白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用初探

高凯 黄春林

·短篇论著·

白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用初探

高凯 黄春林

目的 探讨白芷提取物对地塞米松致大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用的影响。方法 建立地塞米松致大鼠免疫抑制模型 , 考察白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞的增殖活性、自然杀伤细胞 (NK 细胞 )活性的影响。结果 白芷提取物 (5.0 g/kg)对刀豆蛋白 A(ConA) 诱导脾淋巴 T 细胞增殖能力有升高作用 ,但对脂多糖 (LPS)诱导脾淋巴 B 细胞增殖能力未见明显影响 , 对脾淋巴细胞的 NK 细胞活性也有增强作用。结论 白芷提取物 (5.0 g/kg)能提高大鼠脾淋巴 T 细胞和 NK 细胞的增殖活性。

白芷提取物；脾淋巴细胞；自然杀生细胞

在原发性肾病综合征的治疗方案中 , 长期、大量应用糖皮质激素将不可避免地出现多种多样的副作用。白芷提取物中含有甾体类皂苷 , 在化学结构上与糖皮质激素相似。本文旨在研究中药白芷提取物能否减轻或改善糖皮质激素所带来的免疫抑制作用。

1 材料与仪器

白芷提取物：自制。知柏地黄丸：河南省宛西制药股份有限公司 , 批号 ：070304。地塞米松磷酸钠注射液 (DM)：批号 ：070116, 规格 ：5 mg/ml, 天津药业集团新郑股份有限公司。大鼠购自广东省医学实验动物中心；高速冷冻离心机：型号 ：3-18K, 美国 Sigma 公司 ；酶标仪 ：型号 ：Emax, 美国Molecular Devices。

2 方法

2. 1 动物分组及给药 选用 SD 大鼠 48 只 , 分成 6 组 , 每组 8 只 ：即空白对照组 (NC)、地塞米松模型对照组 (IC)(0.75 mg/kg)、知柏地黄丸组 (YC)(2.43 g/kg)、白芷提取物高、中、低剂量组 (HD、MD、LD)(5.0、2.5、1.25 g/kg)。除空白对照组外均皮下注射地塞米松注射液进行造模 , 给药容积 2 ml/kg, NC 组注射等容积的 0.9% 氯化钠注射液。造模后各试验组立即灌胃给予预先设定的药物 , 1 次 /d, 连续 15 d, 给药容积 10 ml/kg, NC 组、模型组灌胃给予等容积的蒸馏水。

2. 2 脾淋巴细胞增殖活性测定及 NK 细胞活性测定 无菌取脾 , 将脾磨碎 , 制成单细胞悬液。过滤 , 离心 10 min(2000 r/min)。弃上清 , 将细胞浆弹起 , 裂解红细胞后再加入 8 ml Hanks 液 , 2000 r/min 离心 10 min, 弃上清。用胎牛血清培养基制成单细胞悬液 , 浓度为 1×107cell/ml。以此单淋巴细胞悬液按照参考文献［1, 2］方法分别测定脾淋巴细胞增殖活性和NK细胞活性。

2. 3 统计学方法 用 SPSS18.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数 ± 标准差 ( x-±s)形式表示 , 实施 t检验 ；计数资料以率 (%)形式表示 , 实施 χ2检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结果

白芷提取物 (5.0 g/kg)对 ConA 诱导脾淋巴 T 细胞增殖能力有升高作用 , 但对 LPS 诱导脾淋巴 B 细胞增殖能力未见明显影响 , 对脾淋巴细胞的 NK 细胞活性也有增强作用。见表1。

表1 白芷提取物对 SD 大鼠脾淋巴细胞活性测定及 NK 细胞活性的影响

表1 白芷提取物对 SD 大鼠脾淋巴细胞活性测定及 NK 细胞活性的影响

注 ：与 NC 组比较aP＜0.05,bP＜0.01 ；与 IC 组比较cP＜0.05,dP＜0.01

组别 剂量 例数 C o n A O D 值 ( 4 9 0 n m ) L P S O D 值 ( 4 9 0 n m ) N K 细胞活性 ( % ) ( M T T 法 ) N C 8 0 . 3 4 9 ± 0 . 0 3 8 0 . 3 7 6 ± 0 . 0 6 7 5 1 . 2 9 ± 6 . 8 6 I C 0 . 7 5 m g / k g 8 0 . 2 7 0 ± 0 . 0 6 2b 0 . 3 1 4 ± 0 . 0 5 6a 2 6 . 0 0 ± 8 . 2 1bY C 2 . 4 3 g / k g 8 0 . 3 5 1 ± 0 . 0 6 2d 0 . 3 8 6 ± 0 . 0 6 5c 3 2 . 1 1 ± 8 . 8 6 H D 5 . 0 g / k g 8 0 . 3 4 9 ± 0 . 0 5 4d 0 . 3 1 1 ± 0 . 0 3 7 3 4 . 8 1 ± 7 . 7 3cM D 2 . 5 g / k g 8 0 . 3 4 0 ± 0 . 0 7 0c 0 . 3 0 9 ± 0 . 0 5 7 3 0 . 6 4 ± 6 . 2 1 L D 1 . 2 5 g / k g 8 0 . 3 3 6 ± 0 . 0 5 3c 0 . 3 1 8 ± 0 . 0 2 7 3 0 . 2 6 ± 1 1 . 2 1

4 小结

白芷提取物 (5.0 g/kg)能提高对地塞米松致大鼠脾 T 淋巴细胞和NK细胞的增殖活性。

［1］杨铁虹 , 贾敏 , 梅其炳 .当归多糖组分促进淋巴细胞增殖及对IL-2 和 IFN-γ 的诱生作用 .中药材 , 2005, 28(5):405-407.

［2］Yuan HM, Song JM, Li XG, et al. Immunomodulation and antitumor activity of k-carrageenan oligosaccharides. Cancer Letters. 2006, 243(2):228-234.

Effect of radix angelicae extract on rats spleen lymphocyte immune inhibition

GAO Kai. Hainan Sida Pharmaceutical Co., Ltd., Haikou 571400, China

Objective To explore effect of radix angelicae extract on rats spleen lymphocyte immune inhibition. Methods Through the establishment of dexamethasone-induced immune suppression model to study the long-term radix angelicae extract of dexamethasone on rat spleen lymphocytes after proliferation, natural killer(NK) cell activity. Results Radix angelicae extract (5.0 g/kg) increased proliferation ability of ConA-induced splenic lymphoid T-cell and NK cell activity of spleen lymphocytes, but has no obvious influence for LPS induced spleen B lymphocyte cell proliferation ability. Conclusion Radix angelicae extract (5.0 g/kg) can improve the rat spleen lymphoid T cells and NK cell proliferation activity.

Angelicae extract; Lymphocytes; Natural killer cells

2014-05-12］

571400 海南斯达制药有限公司