盐酸氨溴索含量分析方法学

何雅官　张现振　宋良伟

【摘要】目的建立盐酸氨溴索含量分析的方法学。方法色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18，流动相为0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH值至7.0）-乙腈（50：50），流速为1.0mL /min，检测波长为248nm，进样量为20μl。结果辅料干扰试验结果表明其它各原辅料不影响本品盐酸氨溴索的含量测定；线性关系试验结果表明盐酸氨溴索（C13H18Br2N2O·HCl）在5.8688 μg/ml-52.8192μg/ml范围内，浓度与峰面积呈良好线性关系；精密度试验本法精密度较好；溶液稳定性试验表明本品溶液在8小时内稳定性较好；回收率试验表明本法回收率较好；含量测定试验表明本品各批供试品盐酸氨溴索的含量均符合规定。

【关键词】高效液相色谱；盐酸氨溴索；含量

盐酸氨溴索主要适用于痰液分泌不正常及排痰功能不良的急性、慢性呼吸道疾病，如慢性支气管炎急性加重、喘息型支气管炎、支气管扩张及支气管哮喘的祛痰治疗，术后肺部并发症的预防性治疗[1-4]。药理作用主要包括抗氧化作用、减少炎性介质的释放、促进肺泡和咽鼓管表面物质的合成、对呼吸道平滑肌的作用、对气道壁离子转运和电位差的影响[5]。盐酸氨溴索含量采用高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定[6]。1仪器与试剂

安捷伦高效液相色谱仪1260，Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×250nm 5um），XS105电子天平（mettler toledo）。

色谱纯乙腈（禹王集团）、色谱纯甲醇（禹王集团），水为纯化水（自制），磷酸氢二铵（国药集团化学试剂有限公司）。2方法与结果

2.1色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.01mol/L磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH值至7.0）-乙腈（50：50）为流动相；检测波长为248nm。

2.2系统适用性试验取盐酸氨溴索对照品约5mg，加甲醇0.2ml溶解，再加甲醛溶液（1→100）40μl，摇匀，置60℃水浴中加热5分钟，氮气吹干。残渣用水5ml溶解，用流动相稀释至20ml，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，盐酸氨溴索峰与杂质B峰（相对保留时间约为0.7）的分离度应大于4.0。

2.3测定法精密量取本品适量，加流动相定量稀释制成每1ml中约含盐酸氨溴索30μg的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸氨溴索对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的溶液，同法測定。按外标法以峰面积计算，即得。

按照上述拟定的本品盐酸氨溴索的含量测定方法，进行方法学考察：

2.3.1辅料干扰试验按照处方量称取除盐酸氨溴索外的各原辅料，制备供试品，按上述方法制备供试品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果表明其它各原辅料不影响本品盐酸氨溴索的含量测定。

2.3.2线性关系试验取盐酸氨溴索对照品约18.34mg，精密称定，置25ml容量瓶中用水定量稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml至25ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别精密量取1ml、3ml、5ml、7ml、9ml至10ml容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，作为溶液①，②，③，④，⑤。分别精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以浓度C（μg/ml）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线。试验结果见表1。