701跌打镇痛膏活血化瘀实验研究

杨 威，郭秋平，郭健敏，汪玉芳，邓慧敏，肖百全

（1.广州医药研究总院有限公司药物非临床评价研究中心，广东广州 510240；2.广州白云山制药股份有限公司白云山何济公制药厂，广东广州 510410）

701跌打镇痛膏主要由土鳖虫、草乌、马钱子、大黄、水杨酸甲脂等14味药物组成，具有活血止痛，散瘀消肿，祛风胜湿的功效，临床上主要应用于急、慢性扭挫伤，慢性腰腿痛，风湿关节痛等病症，是中国外用贴膏类出口第一产品。虽然701跌打镇痛膏已经上市销售多年，在临床上也取得了一定的疗效，但是其活血化瘀作用目前尚未见相关实验报道。为进一步明确701跌打镇痛膏的活血化瘀作用，了解其作用特点而进行本研究。

1 材料与方法

1.1 药品和试剂 701跌打镇痛膏，广州白云山制药股份有限公司白云山何济公制药厂市售产品，批号为U1045。精制狗皮膏：天津同仁堂集团股份有限公司产品，批号为AX01；酚妥拉明，广东环球制药有限公司生产，批号100203。

1.2 实验动物 SD大鼠：5-6周龄，72只，♀♂各半；ICR小鼠：5～6周龄，70只，♀♂各半，大小鼠均为SPF级，均从湖南斯莱克景达实验动物有限公司购进，实验动物质量合格证号为HANSLKJ20121767、HNASLK20121327。

1.3 仪器设备 足容积测定仪，本室根据毛细管放大法自制；BX-40解剖显微镜和Image图像分析系统，Olympus。

1.4 方法

1.4.1 对自体血致SD大鼠足跖血肿模型的影响［1］大鼠实验前按右后足容积大小随机均衡分为空白对照组、模型对照组、精制狗皮膏组、701患处给药组、701腹部贴敷给药低、高剂量组。除空白组动物外，其余动物均无菌操作下从尾静脉取血0.15 ml，取出的血液立刻注入采血大鼠右后足跖底部造成血肿，空白对照组注射等容积的生理盐水。注射完毕后立即给予相应的药物。分别测定造模后6 h、2 d大鼠的右后足足容积。造模后d 3、d 5给药结束后，每组分别处死4、8只大鼠，切取大鼠造模部位足跖皮肤并进行组织学观察。大鼠给药量为 0.36、1.44贴／kg、0.125贴／只（患部给药），精制狗皮膏药大鼠给药量为0.8贴／kg。患部敷贴和腹部敷贴法给药，至少保持药物和动物皮肤直接接触6 h。

1.4.2 对小鼠微循环障碍模型的影响［2］ICR小鼠按体重和性别随机均衡分为空白对照组、模型组、狗皮膏组、酚妥拉明组、701低、中、高剂量组。分组后各组按照给药要求进行腹部敷贴给药，每天1次，连续5 d。末次给药2h后，乌拉坦（25%）溶液按7 ml·kg-1麻醉，暴露肠系膜，除空白对照组外，其余各实验组均滴加0.1 ml注射用盐酸肾上腺素造成肠系膜微循环障碍模型，并在解剖显微镜下观察，回盲部分别选取10～20μm之间的细动脉和20～30μm之间的细静脉各1支，用10×10倍镜进行观察。实验结束后采用图像分析软件（Image-plus 4.0）测量动、静脉直径和判断各动物血流情况并分级。给药方法同“1.4.1”，小鼠给药量为0.52、1.04、2.08贴／kg，精制狗皮膏药小鼠给药量为 1.04贴／kg。

1.5 统计学方法 所有计量数据均输入SPSS 13.0统计软件进行ONE-WAY ANOVA统计分析，并采用¯x±s表示。

2 结果

2.1 对自体血致SD大鼠足跖血肿模型的影响 实验结果表明（Tab 1-3）：各实验组治疗效果排序为701患处给药组＞狗皮膏药组＞701贴敷高剂量组＞701贴敷低剂量组。

2.2 对小鼠微循环障碍模型的影响 实验结果表明（Tab 3）：701中、高剂量组微循环障碍有明显改善，能够使动、静脉直径增宽，与模型组相比差异有显著性，低剂量组未见明显改善。酚妥拉明能明显改善模型动物的微循环障碍。精制狗皮膏改善微循环作用不明显，能使静脉直径增宽，但对动脉直径未见明显改善，对于血流情况亦未见明显改善。

Tab 1 Effect of 701 on rats’paw volume（±s，n＝12）

Tab 1 Effect of 701 on rats’paw volume（±s，n＝12）

##P＜0.01 vs negative control group；**P＜0.01 vs control group

Group Dose／paste·kg-1 Volume of rats’feet／ml 0.19 Control - 1.61±0.20 1.77±0.21 1.62±0.13 Goupigaoyao 0.125paste／rat 1.62±0.18 2.04±0.24**## 1.74±0.17 Affected part administration 0.125paste／rat 1.62±0.18 1.91±0.19** 1.62±0.11 701 lose dose 0.36 1.61±0.20 1.76±0.20 1.59±0.18 701 high dose 1.44 1.60±0.19 1.70±0.25 1.55±0 Basic volume 6h after molding 2d after molding Negative control - 1.65±0.21 1.64±0.19 1.63±.20

Tab 2 Results of histological examination

Tab 3 Effect of 701 on microcirculation disturbance model（±s）

Tab 3 Effect of 701 on microcirculation disturbance model（±s）

##P＜0.01 vs negative control group；*P＜0.05，**P＜0.01 vs control group

Group Diameter of the vein／mm Gradeof blood flow Negativecontrol 104.6±33.1** 52.5±17.4** 3.0±0.9 Diameter of the artery／mm**Control 61.5±21.9## 36.1±11.9## 1.2±0.6##701 lowdose 87.3±44.4 44.6±17.2 1.3±0.7 701 middle dose 94.7±32.2* 50.6±26.9* 1.4±0.8 701 high dose 101.5±23.1** 51.1±11.3* 1.9±0.7*Goupigaoyao 107.1±55.4* 44.5±26.9 1.4±0.8 Phentolamine 129.3±27.1** 58.8±14.9** 2.2±0.8*

3 讨论

本研究结果表明，注射自体血6 h后，狗皮膏药组、701患部给药组足容积明显增大，其它组足容积有增大的趋势，但未见统计学意义，该现象可能与自体血注射入局部组织中引起急性炎症反应有关，但24 h后各实验组足容积相近，未见明显差别，表明急性炎症反应得到缓解。701患部给药3 d、5 d后与模型组相比局部病变明显减轻，表明701跌打镇痛膏对自体血肿模型具有一定的改善作用。701跌打镇痛膏腹部敷贴给药高、低剂量组也有一定的改善作用，但均弱于患部给药组，表明701跌打镇痛膏具有活血化瘀作用，且局部给药作用强于全身给药。精制狗皮膏药也具有一定的改善作用，但弱于701跌打镇痛膏。

微循环障碍是跌打损伤局部瘀血难以快速吸收的重要原因之一，为进一步考察701跌打镇痛膏的活血化瘀作用，本研究还选用了肾上腺素诱发的小鼠微循环障碍模型进行研究。701中剂量、高剂量能改善盐酸肾上腺素引起的动静脉血管的收缩，使动脉和静脉管径增宽，改善血流障碍情况，表明701跌打镇痛膏具有改善微循环障碍的作用。精制狗皮膏药也具有增加静脉管径的作用，但对动脉和血流状态未见明显改善作用。

根据上述研究结果可判断701跌打镇痛膏具有明显的活血化瘀作用，特别是对局部血液循环障碍和皮下损伤出血所致的瘀血应该具有明显改善作用，值得进一步深入研究和推广应用。

参考文献：

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