慢性特发性血小板减少性紫癜患者血清sHLA-G水平测定的临床意义

宋 斌，章正华，李章志，陈 雁，万楚成

（湖北医药学院附属太和医院血液内科，湖北 十堰 442000）

慢性特发性血小板减少性紫癜患者血清sHLA-G水平测定的临床意义

宋 斌，章正华，李章志，陈 雁，万楚成

（湖北医药学院附属太和医院血液内科，湖北 十堰 442000）

目的 探讨血清可溶性人类白细胞抗原G（sHLA-G）在慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）中的表达及临床意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测76例初治慢性ITP患者治疗前后血清中sHLA-G水平。结果 CITP患者治疗前sHLA-G水平明显高于对照组（P＜0.05）。经治疗缓解后患者血清sHLA-G水平与治疗前相比明显下降（P＜0.05）。未缓解者sHLA-G水平与初诊患者无明显差异（P＞0.05）。结论 sHLA-G可能参与了CITP的发病，检测sHLA-G水平变化有助于慢性特发性血小板减少性紫癜病情判断,可作为疗效观察的新指标。

慢性；特发性血小板减少性紫癜；可溶性人类白细胞抗原G

人类白细胞抗原G（HLA-G）是一种非经典I类组织相容性复合体（MHC）分子，分为膜结合型HLA-G（mHLA-G）和可溶性HLA-G（sHLA-G）。大量的研究结果证实HLA-G在免疫调节及免疫耐受中发挥重要的生物学作用[1]。近期的研究表明HLA-G在自身免疫性疾病如多发性硬化、类风湿关节炎等疾病中的表达发生了改变，推测其可能在自身免疫性疾病的病理生理中发挥重要作用[2]。慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）是成人中最为常见的出血性疾病，其发病机制目前多数认为与免疫介导密切相关，被认为是一种自身免疫病。本研究采用ELISA方法检测慢性特发性血小板减少性紫癜患者缓解前后血清中sHLA-G水平，探讨血清sHLA-G在慢性特发性血小板减少性紫癜的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

CITP组：为2011年1月至2012年3月在我院住院治疗的初治CITP患者76例，均按张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》[3]确诊。其中男24例，女52例，年龄14岁～66岁。正常对照组：48例，均来源于正常志愿献血员，男16例，女32例，年龄18～56岁。

1.2 治疗方法及疗效判定

慢性特发性血小板减少性紫癜患者主要采用肾上腺糖皮质激素泼尼松治疗，肾上腺糖皮质激素泼尼松用量1.0～1.5 mg/（kg·d），口服，至血小板数回升至正常水平时逐渐减量，小剂量维持治疗4～6月后停药。部分病人同时静脉滴注丙种球蛋白，丙种球蛋白用量400 mg/（kg·d），连用5天。

疗效判定按《血液病诊断及疗效标准》[3]，显效：血小板恢复正常，无出血症状，持续3个月以上；良效：血小板上升至50×109/L或较原水平上升30×109/L以上，无或基本无出血症状，持续2个月以上；进步：血小板有所上升，出血症状改善，持续2周以上；无效：血小板计数及出血症状无改善或恶化。显效及良效为缓解，进步及无效为未缓解。

1.3 标本采集

所有患者在治疗前及治疗后清晨空腹抽取静脉血，同时进行血小板计数。取血清标本保存于-20℃备用。

1.4 血清sHLA-G检测

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，sH LA-G试剂盒为捷克BioVendor公司产品，具体步骤严格按试剂盒说明书操作。

1.5 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行分析，结果以“±s”表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

CITP患者治疗后缓解组血清sHLA-G水平与治疗前和未缓解组相比下降，且差异均有统计学意义（P＜0.05）；与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 治疗前后和对照组血清sHLA-G水平（±s，μg/L）

表1 治疗前后和对照组血清sHLA-G水平（±s，μg/L）

注：与对照组相比，#P＜0.05；与治疗前相比，△P＜0.05；与对照组相比，※P＞0.05；与治疗前相比，*P＞0.05。

组别 n 血清sHLA-G治疗前 CITP 76 13.57±5.17#治疗后 缓解组 58 6.20±3.78△※未缓解组 18 13.54±4.31*对照组 48 6.11±4.42

3 讨论

HLA-G基因属于非经典HLA-Ⅰb类基因，具有23个等位基因（16个位于外显子，7个位于内含子），编码7种HLA-G分子，即HLAG1～HLA-G7。生理状况下HLA-G主要表达于胸腺上皮细胞、胚胎滋养层细胞及眼角膜细胞等[1]。大量研究表明HLA-G具有极强的免疫调节作用，主要表现在（1）有效抑制CTL和NK细胞的细胞毒作用；（2）诱导CD8+T细胞或CD8+NK细胞的凋亡；（3）抑制CD4+T细胞的增值或阻碍初始型T细胞的分化；（4）抑制树突状细胞等抗原递呈细胞（antigen presenting cell，APC）的成熟和活化，影响抗原递呈；（5）刺激APC细胞分泌TGF-β、IL-10等细胞因子，使Th1/ Th2平衡移向Th2[4]。研究发现在病理状态下，肿瘤、移植、病毒感染等均能诱导HLA-G分子的异常表达[5]，说明HLA-G分子在一些疾病过程中可能发挥重要作用。

近期的研究表明HLA-G在多种炎性疾病和自身免疫性疾病中的表达发生改变，在溃疡性结肠炎患者的肠粘膜、银屑病患者的病损皮肤组织、哮喘患者的支气管上皮及炎性肌病患者的肌纤维组织中均观察到了HLA-G的表达[6]，表明HLA-G参与了此类疾病的病理生理过程。

本研究显示CITP患者治疗前水平明显增高，其机制可能为在CITP发病过程中免疫递呈细胞刺激T淋巴细胞，活化的T淋巴细胞产生sHLA-G,同时活化的T淋巴细胞激活单核巨噬细胞从而使sHLA-G的释放增加。经治疗缓解后患者血清sHLA-G水平与治疗前相比明显下降（P＜0.05），未缓解者sHLA-G水平与初诊患者无明显差异（P＞0.05）。提示我们sHLA-G可能参与了CITP的发病。

同时从本研究可以看出经肾上腺糖皮质激素治疗未缓解者，其血清sHLA-G水平无明显下降，提示我们在治疗过程中监测sHLA-G水平可以指导治疗及判断病情，肾上腺糖皮质激素目前为CITP的首选治疗，但在肾上腺糖皮质激素治疗过程中，若血清sHLA-G无明显下降，提示肾上腺糖皮质激素治疗效果可能欠佳，则可采取其他治疗措施，从而避免激素的长期大量使用而导致的副作用。

综上所述我们认为sHLA-G可能参与了CITP的发病，检测sHLA-G水平变化有助于慢性特发性血小板减少性紫癜病情判断,可作为疗效观察的新指标。

[1] Apps R,Gardner L,Moffett A.A critical look at HLA-G[J].Trends Immu nol,2008,29(7):313-321.

[2] Rizzo R,Hviid TV,Govoni M,et al.HLA-G genotype and HLA-G ex pression in systemic lupus erythematosus:HLA-G as a putative su sceptibility gene in systemic lupus erythematosus[J].Tissue Antige ns,2008,71(6):520-529.

[3] 张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].第3版,北京:科学出版社,2007:172-175.

[4] 许惠惠,阮嫣赟,颜卫华,等.HLA-G诱导DC细胞在免疫耐受机制中的研究进展[J].生命科学,2011,23(08):736-741.

[5] Yan WH.Human leukocyte antigen-G in cancer:are they clinically relev ant[J].Cancer Lett,2011,311(2):123-130.

[6] Zelante A,Borgoni R,Galuppi C,et al.Therapy modi fi es HLA-G secreti on differently in Crohn's disease and ulcerative colitis patients[J].In fl a mm Bowel Dis,2011,17(8):94-95.

（本文编辑 董林）

Clinical signi fi cance of serum level of sHLA-G in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura

SONG Bin,ZHANG Zheng-hua,LI Zhang-zhi,HEN Yan,WAN Chu-cheng
(Department of Hematology, Af fi liated Taihe Hospital of Hubei Medical College, Shiyan 442000,China)

Objective To investigate clinical signi fi cance of sHLA-G in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura(CITP). Methods Serum levels of sHLA-G in 76 patients with initial CITP were detected using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Results The serum level of sHLA-G in initial patients with CITP was signi fi cantly higher than level of controls (P＜0.05), The serum level of sHLA-G in those having good response after therapy was signi fi cantly lower than before treatment(P＜0.05). There were no difference in sHLA-G between nonremission and initial patients(P＞0.05). Conclusion Serum levels of sHLA-G in the patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura is useful marker to judge state of illness, and sHLA-G may be regarded as new index of curative effect.

Chronic;Idiopathic thrombocytopenic purpura;sHLA-G

R554.6

B

10.3969/j.issn.1674-070X.2014.02.001.001.02

2013-07-12

宋 斌，男，硕士，主治医师，研究方向：血液病的诊断与治疗。

万楚成，男，学士，主任医师，硕士生导师，E-mail：lovmme@tom.com