蛋白转化酶枯草溶菌素9检测对诊断冠脉粥样硬化的临床意义

李伟其?曾龙宏?莫玉前

【摘要】 目的 探讨应用蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）检测对冠脉粥样硬化的诊断意义。方法 对60例冠脉粥样硬化患者按照冠脉狭窄程度分为轻度组（狭窄<50%）23例、中度组（狭窄50%～75%）26例及重度组（狭窄>75%）11例。对比三组PCSK9含量差异， 同时对所有患者PCSK9含量与甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及冠脉狭窄程度的相关性进行分析， 并分析PCSK9对诊断冠脉粥样硬化的意义。结果 重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）， 同时PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）， PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义（P<0.05）。结论 PCSK9检测对冠脉粥样硬化有着明确的诊断意义。

【关键词】 PCSK9；冠脉粥样硬化；诊断意义

Clinical significance of convertase subtilisin 9 （PCSK9） for diagnosis of coronary atherosclerosis LI Wei-qi， ZENG Long-hong， MO Yu-qian. Department of Blood Transfusion， Dongguan People's Hospital of Dongguan， 523059， China

【Abstract】 Objective To investigate the diagnostic significance of PCSK9 detection on coronary atherosclerosis. Methods 60 patients of coronary atherosclerosis were divided into three groups according to the degree of coronary artery stenosis. Mild group （narrow<50%）， 23 cases， moderate group （narrow 50-75%）， 26 cases and severe group （narrow>75%）， 11 cases. Differences between three groups of PCSK9 content， and PCSK9 content of all patients with triglyceride （TG）， low density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） and the relationship between the degree of coronary artery stenosis were analyzed， and the significance of PCSK9 in the diagnosis of coronary atherosclerotic. Results Severe group of PCSK9 content was obviously higher than that in moderate group and mild group（P<0.05）， while PCSK9 content and TG， LDL-C and degree of coronary stenosis in a significant positive linear correlation（P<0.05），and negative correlation with HDL-C（P<0.05），PCSK9 diagnosis of coronary atherosclerosis existed （P<0.05）.Conclusion PCSK9 detection has a definite diagnosis of coronary atherosclerosis.

【Key words】 PCSK9； Coronary atherosclerosis； Diagnostic significance

动脉粥样硬化属因血脂代谢异常所导致的全身动脉疾病， 其是临床多种疾病的病理基础， 是威胁中老年健康的主要危险因素之一。目前对于动脉粥样硬化检查主要依靠于动脉彩超及血脂检测， 但因冠状动脉部位的特殊性， 因此临床诊断冠状动脉粥样硬化常受到局限。近年来， PCSK9与脂代谢及冠状动脉粥样硬化的相关性受到临床重视[1]， 因此本文对本院行冠状动脉造影检查明确诊断为冠状动脉粥样硬化患者的PCSK9进行分析， 探讨应用PCSK9检测对冠脉粥样硬化的诊断意义。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2013年3月～2013年10月本院收治的经冠状动脉造影检查明确存在冠脉狭窄， 且入院前均未服用降脂药物的患者60例， 按照主动脉狭窄程度分为轻度组（狭窄<50%）23例、中度组（狭窄50～75%）26例及重度组（狭窄>75%）11例。轻度组， 男14例， 女9例；年龄41～61岁， 平均（55.41±10.14）岁；中度， 男18例， 女8例；年龄42～60岁， 平均（54.97±9.97）岁；重度组， 男7例， 女4例；年龄40～63岁， 平均（55.66±9.89）岁。三组以上临床资料比较差异无统计学意义， 具可比性（P>0.05）。

1. 2 观察指标及方法

1. 2. 1 化验检测 所有患者均于行冠脉造影检查前抽取空腹肘静脉血， 进行PCSK9、TG、LDL-C及HDL-C检查， PCSK9检测采用ELISA法， TG、LDL-C及HDL-C检测采用酶法定量。分别统计各组患PCSK9、TG、LDL-C及HDL-C含量， 对比三组PCSK9含量， 同时对所有患者PCSK9含量与TG、LDL-C及HDL-C的相关性进行分析。

1. 2. 2 冠脉造影检查 所有患者入组后均行冠脉造影检查， 切口选择右股动脉， 通过造影检查， 明确冠脉狭窄程度， 并对患者进行分组。对比所有患者PCSK9含量与狭窄程度的相关性。

1. 2. 3 诊断价值分析 对PCSK9对冠脉粥样硬化诊断的敏感性进行分析。

1. 3 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件， 计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 用F检验、直线相关分析及ROC分析进行比较。以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 PCSK9含量差异 重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。见表1。

2. 2 PCSK9含量与TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄相关性 PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。具体见表2。

2. 3 诊断价值分析 PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义（P<0.05）。具体见ROC曲线图（见图1）和表3。

图1 ROC曲线

3 讨论

PCSK9属调控胆固醇代谢的一种特异性分子， 其属于蛋白酶的一种。基础研究显示：人类PCSK9基因位于1号染色体上[2]， 为氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被誉为第九种蛋白转化酶[4]。PCSK9在成人人体中主要在肝脏、小肠和肾脏中表达， 在皮肤及神经系统的表达较少[5]。PCSK9为脂质代谢中的重要调控因子之一， 临床有研究显示PCSK9调控胆固醇机制主要通过PCSK9的表达产物NARC-1实现， NARC-1可刺激调节胆固醇的位点， 并通过与细胞表面LDL受体黏合， 使LDLs从血液中被除去， 发生黏合后， 细胞对胆固醇与受体均执行内在化处理， LDLR被循环到细胞表面并与新的胆固醇分子结合， 而胆固醇被处理。PCSK9通过减少细胞表面LDLR的数量， 从而达到影响胆固醇代谢的作用[6]。因体内胆固醇的含量对冠状动脉粥样硬化发生有着直接的作用， 因此可见， PCSK9可间接起到影响动脉粥样硬化的发生。

本研究主要对于应用PCSK9检测对于冠状动脉粥样硬化的诊断的临床意义进行分析。首先研究通过将经行冠脉造影证实存在冠状动脉粥样硬化的患者按照冠脉狭窄程度进行分组， 对比各组PCSK9含量差异， 结果显示重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。可见随着冠状动脉粥样硬化程度的加重， PCSK9含量也随之升高。同时本研究又将PCSK9含量与引起动脉粥样硬化的主要危险因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄程度的相关性进行分析， 结果显示：PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。可见PCSK9含量在脂质代谢及动脉粥样硬化的过程中均起到了十分重要的影响作用， 其含量的升高可加重脂代谢异常及冠状动脉粥样硬化程度。此外本研究对于应用PCSK9检测对冠状动脉粥样硬化的诊断敏感性进行分析， 结果显示：PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义。提示可以应用检测PCSK9含量来用于诊断冠脉粥样硬化。

通过本研究结果可见， PCSK9含量增多可显著增加冠状动脉粥样硬化的程度， 同时临床应用检测PCSK9含量， 可对冠状动脉粥样硬化的诊断及严重程度进行初步评估， 可用于临床早期诊断冠状动脉粥样硬化的标准之一。

参考文献

[1] Hoffhines AJ，Jen CH，Leary JA，et al. Tyrosylprotein sulfotran-sferase-2 expression is required for sulfation of RNase 9 and Mfge8 in vivo.J Biol Chem， 2009，284（5）：3095-3105.

[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.

1. 2. 2 冠脉造影检查 所有患者入组后均行冠脉造影检查， 切口选择右股动脉， 通过造影检查， 明确冠脉狭窄程度， 并对患者进行分组。对比所有患者PCSK9含量与狭窄程度的相关性。

1. 2. 3 诊断价值分析 对PCSK9对冠脉粥样硬化诊断的敏感性进行分析。

1. 3 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件， 计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 用F检验、直线相关分析及ROC分析进行比较。以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 PCSK9含量差异 重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。见表1。

2. 2 PCSK9含量与TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄相关性 PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。具体见表2。

2. 3 诊断价值分析 PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义（P<0.05）。具体见ROC曲线图（见图1）和表3。

图1 ROC曲线

3 讨论

PCSK9属调控胆固醇代谢的一种特异性分子， 其属于蛋白酶的一种。基础研究显示：人类PCSK9基因位于1号染色体上[2]， 为氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被誉为第九种蛋白转化酶[4]。PCSK9在成人人体中主要在肝脏、小肠和肾脏中表达， 在皮肤及神经系统的表达较少[5]。PCSK9为脂质代谢中的重要调控因子之一， 临床有研究显示PCSK9调控胆固醇机制主要通过PCSK9的表达产物NARC-1实现， NARC-1可刺激调节胆固醇的位点， 并通过与细胞表面LDL受体黏合， 使LDLs从血液中被除去， 发生黏合后， 细胞对胆固醇与受体均执行内在化处理， LDLR被循环到细胞表面并与新的胆固醇分子结合， 而胆固醇被处理。PCSK9通过减少细胞表面LDLR的数量， 从而达到影响胆固醇代谢的作用[6]。因体内胆固醇的含量对冠状动脉粥样硬化发生有着直接的作用， 因此可见， PCSK9可间接起到影响动脉粥样硬化的发生。

本研究主要对于应用PCSK9检测对于冠状动脉粥样硬化的诊断的临床意义进行分析。首先研究通过将经行冠脉造影证实存在冠状动脉粥样硬化的患者按照冠脉狭窄程度进行分组， 对比各组PCSK9含量差异， 结果显示重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。可见随着冠状动脉粥样硬化程度的加重， PCSK9含量也随之升高。同时本研究又将PCSK9含量与引起动脉粥样硬化的主要危险因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄程度的相关性进行分析， 结果显示：PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。可见PCSK9含量在脂质代谢及动脉粥样硬化的过程中均起到了十分重要的影响作用， 其含量的升高可加重脂代谢异常及冠状动脉粥样硬化程度。此外本研究对于应用PCSK9检测对冠状动脉粥样硬化的诊断敏感性进行分析， 结果显示：PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义。提示可以应用检测PCSK9含量来用于诊断冠脉粥样硬化。

通过本研究结果可见， PCSK9含量增多可显著增加冠状动脉粥样硬化的程度， 同时临床应用检测PCSK9含量， 可对冠状动脉粥样硬化的诊断及严重程度进行初步评估， 可用于临床早期诊断冠状动脉粥样硬化的标准之一。

参考文献

[1] Hoffhines AJ，Jen CH，Leary JA，et al. Tyrosylprotein sulfotran-sferase-2 expression is required for sulfation of RNase 9 and Mfge8 in vivo.J Biol Chem， 2009，284（5）：3095-3105.

[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.

1. 2. 2 冠脉造影检查 所有患者入组后均行冠脉造影检查， 切口选择右股动脉， 通过造影检查， 明确冠脉狭窄程度， 并对患者进行分组。对比所有患者PCSK9含量与狭窄程度的相关性。

1. 2. 3 诊断价值分析 对PCSK9对冠脉粥样硬化诊断的敏感性进行分析。

1. 3 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件， 计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 用F检验、直线相关分析及ROC分析进行比较。以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 PCSK9含量差异 重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。见表1。

2. 2 PCSK9含量与TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄相关性 PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。具体见表2。

2. 3 诊断价值分析 PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义（P<0.05）。具体见ROC曲线图（见图1）和表3。

图1 ROC曲线

3 讨论

PCSK9属调控胆固醇代谢的一种特异性分子， 其属于蛋白酶的一种。基础研究显示：人类PCSK9基因位于1号染色体上[2]， 为氨基酸的酸性糖蛋白[3]， 被誉为第九种蛋白转化酶[4]。PCSK9在成人人体中主要在肝脏、小肠和肾脏中表达， 在皮肤及神经系统的表达较少[5]。PCSK9为脂质代谢中的重要调控因子之一， 临床有研究显示PCSK9调控胆固醇机制主要通过PCSK9的表达产物NARC-1实现， NARC-1可刺激调节胆固醇的位点， 并通过与细胞表面LDL受体黏合， 使LDLs从血液中被除去， 发生黏合后， 细胞对胆固醇与受体均执行内在化处理， LDLR被循环到细胞表面并与新的胆固醇分子结合， 而胆固醇被处理。PCSK9通过减少细胞表面LDLR的数量， 从而达到影响胆固醇代谢的作用[6]。因体内胆固醇的含量对冠状动脉粥样硬化发生有着直接的作用， 因此可见， PCSK9可间接起到影响动脉粥样硬化的发生。

本研究主要对于应用PCSK9检测对于冠状动脉粥样硬化的诊断的临床意义进行分析。首先研究通过将经行冠脉造影证实存在冠状动脉粥样硬化的患者按照冠脉狭窄程度进行分组， 对比各组PCSK9含量差异， 结果显示重度组PCSK9含量明显高于中度组及轻度组（P<0.05）。可见随着冠状动脉粥样硬化程度的加重， PCSK9含量也随之升高。同时本研究又将PCSK9含量与引起动脉粥样硬化的主要危险因素TG、LDL-C、HDL-C及冠脉狭窄程度的相关性进行分析， 结果显示：PCSK9含量与TG、LDL-C及冠脉狭窄程度存在显著正向直线相关性（P<0.05）， 与HDL-C存在负向相关性（P<0.05）。可见PCSK9含量在脂质代谢及动脉粥样硬化的过程中均起到了十分重要的影响作用， 其含量的升高可加重脂代谢异常及冠状动脉粥样硬化程度。此外本研究对于应用PCSK9检测对冠状动脉粥样硬化的诊断敏感性进行分析， 结果显示：PCSK9对冠脉粥样硬化存在诊断意义。提示可以应用检测PCSK9含量来用于诊断冠脉粥样硬化。

通过本研究结果可见， PCSK9含量增多可显著增加冠状动脉粥样硬化的程度， 同时临床应用检测PCSK9含量， 可对冠状动脉粥样硬化的诊断及严重程度进行初步评估， 可用于临床早期诊断冠状动脉粥样硬化的标准之一。

参考文献

[1] Hoffhines AJ，Jen CH，Leary JA，et al. Tyrosylprotein sulfotran-sferase-2 expression is required for sulfation of RNase 9 and Mfge8 in vivo.J Biol Chem， 2009，284（5）：3095-3105.

[2] Seidah NG， Be njannet S， Wickham L， et al. The secretory proprotei n convertase neural apoptosis-regulated convertase1 （NARC-1）： liver regenera tion and neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci USA， 2003，100（3）：928-933.

[3] Benjannet S， Rhainds D， Essalmani R， et al. NARC-1/PCSK9 and its natural muta nts：zymogen cleavage and effects on the low density lip oprote in（LDL）receptor and LDL cholesterol. J Biol Chem， 2004，279（47）：48865-48875.

[4] Hunt S C， Hopkins P N， Bulka K， et al. Genetic localization to chromosome1p 32 of the third locus for familial hypercholesterolemia in all tall kindred. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2000，20（4）：1089-1093.

[5] Cunningham D， Danley D E， Geoghegan K F， et al. Structural and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia.Nat Struct Mol Biol， 2007，14（5）：413-419.

[6] Dubuc G， Chamberland A， Wassef H， et al. Statins upreguulate PCSK9， the gene encoding the proprotein convertase neuralapoptosis -regulated convertase-1 implicated in familial huper-choles-terolemia.Arterioscler Thromb Vase Biol， 2004（24）：1454-1459.