EDTA—K2抗凝剂导致血小板假性减少

刘忠芳

【摘要】 目的 针对EDTA-K2抗凝剂导致血小板减少现象进行分析及探究。方法 从过去一年间在我院接受检测体检和住院的患者中，发现血小板聚集导致血小板假性减少并最终确认为PTCP者共82例，设为本次研究的试验组。另在体检者中选择20名健康者，设为本次研究的对照组。对试验组82例PTCP者使用EDTA-K2、枸橼酸钠因此抗凝重新抽血送检；对对照组20名健康者依次使用EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝采静脉血，分析两组的血小板计数变化情况。结果 试验组82名患者EDTA-K2抗凝血15min血小板计数结果明显低于枸橼酸钠抗凝和显微镜计数结果（P<0.001）；1h及以后更低；对照组EDTA-K2抗凝结果和枸橼酸钠抗凝15min以内计数结果比较差异。结论 EDTA-K2对血小板可产生聚集作用，引起PTCP。在一定条件下，用枸橼酸钠替代EDTA-K2抗凝静脉血做血小板计数或采末梢血用草酸胺稀释液显微镜人工计数，可以纠正PTCP。

【关键词】 血小板假性减少；EDTA-K2；枸橼酸钠

文章编号：1004-7484（2014）-06-3101-02

血小板不仅在机体止血和凝血方面发挥重要作用，近年来研究表明，其相关参数的变化还和某些疾病的发生发展密切相关，对疾病诊疗及预后评估意义重大。本文我们将选择本院所收治的82例PTCP者作为研究对象，以探讨选择科学的方法排除干扰，保证血小板计数的准确性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 试验组 从过去一年间在我院接受检测体检和住院的患者中，发现血小板聚集导致血小板假性减少并最终确认为PTCP者共82例。包括男性35例，女性47例，年龄15-76岁，平均（45.5±18.3）岁。

1.1.2 对照组 在体检者中选择20名健康者，排除心、肝、肺、肾、脑等重要脏器及免疫性疾病，血小板直方图正常。年龄20-68岁，平均（42.5±16.2）岁。

1.2 仪器与材料 Sysmex-XT1800i血细胞分析仪及配套试剂；Olympus双目显微镜；抗凝剂为EDTA-K2、109mmol/L枸橼酸钠；草酸胺血小板稀释液；瑞-姬染色液。

1.3 检测与分析 参照国际自动CBC和DC复检规则与血小板直方图，对血小板低于70×109/L可疑样本推片，发现血小板聚集者，确定为假性血小板减少。排除采血因素及其他原因干扰，对试验组82例PTCP用EDTA-K2、枸橼酸钠分别抗凝重新抽血送检，EDTA-K2抗凝管在15min、1h及2h，枸橼酸钠抗管凝在15min以内分别用血细胞分析仪检测；并同时采末梢血加入草酸胺稀释液显微镜人工计数。EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝血每份标本涂血片经瑞-姬染色观察血小板分布情况。对照组分别用枸橼酸钠、EDTA-K2抗凝抽血，在即刻（0min）、5min、15min、30min、60min上机血小板计数。所有数据为两次计数均值。

1.4 統计学方法 采用SPSS11.0软件包进行数据统计。数据以均数±标准差（χ±s）表示，组间比较采用配对t检验，以α=0.05为检验水准，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 试验组EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝及显微镜计数结果比较 EDTA-K2抗凝15min血小板计数结果明显低于枸橼酸钠抗凝和显微镜计数结果（EDTA-K2管与枸橼酸钠管比较：t=7.142，P<0.01；EDTA-K2管与显微镜计数结果比较：t=7.190，P<0.01）；1h及以后结果更低。枸橼酸钠抗凝和显微镜计数结果比较，差异无统计学意义（t=1.646，P=0.103）。

2.2 对照组血小板计数结果 20例健康体检者EDTA-K2抗凝和枸橼酸钠抗凝血小板在15min以内计数结果差异无统计学意义（P>0.05），30min及以后结果差异有统计学意义（P<0.01）。EDTA-K2抗凝标本0min与60min检测结果比较差异无统计意义（t=0.857，P=0.402），说明枸橼酸钠抗凝血血小板在15min以后不稳定逐渐降低，EDTA-K2抗凝标本血小板稳定。

2.3 血涂片镜检情况 PTCP组EDTA-K2抗凝标本血涂片在镜下可见大量血小聚集或卫星现象，随时间延长聚集加剧，部分成团状。对照组EDTA-K2抗凝标本和15min以内枸橼酸钠抗凝标本血小板散在均匀分布，30min时枸橼酸钠抗凝标本有微聚集表现，60min时可见聚集明显增加。

3 讨 论

在实际工作中，由于血细胞分析国内普遍使用EDTA-K2抗凝静脉血上机检测，如未对PTCP引起足够重视，对血小板减低病例，如显微镜人工计数复查仍用原标本稀释，对PTCP患者会导致错误报告。血液分析仪中非白细胞域异常散点图对检出PTCP敏感性为100%，特异性为95.9%，出现血小板聚集警示信息对检出PTCP敏感性为92.6%，特异性为97.6%。但由于血细胞分析仪型号差异，检测血小板原理各不相同，实际工作中可能提示信息的反应也不一致。张伟红等研究表明抽血后放置1h内加入6.5mg/ml丁胺卡那霉素，能抑制患者血小板膜表面CD62p、PAC-1和IgG的表达，有效解离EDTA抗凝剂依赖性血小板凝集，且不影响其他血细胞的计数，有助于解决EDTA所致的血小板计数的假性减少。也有文献报道用肝素钠抗凝对PTCP患者在抽血后15min以内进行复查，也可获得准确结果。

我们的实验表明，虽然枸橼酸钠抗凝血血小板在15min以后其稳定性逐渐降低，但在15min内检测结果是可靠的，只要掌握好时间可以消除血小板聚集的影响，该方法适用于住院病例的复查。对于门诊患者，采用末梢血草酸胺稀释液显微镜计数，虽然精密度不如血细胞分析仪，但对于异常结果的复检仍不失为一种简单有效的方法。

参考文献

[1] 郑云.三种方法对EDTA-K2抗凝剂引起血小板假性减少的检测及分析[J].临床医学工程，2011（12）：1924-1925.

[2] 王欣，张丽萍，高晓丽.抗凝剂EDTA及枸橼酸钠导致血小板假性减少现象的分析[J].中国卫生检验杂志，2008（12）：2650-2651.