西门子ADVIA2400生化仪的抗干扰评价

蒋晓军　罗甫花

【摘要】 目的 对西门子ADVIA2400生化仪的抗干扰能力进行评价。方法 采用SPSS和Excel软件依照CLSI（美国实验室标准化委员会）EP7-A2与EP9-A2文件对总蛋白、白蛋白、前白蛋白等不同方法学不同波长的18个项目进行抗干扰试验测试。结果 β2微球蛋白（β2-MG）总蛋白（TP）、前白蛋白（PA）、低密度脂蛋白（LDL）、尿酸（UA）在轻度脂血的干扰下P<0.005，结果有明显差异，白蛋白（ALB）在轻度脂血的干扰下P<0.05，结果有差异。丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、γ谷氨酰基转移酶（GGT）、总胆汁酸（TBA）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）、葡萄糖（GLU）、钙（CA）、淀粉酶（AMS）在不同浓度脂血干扰下P>0.05无明显差异。除PA外受干扰的项目作线性分析都呈线性。讨论 西方子生化分析仪ADVIA2400采用的是稀释模式，不同方法学、不同的标本与试剂比例对脂血的抗干扰能力有较大差异，速率法较终点法、胶乳增强免疫透射比浊法较免疫透射比浊法优。

【关键词】 抗干扰；CLSI；生化仪；评价

文章编号：1004-7484（2014）-06-3052-02

【Abstract】Objective To evaluate anti-interference ability of SIEMENS ADVIA2400 biochemical analyzer.Methods Using Spss and Excel software according to CLSI（American Laboratory Standards Committee）EP7-A2 EP9-A2 document to test 18 different wavelengths projects（total protein、 albumin、 prealbumin et al.）of anti-interference ability with different methods.Results There are significant differences（P<0.005）of these projects include β2-microglobulin 、uric acid（UA）in mild lipemia interference；there is differences（P<0.05）of Albumin（ALB）in mild lipemia interference；there is no significant difference（P>0.05）of these projects include alanine aminotransferase（ALT）、aspartate aminotransferase（AST）、alkaline phosphatase（AKP）、 γ-glutamyl transferase（GGT）、total bile acid（TBA）、urea（BUN）、 creatinine（CREA）、 lactate dehydrogenase（LDH）、creatine kinase（CK）、glucose（GLU）、calcium（CA）and amylase（AMS）at different concentrations lipemia interference；Interference project linear analysis were tested for linearity With the exception of PA.Conclusion SIEMENS biochemical analyzer ADVIA2400 dilution mode is used，the different methodologies of specimen and reagent proportion has bigger difference to the anti-interference ability of the blood lipid；the rate method is better than the end-point method and the Latex-enhanced immunoturbidimetric method is superior to the immune turbidimetric method.

【Key words】 Anti-interference；CLSI；Biochemical analyzer；Evaluation

西門子ADVIA2400是目前唯一使用稀释血清反应的生化分析仪，因使用稀释血清时会相对减少试剂的用量，最小的试剂用量是60ul，是目前生化仪中试剂消耗最少的。由于模式的改变从而使生化反应的线性、抗干扰能力和反应的曲线等与其他不稀释模式的生化仪有所差异，临床上最常见的标本干扰大多来自于脂血，特进行对血脂的抗干扰能力测试。

1 材料与方法

1.1 低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、淀粉酶（AMS）选用宁波美康生物科技有限公司，β2微球蛋白（β2-MG）选用（四川迈克生物科技股份有限公司）；总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、γ谷氨酰基转移酶（GGT）、总胆汁酸（TBA）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）、尿酸（UA）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）、甘油三酯（TG）葡萄糖（GLU）、钙（CA）试剂来自（上海科华生物股份有限公司）；脂肪乳：商品名力能，（华瑞制药有限公司），中/长链脂肪乳注射液

1.2 仪器 西门子生化仪ADVIA2400。

1.3 校准品与质控品 校准品与质控品为英国朗道（RANDOX）公司生产，批号为校准品CAL2350-585UN，质控品中值为HN1530-624UN；高值为HE1532-403UE。

1.4 临床判定标准 根据CLIA'88能力验证计划的分析质量要求，规定的室间质量评价标准靶值±允许误差，以CLIA'88要求的总误差的1/4作为批内变异系数允许范围和系统误差（SE，%）的临床可接受标准。

1.5 精密度分析 中值与高值质控品重复测定20次及每天随机测定2次，连续测定20天。

1.6 干扰试验 依据EP7-A2文件收集足够多的外观清亮的血清混合，3000r/min5分钟离心备用，分别吸取3.8ml加入0.2ml生理盐水为对照；3.8ml血清加入0.2ml脂肪乳相当于TG23.6mmol/L为重度脂血；3.8ml血清加入0.10ml脂肪乳、0.10ml生理盐水相当于TG11.8mmol/L中度脂血；3.8ml血清加入0.05ml脂肪乳、0.15ml生理盐水相当于TG6.1mmol/L为轻度脂血；按照CLSI文件要求对每个加入干扰物的样品重复测试8次对结果进行统计学分析[4]。

1.7 线性分析 对脂血影响较大的项目作线性分析，选取低值和高值标本各一个，低值标本为1号，高值标本为5号，二者3：1混匀为2号，等份混匀为3号，1：3混匀为4号，每份样品测定8次，设定值浓度=（C1V1+C5V5）/（V1+V5），C为浓度，V为体积。

2 结 果

2.1 干扰分析 当TG为23.6mmol/L重度脂血时AST、ALT、CK、AMS、LDH、TBA、UREA、AKP、GGT、CREA、GLU、CA结果差异均无统计学意义。当TG为6.1mmol/L轻度脂血时TP、UA、LDL、PA、β2-MG的P<0.005结果有显著性差异，ALBP<0.05有差异，见表1。

3 讨 论

现今随着大型全自动生化分析仪的广泛应用于临床，仪器的精密度得到了较大的提高，生化检验的误差主要来自于标本的前处理，2006年国际临床化学杂志报导100个医院实验室出现结果的错误，分析前产生的误差占总误差的46-68.2%，分析中误差占15%，又主要来自于试剂方法学与厂家的选择[1]。西门子ADVIA2400生化分析仪是目前唯一使用稀释模式的大型生化分析仪，经过稀释后的样品与试剂比例和常用的生化仪不同，在选择试剂上要求会更苛刻，并且在线性和最低检测限及抗干扰方面会有差异。乳糜血是临床检验工作中最棘手的问题，本人依据CLSI的EP9A文件对ADVIA2400上使用的不同方法学不同波长的18个项目进行了抗干扰评价[2]，乳糜物质对使用速率法的AST、ALT、CK、AMS、LDH、TBA、UREA、AKP、GGT等9个项目在重度脂血TG达到23.6mmol/L的时结果差异均无统计学意义[3-4]。终点法的8个项目中GLU、CREA副波长分别为800nm与660nm与主波长有较大差异，而且是双试剂，样品与试剂比较大因此消除了乳糜的干扰。TP与ALB都是终点法单试剂，受乳糜影响结果偏高与董立杰结论的不同[5]，TP因为样品与试剂比例为1：50较ALB1：100小，因些受干扰的程度较严重。而LDL由于采用的是选择性抑制法，可能试剂1无法消除较多的TG、CM、VLDL的干扰。β2MG与PA都是免疫透射比浊法，PA在日常工作中经常有些标本因为脂血干扰引起吸光度异常无法计算结果，而β2MG为胶乳增强免疫比浊法，虽然也受到一定干扰，结果偏低，但是抗干扰能力要优于PA。通过试验我们得知脂血对速率法影响较小，对于终点法影响程度不一，可以根据不同项目选择适合的试剂，比如TP我们可以改变样品与试剂的比例，或者改成双试剂法如西门子原装TP试剂为双缩脲双试剂法，可以一定程度的消除脂血的干扰，如果只能是单试剂，现在的仪器可以在脂血样品检测时样品空白检测来消除脂血干扰。而使用免疫比浊法的项目尽量考虑使用胶乳增强免疫比浊法。现在有些厂家在胱抑素C等项目上又推出了胶体金免疫增强比浊法，在灵敏度、抗干扰及稳定性上更好。脂血样本的干扰大多为线性干扰，我们通过回归方程可以得到不同浓度干扰物所对检测项目的干扰值，理论上可以对有干扰的项目进行修正，但由于样品中可能同时存在除TG以外的如乳糜微粒、溶血、胆红素的干扰而难以准确的校正。有文献报道[6]可以用聚乙二醇（PEG）处理样品检测可以一定程度的消除脂血干扰，但在实际工作中较难实行，并且PEG为外来物质，对某些厂家的试剂及某些样品可能也存在不可知的干扰，须进行大量的临床检验来证实，或者使用超高速的离心仪来分离血清。在无法彻底消除脂血干扰的情况下，我们应按照CLSI文件对本科的仪器及试剂作好抗干扰的验证，并在所发的报告中提醒醫生有较大干扰的项目，以便医生作出正确的判断，如有必要可调节饮食后复检。

参考文献

[1] 叶应妩，王毓三.申子的瑜全国临床检验操作规程[M].3版.南京：东南大学出版社，2006.

[2] 杨昌国，许叶，张抗.线性评价和干扰试验中NCCLS评从方案的应用[J].临床检验杂志，1999，17（1）：184-186.

[3] 杨滨，李贵生，李萍，等.血清胰淀粉酶试剂盒方法性能评价[J].华西医学，2008，23（4）：832-83.

[4] 胡勤辛，王强，毕其华，于小妹.常用酶类检测项目干扰试验的实验分析[J].检验医学，2008，1（23）：86-88.

[5] 董立杰.标本脂血对临床生化检测结果的评估及其对策[J].实用医技杂志，2010，17（4）：344-346.

[6] 林景涛，等.高脂血对血清酶类活性测定影响及处理方法[J].医学检验与临床，2010，8（7）：1542-1545.