次研究中使用免疫组织化学法以及图像分析仪对子宫内膜腺癌组织当中的热休克蛋白70、90表达方式以及临床意义进行了探讨。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取大连大学附属中山医院2013年10月～2014年5月入院进行子宫切除或者内膜刮除的正常子宫内膜、增生过长子宫内膜与子宫内膜腺癌标本的蜡块，正常内膜50例，年龄34～63岁，平均年龄（54.00±5.39）岁；增生过长内膜55例，平均年龄（52.00±6.77）岁，子宫内膜腺癌45例，年龄33～64岁，平均年龄（53.00±6.80）岁。所有研究标本全部经过HE染色，经过病理学检测确诊，子宫内膜腺癌患者在手术前均未经化疗，所有患者手术前半年均未使用过雌激素药物，也无合并任何其他恶性肿瘤。

1.2 方法 所有检测标本当中的热休克蛋白70、90表达，全部使用Envision免疫组化染色法做检测，把石蜡切片经过二甲苯做脱蜡操作、梯度酒精入水和PSB冲洗之后，将其放在微波炉中加入0.01 mol/L的枸橼酸钠缓冲液做抗原修复操作，每次持续时间5 min，一共进行2次。待其自然冷却之后，再另外加入30 mL/L的过氧化氢放置在常温环境中0.5 h，封闭内源性过氧化物酶。之后再使用20 mL/L的正常指标山羊血清将非特异性抗原封闭10 min。

使用滤纸将血清吸去，各加入兔抗人热休克蛋白70、90抗体her山羊抗兔IgG，之后使用DAB做显色，同时还有苏水精复染、脱水、透明以及树胶封片等。

1.3 统计学方法 结果选择LeicaQ 500 Mc当成图像分析仪，对其做半定量操作分析，另外一种灰度值对结果的差异进行判定。本组数据采用SPSS 18.0统计学软件对数据进行处理与分析，正态计量资料结果用“x±s”表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

子宫内膜腺癌中，HSP 70的表达相比正常子宫内膜以及增生过长子宫内膜明显更强，差异具有统计学意义（P＜0.05）；子宫内膜腺癌中HSP 90表达和正常内膜以及增生过长子宫内膜相比明显减弱，差异具有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

表1 不同子宫内膜中热休克蛋白70、90的表达

3 讨论

热休克蛋白是机体细胞在一些理化因素刺激后高效表达的一组蛋白质，又称为应激蛋白(stress protein，CSP)或分子伴侣(Chaperones)。HSP是生物细胞（包括原核细胞及真核细胞）在受热、生物应激、理化因素等应激原刺激后，发生热休克反应时所产生的一类在生物进化中最保守并由热休克基因编码的伴随细胞蛋白。因最先发现于果蝇唾液腺的热应激反应中而得名。现在已经有研究结果显示，热休克蛋白和肿瘤的出现以及肿瘤细胞的增殖和调亡有密切联系[3-4]。热休克蛋白70是进化上高度保守的一种的蛋白质，具有细胞保护及抗细胞凋亡功能，并参与免疫调节。热休克蛋白90参与细胞中众多信号蛋白的构象成熟和功能稳定的调控，而这些信号蛋白的过度表达或突变能促进肿瘤细胞的增殖及存活。

子宫内膜腺癌中热休克蛋白70的表达对于肿瘤细胞的损伤保护性明显，内膜腺癌组织中的热休克蛋白90表达有明确的抗肿瘤活性，并与肿瘤细胞有高亲和力，可选择性地杀伤肿瘤细胞。研究表明，当子宫内膜腺癌中的热休克蛋白HSP 70表达越高时，相应的热休克蛋白90表达就会越弱，其细胞分化程度也更低，临床表现的恶性程度也相应的越高[5]。所以热休克蛋白70、90可以作为对子宫内膜腺癌的诊断及判断肿瘤的恶性程度的一项重要生物学指标。对控制热休克蛋白70、90的表达能够有效的抑制肿瘤细胞增生和促进肿瘤细胞的凋亡，将其和肿瘤化疗药物结合能够有效提升子宫内膜腺癌的临床治疗效果[6]。

本研究中，正常子宫内膜和增生过长子宫内膜中均有热休克蛋白70、90表达，与前期的报道一致[8]，提示热休克蛋白70、90对维持正常子宫内膜的生长和功能具有积极作用。与正常子宫内膜和增生过长子宫内膜相比，热休克蛋白70在子宫内膜腺癌中表达量增加，热休克蛋白90表达量下降，提示热休克蛋白70、90表达对内膜腺癌细胞的生长的作用不同。目前有研究表明，热休克蛋白90在胆囊癌及乳腺癌组织中高表达[7-8]，但本研究中，子宫内膜腺癌组织中热休克蛋白90表现为低表达，其机制仍有待进一步研究。

本次研究结果显示，在子宫内膜腺癌中，热休克蛋白70高表达，而热休克蛋白90低表达。说明热休克蛋白70、90与子宫内膜腺癌的发生有密切联系，对子宫内膜腺癌的诊断、判断肿瘤恶性程度以及治疗有一定参考价值。在今后的研究中，可以针对热休克蛋白70、90表达与子宫内膜腺癌的临床分期、淋巴结转移及预后的相关性进行进一步分析。

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[4] 吴永梅,居来提,靳瑜,等．热休克蛋白27在常见消化道癌及癌前病变中的表达及意义[J]．新疆医学,2012,42(12)：18-22．

[5] 郝凡凡．MTA-1及p 73在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[D]．吉林大学,2013,11：92-93．

[6] 王俊巧．SULT 1A 1、SULT 1E 1在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[D]．新疆医科大学,2013,8：15-17．

[7] 耿凤勇,孙谊,钱红纲,等．热休克蛋白(HSP 70)在胆囊癌中的表达及其意义[J]．中国肿瘤外科杂志，2009,1(3)：143-144．

[8] 罗浩铭,孙薇,尹建元,等．热休克蛋白90抑制剂的研究进展[J]．药学学报,2010,45(7)：813-820．

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.35.046

辽宁 116001 大连大学附属中山医院（辛颖）