血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多发性骨髓瘤诊断中的价值

苏显都，林 榕，徐晓兰，孙京花，于 莉，范长玲海南省农垦那大医院 检验科，海南儋州 57700；南方医科大学南方医院 血液科，广东广州 5055；解放军总医院 检验科，北京 0085

血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多发性骨髓瘤诊断中的价值

苏显都1，林 榕2，徐晓兰2，孙京花3，于 莉1，范长玲1
1海南省农垦那大医院 检验科，海南儋州 571700；2南方医科大学南方医院 血液科，广东广州 510515；3解放军总医院 检验科，北京 100853

目的探讨血清胱抑素C(cystatin C，Cys-C)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)及肌酐(creatinine，Cr)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)中的诊断意义。方法使用日立7600全自动生化分析仪检测2010年2月- 2014年1月海南农垦那大医院及南方医院住院的43例初诊MM患者和30例健康体检者血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿酸(uric acid，UA)及尿素的水平。应用受试工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)评价Cys-C、β2-MG和Cr在MM诊断中的价值。结果MM患者Cys-C水平(2.06±0.82) mg/L明显高于健康对照组(0.71±0.18) mg/L (P＜0.01)；并且与β2-MG呈明显正相关(r=0.523，P＜0.05)。Durie-Salmon分期中，Ⅲ期CysC水平(3.14±1.38) mg/L明显高于Ⅱ期(1.35± 0.16) mg/L和Ⅰ期(0.97±0.18) mg/L (P＜0.01)；Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期血清Cr和β2-MG水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)。不同免疫分型中，轻链型血清Cys-C水平(2.75±1.01) mg/L明显高于不分泌型(1.49±0.53) mg/L (P＜0.05)；IgA型血清β2-MG水平(7.48±4.52) mg/L明显高于不分泌型(5.37±2.64) mg/L (P＜0.05)。ROC分析显示，CysC的曲线下的面积(area under curve，AUC)及其95%置信区间(0.912，95%CI：0.891～0.960)高于β2-MG(0.853，95%CI：0.821 ～ 0.894)和Cr(0.741，95%CI：0.702 ～ 0.795)，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论Cys-C可以作为诊断MM患者肾功能早期损害的指标之一，且优于β2-MG和Cr，对临床分期、肿瘤负荷及判断预后有一定的帮助。

血清胱抑素C；β2-微球蛋白；多发性骨髓瘤

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种恶性浆细胞疾病，表现为浆细胞异常增生，并产生大量单克隆免疫球蛋白，在骨髓内恶性增殖，引起骨折和骨髓功能衰竭。研究表明，血清胱抑素C(cystatin C，Cys-C)能反映恶性肿瘤的进展及肿瘤的负荷量，β2-微球蛋白(β2- microglobulin，β2-MG)和Cr在早期肾功能损害中的诊断具有重要意义[1-3]。本研究通过检测43例初诊MM患者血清Cys-C、尿素、肌酐(creatinine，Cr)、尿酸(uric acid，UA)及β2-MG的水平，以期进一步评价血清Cys-C、β2-MG及Cr对MM诊断价值，为临床提供帮助。

对象和方法

1 对象 2010年2月- 2014年1月在海南农垦那大医院及南方医科大学南方医院住院的43例初诊MM患者作为MM组，诊断标准参照张之南主编《血液病诊断及疗效标准》第3版[4]。其中男性27例、女性16例，年龄45 ～ 82(61.7±11.3)岁。依据血清免疫固定电泳检查结果：IgG型24例，IgA型9例，轻链型7例(κ链型2例，λ链型5例)，不分泌型3例。按照Durie-Salmon分期诊断标准：Ⅰ期8例，Ⅱ期13例，Ⅲ期22例。同时选取30例无严重肝肾疾病、肿瘤及心血管疾病的健康体检者作为对照组，其中男性17例、女性13例，年龄30 ～ 75(48.2±9.6)岁。两组年龄、性别等一般资料的差异无统计学意义(P＞0.05)。

2 主要试剂与仪器 使用日立7600型全自动生化仪检测血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG，试剂均采用公司配套产品。Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG正常参考值分别为：0.20 ～ 1.00 mg/L、2.86 ～8.20 mmol/L、54 ～ 106μmol/L、120 ～ 450 μmol/L、0.8 ～ 2.80 mg/L。血清免疫固定电泳检测采用Sebia Hydrasys全自动电泳分析仪及原装配套试剂盒。

3 血样采集及检验 所有标本均为清晨空腹静脉采血，取静脉血5 ml，注入无抗凝的试管中混匀，以离心半径13.5 cm，3 500 r/min离心5 min，分离血清后进行血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿素、UA及血清免疫固定电泳检测。采用免疫比浊法检测血清Cys-C和β2-MG，Cr和UA用氧化酶法检测，尿素用尿酶法检测，整个过程严格按操作规程进行。

4 统计学分析 采用SPSS17.0统计软件分析。数据以±s表示，组间比较采用t检验，非正态分布数据比较采用非参数法Mann-Whitney检验。相关性分析采用Spearman等级相关分析法。绘制血清Cys-C、β2-MG和Cr诊断MM的受试工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)，计算ROC曲线下的面积(area under cure，AUC)。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 两组血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较 MM组与对照组血清Cys-C水平较高(P＜0.01)；Cr、β2-MG和UA水平高于对照组(P均＜0.05)；而尿素水平两组差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

2 不同分期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较 MM患者Ⅲ期血清Cys-C、Cr及β2-MG水平明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(P＜0.01或P＜0.05)，Ⅲ期血清尿素和UA水平明显高于Ⅰ期(P＜0.05)，而Ⅱ期与Ⅰ期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平差异均无统计学意义(P均＞0.05)。见表2。3 不同免疫分型间血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较 MM患者轻链型血清Cys-C水平明显高于不分泌型(P＜0.05)；IgA型血清β2-MG水平明显高于不分泌型(P＜0.05)；而其他组间比较均无统计学差异(P＞0.05)。见表3。

表1 两组血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较Tab. 1 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr UA andβ2-MG between two groups

表2 MM患者各期间血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较Tab. 2 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr UA and β2-MG during various phases in MM patients

表3 MM患者不同免疫分型间血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较Tab. 3 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr, UA and β2-MG in MM patients with different immune classification

4 ROC曲线分析血清Cys-C、β2-MG和Cr在MM中的诊断价值 采用非参数法估计，血清Cys-C、β2-MG和Cr的AUC及其95%置信区间(95% confidence interval，95%CI)分别为0.912(95%CI：0.891 ～ 0.960)、0.853(95%CI：0.821 ～ 0.894)、0.741(95%CI：0.702 ～ 0.795)，与AUC=0.5比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；且Cys-C的AUC明显高于β2-MG和Cr(P＜0.05)。见图1。

5 多发性骨髓瘤患者血清Cys-C与β2-MG的相关性 将MM患者血清Cys-C与β2-MG进行Spearman相关性分析，结果显示Cys-C水平与β2-MG呈明显正相关(r=0.523，P＜0.05)。

图 1 Cys-C、β2-MG和Cr的ROC曲线Fig. 1 ROC curve of Cys-C, β2-MG and Cr

讨 论

多发性骨髓瘤对肾的损害是多因素共同作用的结果，其中轻链蛋白、高钙及高尿酸血症是肾小球和肾小管损害的主要表现。有研究表明，50% MM患者经过合理治疗后，受损的肾功能得到一定的恢复[5]。因此，MM患者肾功能损害的早期诊断对提高治疗效果、判断预后及延长生存期有重要意义。

Cys-C是半胱氨酸蛋白酶抑制家族成员之一，在所有有核细胞中表达，能抑制细胞内外的半胱氨酸蛋白酶，对肿瘤的生长及血管生成、浸润和转移有重要作用。有研究表明，血清Cys-C是反映早期肾损害的敏感指标，肾小球轻微损伤时，Cys-C水平可升高，并随病情加重逐渐升高。国外有文献报道，血清Cys-C在早期发现肾功能变化和疗效观察中有重要的意义[6-7]。而年龄和性别对血清Cr水平影响较大，仅在肌酐清除率降低50%以上时才升高，肾功能诊断的敏感性差[8]；血清尿素主要是检测肾功能外源性指标之一，但肾外因素对其影响较大[8-9]。

本研究结果显示，MM组血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平明显高于对照组(P＜0.05)，提示MM患者存在早期肾功能损害。血清中β2-MG可以从肾小球毛细血管壁自由滤过，几乎被近端肾小管重吸收并分解。MM患者血β2-MG水平升高，可能是由于瘤细胞增生，细胞周转加速及肾功能损害所致。β2-MG能够反映肾功能损害程度，对诊断肾功能损害及评价肾功能方面有较高的敏感性和特异性[10]。血清Cys-C水平与β2-MG呈明显正相关(r=0.523，P＜0.05)。所以，Cys-C可作为MM早期肾功能损害诊断指标之一。虽然结果中MM组Cr和UA水平也明显高于对照组，但由于其影响因素较多，应结合其他指标来综合评价肾功能。采用ROC曲线分析血清Cys-C、β2-MG和Cr在MM患者中的诊断价值，发现Cys-C曲线下的面积最大，且Cys-C从肾小球滤过后由肾小管重吸收并代谢，可以反映肾小球和肾小管的功能。所以，血清Cys-C对多发性骨髓瘤肾损害的诊断价值优于β2-MG和Cr。

有研究表明，Cys-C基因表达在MM患者中明显上调(上调近50倍)，其水平在一定程度上可以反映MM患者的肿瘤负荷[11]。Terpos等[12]研究也证实，Cys-C是反映患者的肿瘤负荷和判断MM患者中位生存期的独立预测指标。血清β2-MG作为MM Durie-Salmon分期的指标之一，可以反映MM患者肿瘤负荷，是MM的独立的预后指标[13]。MM患者肿瘤分期与患者生存率密切相关，且有助于准确的预后判断[14]。本研究结果显示，MM患者Ⅲ期血清Cys-C、β2-MG和Cr水平明显高于Ⅰ期、Ⅱ期，提示Ⅲ期MM患者发生肾功能损害的可能性更大。血清Cys-C与β2-MG呈明显正相关，Cys-C结合β2-MG对MM分期和MM患者预后判断有重要的作用。另外，MM患者Ⅲ期血清尿素和UA水平明显高于Ⅰ期，而Ⅱ期与Ⅰ期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)，提示MM患者临床分期越差，尿素和UA水平越高。而是否参与MM的发生和发展有待于进一步证实。我们对各免疫分型间血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比较，发现MM患者轻链型血清Cys-C水平明显高于不分泌型，IgA型血清β2-MG水平明显高于不分泌型，说明MM患者中不同免疫分型间，血清Cys-C和β2-MG水平可能存在一些差异。

我们认为，血清Cys-C水平在MM患者早期肾功能损害中明显升高，Cys-C水平与MM的Durie-Salmon分期有关，分期越高，Cys-C水平越高，且Cys-C较β2-MG和Cr在MM诊断中具有更高的价值。因此，血清Cys-C可作为评价MM患者早期肾损害、临床分期和判断预后的良好指标。

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Value of serum cystatin C, β2- microglobulin and creatinine in the diagnosis of multiple myeloma

SU Xian-du1, LIN Rong2, XU Xiao-lan2, SUN Jing-hua3,YU Li1, FAN Chang-ling1
1Department of Clinical Laboratory, Hainan Nongken Nada Hospital, Nada 571700, Hainan Province, China;2Department of Hematology, Nanfang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China;3Department of Clinical Laboratory, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China

FAN Chang-ling. Email: fzhl1209@163.com

ObjectiveTo investigate the diagnosis significance of serum cystatin C (Cys-C), β2-microglobulin (β2-MG) and creatinine (Cr) in multiple myeloma (MM).MethodsThe serum levels of Cys-C, β2-MG, Cr, uric acid (UA) and urea of 43 newly diagnosed MM patients and 30 healthy persons in Hainan Nongken Nada Hospital and Nanfang Hospital from February 2010 to January 2014 were detected using Hitachi 7600 automatic biochemical analyzer. Receiver operating characteristic curve (ROC) was used to evaluate the value of Cys-C, β2-MG and Cr in the diagnosis of MM.ResultsThe level of Cys-C in patients with MM (2.06±0.82) mg/L was significantly higher than in the control group (0.71±0.18) mg/L (P＜0.01), and it was significant positive correlated with β2-MG (r=0.523, P＜0.05). During Durie-Salmon stage, the level of CysC (3.14±1.38) mg/L in phaseⅢwas significantly higher than that in phaseⅡ(1.35±0.16) mg/L and phaseⅠ(0.97±0.18) mg/L (P＜0.01). The levels of serum Cr and β2-MG in phaseⅢshowed statistically significant difference comparing with that in phaseⅠandⅡ(P＜0.05). Cys-C level of serum light chain (2.75±1.01) mg/L was significantly higher than that of no secretion (1.49±0.53) mg/L in different immune classification (P＜0.05), and β2-MG level of IgA type serum (7.48±4.52) mg/L was significantly higher than that of no secretion (5.37±2.64) mg/L (P＜0.05). Receiver operating characteristic curve analysis showed that area under curve (AUC) and 95% confidence interval of CysC (0.912, 95%CI: 0.891-0.960) were higher than that of the β2-MG (0.853, 95%CI: 0.821-0.894) and Cr (0.741, 95%CI: 0.702-0.795), the difference was statistically significant (P＜0.05).ConclusionCys-C can be used as one of indexes for the early diagnosis of MM patients with renal damage, which is better than β2-MG and Cr, and it also can help with clinical stage, tumor burden and prognosis.

cystatin C; β2- microglobulin; multiple myeloma

R 733.3

A

2095-5227(2014)11-1126-04

10.3969/j.issn.2095-5227.2014.11.013网络出版时间：2014-07-16 10:58 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20140716.1058.001.html

2014-04-22

苏显都，男，本科。研究方向：临床血液实验学。Email: adgbn129@126.com

范长玲，男，主任医师，科主任。Email: fzhl1209@163. com