Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者细胞因子的影响

陈 华 吕妍琨 杜荣品

(河北省人民医院心脏三科，石家庄，050051)

学科研究——络病学

Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者细胞因子的影响

陈 华 吕妍琨 杜荣品

(河北省人民医院心脏三科，石家庄，050051)

目的：观察Rho激酶抑制剂、芪苈强心胶囊分别及联合短期应用对慢性心力衰竭患者细胞因子(肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6)水平的作用，并探讨其机制。方法：120例慢性心力衰竭患者(NYHA分级Ⅱ～Ⅲ级)在接受常规心力衰竭治疗的基础上，随机分成4组，分别是空白对照组(30例)(A组)，单用Rho激酶抑制剂治疗组(30例)(B组)，单用芪苈强心胶囊治疗组(30例)(C组)和Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊联合治疗组(30例)(D组)共治疗4周。治疗前后测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、BNP，评估心功能。结果：治疗后3个治疗组B、C、D组分别与对照组A组相比TNF-α、IL-6、BNP水平均明显降低(P<0.05)，治疗组间(B、C、D组间)比较B组与C组间无统计学意义(P>0.1)，D组较B组、C组均有统计学意义(P<0.05)。结论：Rho激酶抑制剂联合芪苈强心胶囊能显著降低慢性心力衰竭患者血清细胞因子TNF-α、IL-6水平，改善心功能，有利于慢性心力衰竭的治疗。

Rho激酶抑制剂；芪苈强心胶囊；细胞因子；肿瘤坏死因子-α；白介素-6；慢性心力衰竭

慢性心力衰竭(Chronic Heart Failure，CHF)是心血管疾病的最后战场，其发生发展是一复杂而长期的过程，受包括炎性细胞因子在内的多种因素的影响，细胞因子参与多种免疫反应，其在体内的高度表达与心功能恶化相关[1]。故有效降低心力衰竭患者血清细胞因子水平，为临床治疗心力衰竭提供了新思路[2]。已有研究表明，心力衰竭时心肌组织中Rho激酶mRNA水平呈明显高表达，故Rho激酶抑制剂能有效抑制心力衰竭进展。芪苈强心胶囊作为中成药制剂对心力衰竭有明确治疗作用。本研究旨在观察Rho激酶抑制剂法舒地尔及芪苈强心胶囊对CHF患者细胞因子水平及心功能的影响，并探讨其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 一般资料 选择2008年9月至2010年1月期间河北省人民医院心脏中心收治的心力衰竭患者(均符合CHF诊断指南2007中CHF诊断标准[3]，按NYHA心功能分级标准[4]为心功能Ⅱ～Ⅲ级)120例，其中冠心病65例，扩张型心肌病17例，高血压病28例，风湿性心脏病10例。男性62例，年龄57～74岁，平均(64.5±5.6)岁，女性58例，年龄59～73岁，平均(66.2±5.5)岁。病程10个月至12年，平均(4.6±2.8)年。排除标准：6个月内的急性心肌梗死、感染、恶性肿瘤、脑卒中、未控制的高血压、糖尿病、肝肾功能不全、痛风、外科手术或严重创伤、免疫系统疾病、甲状腺功能异常、应用过非甾体类抗炎药及血液系统疾病等。

1.2 仪器设备、药品及试剂 盐酸法舒地尔(天津红日药业)，芪苈强心胶囊(以岭药业)，肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)试剂盒(上海拜力生物科技有限公司)和白介素-6(Inter Leukin-6；IL-6)试剂盒(上海越研生物科技有限公司)，脑尿钠肽(Brain Natriuretic Peptide，BNP)试纸条(德国罗氏公司)，Cardiac Reader心肌标志物定量检测分析仪(德国罗氏公司)。

1.3 方法

1.3.1 分组 所有入选患者均于入院次日检测TNF-α、IL-6、BNP水平，并随机分为4组，分别是空白对照组(30例)(A组)，单用Rho激酶抑制剂治疗组(30例)(B组)，单用芪苈强心胶囊治疗组(30例)(C组)和Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊联合治疗组(30例)(D组)。4组研究对象年龄、性别、吸烟史、高血压、糖尿病、血脂水平、基础用药情况及治疗前TNF-α、IL-6、BNP水平的差异无统计学意义。4组均应用剂量相似的ACEI或ARB类、利尿剂、地高辛和β受体阻滞剂等治疗，B组加用Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔60 mg静点2次/d，C组加用芪苈强心胶囊4粒口服，3次/d，D组加用Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔60 mg静点2次/d，同时芪苈强心胶囊4粒口服3次/d。所有患者均连续应用4周，均常规检测血常规、凝血功能、肝肾功能等。

1.3.2 TNF-α、IL-6测定 采用ELISA法测定TNF-α和IL-6。所有受检者空腹12 h以上，清晨7：00-8：00采血，采血时平卧位，休息15 min以上，采集肘正中静脉血4～6 mL，室温下自然凝固，1 500 r/min离心10 min后，分离血清，置于-80 ℃超低温冰箱保存待标本收集完全后同批测定。肝肾功能采用普通干管，采静脉血4 mL，分离血清后当日在生化室检测。

1.3.3 BNP测定 BNP标本采集：4组受试者均在治疗前及治疗结束后于清晨空腹采肘静脉血2 mL置于肝素锂抗凝管中混匀，不需离心，立即送检。

2 结果

表1 四组患者一般资料

组别例数TNF-αIL-6BNPA组30治疗前200±23.1270.12±34.42780.89±136.2治疗后150.45±3.89*45±15.02*640.75±187.34*B组30治疗前210.09±12.1△76.30±12.35△791±176.94△治疗后121.81±15.46*30.54±23.52*580.36±200.51*C组30治疗前198.3±30.09△75.31±24△800.09±200△治疗后124.40±2.6*▲35.02±12.71*▲500.45±98.61*▲D组30治疗前220±3.47△73.4±33.02△799±179.24△治疗后80.98±12.12*□20.12±13.73*□440.45±96.02*□

注：治疗后与治疗前各组自身比较，*P<0.05；治疗前与A组比较，△P>0.05；与B组比较，▲P>0.05；与B组比较，□P<0.05，与C组比较，□P<0.05。

3 讨论

CHF因其高发病率、高死亡率目前仍是心血管领域尚未攻破的堡垒之一。在目前常规治疗之外寻找新的更加有效的临床药物已成为当务之急。Rho/Rho激酶是具有信息传导和分子开关功能的信号多肽[5]。研究表明，原发性心肌损伤与负荷过重，通过神经内分泌系统的激活以及多种炎症细胞因子的参与，使得心肌组织中多条信号调节途径激活，进而表现为心脏代偿性肥厚、心肌细胞重构，这一导致心力衰竭的关键环节的病理生理机制则包括心肌细胞内钙离子浓度的增高、包括TNF-α、IL-6在内的多种炎症因子的生成，这些都有Rho/Rho激酶通路的参与[6]。TNF-α、IL-6是由激活的单核巨噬细胞分泌的可以诱导凋亡的炎症细胞因子，具有多种负面生物学效应，二者通过负性肌力作用、诱导心室重构、诱发心肌细胞凋亡，加快心力衰竭进程[7]。故Rho激酶抑制剂通过抑制炎细胞的浸润，减少炎症介质的产生，可拮抗炎症反应，从而改善CHF患者心功能[8]。BNP[9]作为评价心功能的实验室指标目前已在临床广泛应用。

中医理论认为心力衰竭为气血两虚、血瘀气滞、阳虚水泛所致，认为心气虚乏、运血无力是心力衰竭发病的中医病机根本[10]，亦有动物实验支持该理论[11-12]。芪苈强心胶囊正是一基于此病机的有效治疗CHF的中成药制剂，其按照君臣佐使配伍，由黄芪、人参、附子、丹参、葶苈子、泽泻、玉竹、桂枝、红花、香加皮、陈皮等组成[13]。其中40余种单体化合物可能通过协同或互补作用治疗心力衰竭[14-15]。方中黄芪、附子为君，益气温阳而促进心功能，具有强心作用[16]。人参、丹参、葶苈子为臣，三药合用，共达补气、活血、利水、通络之功效。人参可改善心室重构[17]；丹参可增加心肌ATP含量[18]；葶苈子强心利尿[19]；佐药红花、香加皮、泽泻、陈皮、玉竹活血通络、利水消肿；桂枝引药入洛。诸药合用以奏效机[20]。充分发挥其复方多环节、多途径、多靶点的治疗优势。本实验研究结果表明单用Rho激酶抑制剂或单用芪苈强心胶囊较治疗前明显降低TNF-α、IL-6、BNP水平，与对照组比较亦效果显著，但二者比较治疗效果相当，无明显统计学意义，二者联合则更进一步明显改善炎症因子及心功能指标。故本实验结果表明在常规心力衰竭治疗的基础上，Rho激酶抑制剂联合芪苈强心胶囊可以进一步拮抗CHF患者的炎症反应，进而改善患者心功能，值得临床推广应用，但二者联合的相互作用机制有待进一步研究。

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(2014-05-03收稿 责任编辑：徐颖)

Effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum cytokines in patients with chronic heart failure

Chen Hua，Lyu Yankun，Du Rongpin

(Three Department of Cardiology，Hebei General Hospital，Shijiazhuang 050051，China)

Objective：To observe the short term effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum tumor necrosis factor-alpha(TNF-α)and interleukin-6(IL-6)levels in patients with chronic heart failure，and explore the mechanism.Methods：120 chronic heart failure patients

conventional treatment for 4 weeks were divided into blank control group (30 cases)(Group A)，Rho-kinase inhibitor-treated group (30 cases)(Group B)，Qiliqiangxin capsules-treated group(30 cases)(Group C)，and the other 30 cases in the treatment with Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules(GroupD).TNF-α，IL-6 and cardiac function evaluated by BNP were measured before and after treatment.The difference between the 4 groups was analyzed.Results：The baseline of TNF-α，IL-6 and cardiac function was not significantly different in 4 groups (P>0.05).TNF-α and IL-6 levels in Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules(GroupD)were significantly lower than other groups after 4 weeks’ treatment (P<0.05).Conclusion：Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules can improve cardiac function，reduces levels of serum cytokines associated with chronic heart failure.

Rho-kinase inhibitor；Qiliqiangxin capsules；Cytokines；Tumor necrosis factor-alpha；Interleukin 6;Chronic heart failure

R287；R541.6+1

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2014.06.037