高效液相色谱法测定脉络通颗粒中葛根的含量

解朝霞沈丽娟

高效液相色谱法测定脉络通颗粒中葛根的含量

解朝霞1沈丽娟2

目的 建立脉络通颗粒中葛根的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）测定脉络通颗粒葛根素的含量。结果 葛根素在0.04～0.82 µg范围内呈良好的线性关系，方法学考察均符合要求。结论 所用方法操作简便、准确、重复性好，可作为脉络通颗粒的含量测定方法。

高效液相色谱法；脉络通颗粒；葛根素；含量

脉络通颗粒由丹参、葛根、川芎等多味中药组成，主要用于瘀血阻滞所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；脑血栓及冠心病、心绞痛等症，具有活血通脉的功效[1-3]。本文参照中国药典标准，采用高效液相色谱法（HPLC）测定脉络通颗粒葛根素的含量，现报道如下。

1 仪器与试剂

Agilent 1100高效液相色谱仪，瑞士Satorious BP211电子分析天平；葛根素对照品（批号：110752-200511）购于中国药品生物制品检定所，规格：供含量测定用。脉络通颗粒（批准文号：国药准字Z32020371，批号：1400634551）购于扬子江药业集团有限公司，规格：6 g/袋。乙腈为色谱级，水为二馏水。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品，加入30%乙醇溶液溶解并稀释，制成每毫升含葛根素40.8 µg的溶液。

2.2 供试品溶液制备 称取装量差异项下的供试品，研细，精密称取约1 g，精密加入30%乙醇溶液50 ml，称定重量，冷浸2 h后，超声30 min，放至室温，再称定重量，加30%乙醇溶液补足重量，摇匀，过滤，即得。

2.3 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Alltima HP C185 µm（250.0×4.6）mm；流动相：乙腈-水（10:90）；流速：0.8 ml/min；进样量：10 µl；柱温：40 ℃；检测波长：250 nm。

2.4 阴性干扰试验[4-5]处方除去葛根按供试品溶液的制备方法所制备样品为阴性对照品溶液，精密吸取葛根素对照品、供试品、阴性对照品、空白等溶液，分别注入Agilent 1100高效液相色谱仪，测得溶液液相色谱图，供试品色谱图中，在与对照品色谱图相同的保留时间上有相应的色谱峰，而阴性对照色谱图在与对照品色谱图相同的保留时间附近无干扰峰。

2.5 方法学考察

2.5.1 线性关系考察 精密吸取对照品溶液（葛根素：0.0408 mg/ml）1、5、10、15、20 µl，按上述色谱条件分别注入高效液相色谱仪，测定峰面积，见表1。

表1 葛根素对照品标准曲线数据

以峰面积为纵坐标，进样量（µg）为横坐标，绘制关系曲线见图1，回归方程为：y＝5357.9x+ 9.2163，R2＝1，结果表明，葛根素在0.0408～0.8160 µg范围内呈较好的线性关系。

图1 线性关系曲线图

2.5.2 精密度试验 取脉络通颗粒，按含量测定方法制得供试品溶液，连续进样6次（表2），RSD为0.35%，表明精密度良好。

表2 精密度试验结果

2.5.3 稳定性试验 取脉络通颗粒，按含量测定方法制得供试品溶液，每隔4小时进样1次（表3），在进样16 h内，供试品峰面积RSD为1.26%，结果表明，该方法稳定性好。

表3 稳定性试验结果

2.5.4 重复性试验 取样品，依正文方法独立提取测定6次，结果证明，该方法重复性较好，见表4。

表4 重复性试验结果

2.5.5 回收率试验 取葛根素对照品溶液（10.2 mg/25 ml甲醇溶液），精密吸取1.2 ml，置三角瓶中，水浴加热蒸干，再取已知含量的制剂0.5 g，精密称定，加入该三角瓶中，按含量测定方法操作，依法测定，见表5。

表5 回收率试验结果

如表5所示，本法平均回收率为104.6%，RSD= 0.7%。

2.6 按照含量测定方法测定不同批号样品十批，其含量测定结果见表6。

表6 十批不同批号样品含量测定结果(mg/g)

3 讨论

脉络通颗粒具有活血通脉、通络止痛的功效。本文测定的葛根素为方中主药葛根的主要成分，高效液相色谱法测定该成分操作简便，结果准确，适合作为该药物的质量标准控制其生产质量。

[1] 中华人民共和国药典委员会.中国药典[M].北京:中国医药科技出版社,2010:312-313.

[2] 陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[M].北京:人民卫生出版社,1997:720-723.

[3] 赵陆华.中药高效液相色谱法应用[M].北京:中国医药科技出版,2004:1026-1028.

[4] 田菁,黄阁,赵怀清,等.反相高效液相色谱法测定3种中成药中的葛根素[J].色谱,2001,19(5):457-460.

[5] 苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫生出版社,2000:994-997.

R927.2

A

1673-5846(2014)08-0022-03

1吉林省长春市食品药品检验所，吉林长春 130012

2吉林省食品药品检验所，吉林长春 130012