乙型肝炎病毒大蛋白检测的临床意义

田雨香 张 菁

（上海市徐汇区大华医院,上海 200237）

乙型肝炎病毒大蛋白检测的临床意义

田雨香 张 菁

（上海市徐汇区大华医院,上海 200237）

目的探寻乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒表面大蛋白（LHBs）表达量的变化及其与病毒载量的相关性。方法对临床确诊为慢性乙型肝炎的170例病例及28例健康对照血清样本分析，ELISA检测乙型肝炎表面大蛋白的含量、实时定量PCR检测乙型肝炎病毒。结果乙型肝炎病毒表面大蛋白在乙型肝炎患者的血清中表达，在非乙型肝炎的患者中不表达，并且和乙型肝炎病毒的载量成正相关。结论乙型肝炎病毒表面大蛋白的表达，可以作为临床感染乙型肝炎病毒及临床疗效判断的参考依据。

乙型肝炎病毒；大蛋白；病毒载量；血清

乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染性疾病之一,而我国是慢性乙型肝炎（cHB）的高发区,感染率达到10%～15%。近年来研究发现,乙型肝炎病毒表面的大蛋白（LHBs）与HBV的复制密切相关,是HBV感染、复制及乙型肝炎患者的诊断、治疗和预后的一个新的标志。本文通过对170例慢性乙型肝炎患者同时进行LHBs检测,并将结果进行比较和分析,探讨乙型肝炎患者血清中LHBs与HBV-DNA的关系。

1 对象与方法

1.1 患者资料:选择2010年10月至2011年3月在中医肝科门诊就诊的慢性乙型肝炎患者,诊断按2000年西安会议《病毒性肝炎防治方案标准》[1]排除其他病毒感染:HAV,HCV,HDV,HEV及HIV。非乙型肝炎患者（脂肪肝及丙型肝炎患者或者健康人）28例,作为正常对照组。采集静脉血,同时进行LHBs和HBV-DNA 检测,LHBs检测试剂盒由热景公司提供,ELISA方法,酶标仪为伯乐550型,HBV-DNA检测试剂为广州达安生产,ABI7000型荧光定量PCR进行扩增。

1.2 统计方法:比较病毒载量和大蛋白的相关性,病毒载量取对数,进行t检验,同时以病毒含量分组,用χ2检验比较各组大蛋白含量的差异,应用SPSS11.0统计软件进行分析。

2 结 果

170例患者符合纳入标志,平均年龄48.6岁,其中女性68例,经检测,病毒载量和大蛋白的结果,经Pearson检验,相关系数为r=0.828, P＜0.01。按病毒载量分为三组:单位IU/mL。①组:毒载量＜103男性14例,女性9例,平均年龄50.3岁,LHBs检测结果为（0.027± 0.014）；②组:病毒载量为103～106 男性51例,女性35例,平均年龄48.8岁,LHBs检测结果为（0.286±0.091）；③组:病毒载量＞106男性为37例,女性为24例,LHBs检测结果为0.937±0.214；④组:为非乙型肝炎患者组,男性17例,女性11例,平均年龄54.2岁,乙型肝炎病毒含量均低于检测下限并且扩增曲线无抬高,LHBs检测结果均为阴性,部分结果为负值。各实验组相关资料见表1。

表1 各实验组临床资料

3 讨 论

乙型肝炎病毒的外膜蛋白有三种:表面抗原、PreS1抗原和PreS2抗原,组装成三种不同的HBV颗粒,大蛋白（LHBs）与含有HBVDNA的Dane颗粒关系最为密切[2],是由表面抗原。国内外的基础及临床研究表明:LHBs可以激活蛋白激酶C,导致c-Raf/MEK信号通路的激活,表明LHBs具有转录激活功能[3]。魏红山课题组经过48周的阿德福韦酯治疗慢性肝炎的系列血清乙型肝炎病毒LHBs的动态监测,发现治疗前患者血清LHBs的抗病毒治疗效果有一定的预测作用,并且LHBs的含量和HBV-DNA拷贝数的对数值有相关性[4]本文研究结果与其基本一致,即随着乙型肝炎病毒含量的增加,大蛋白的浓度也随之增加。浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所的研究表明:在拉米夫定治疗应答明显的患者中,HBV LHBs比HBV DNA转阴大约晚5个月,结合临床,抗病毒治疗后HBV DNA阴转后停药相当比例患者病情反弹[5],因此,研究人员认为治疗效果监测单独采用HBV DNA指标是不够的,应该增加对乙型肝炎病毒复制有转录激活作用的乙型肝炎LHBs的检测。在临床诊断治疗病毒性乙型肝炎时,需综合考虑各种因素,LHBs可以作为感染、复制、病情观察和预后评估的联合监测指标.尤其对无条件开展DNA检测的中小型实验室。可将其列为乙型肝炎感染的常规辅助诊断项目来推广应用。

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[3] Block TM,Guo H,Guo JT. Molecular virology of hepatitis B virus for clinicians[J].Clin Liver Dis,2007,11(4):685-706.

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[5] 陈晓明,杨美芳,薛寒,等.乙型肝炎病毒大蛋白和DNA在抗病毒治疗过程中的变化[J].中华传染病杂志,2007,25(7):41-43.

Clinical Significance of Testing the Large Protein on the Surface of Hepatitis B Virus in the Serum

TIAN Yu-xiang, ZHANG Jing
(DaHua Hospital of Xuhui District, Shanghai 200237, China)

ObjectiveTo find the relationtion of the large protein on the surface of hepatitis B virus(LHBs) and loading of hepatitis B virus in the serum .MethodsTesting the concentration of LHBs by ELISA and loading of hepatitis B virus by real-time PCR in serum of 170 patients and 28 controls.ResultThere are some LHBs in the serum of patients with hepatitis B ,as the same time they are positive correlation and there are not any LHBs in the healthy control.ConclusionThe large protein on the surface of hepatitis B virus could regard as a marker thought which indicate the infection hepatitis B virus and effect of the treatment.

Hepatitis B virus; Large protein (LHBs); Loading of the virus; Serum

R512.62

B

1671-8194（2014）25-0097-02

上海市科学技术委员会科技支撑项目（编号：1340190290A）