持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的变化研究

陈玉阁，孟军，王海鹰，杨玉

(深圳市蛇口人民医院妇产科，广东 深圳 518000)

·论著·

持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的变化研究

陈玉阁，孟军，王海鹰，杨玉

(深圳市蛇口人民医院妇产科，广东 深圳 518000)

目的探究持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的变化。方法选取我院2010年9月至2012年3月期间进行人流的早孕患者80例，将其均分为两组，试验组患者阴道超声照射10 min，而对照组患者则照射5 min，然后在照射后24～30 h进行人流并取绒毛组织进行检测，比较两组患者照射后绒毛组织DNA及其超微结构的变化情况。结果经过检测得到，试验组患者的绒毛组织单链DNA量为(0.19±0.06)µg/µl，双链DNA量为(0.15±0.09)µg/µl，明显低于对照组患者的(0.23±0.07)µg/µl和(0.19±0.07)µg/µl，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，试验组患者的绒毛组织超微结构发生异常者40.00%，对照组为10.00%，差异也具有统计学意义(P＜0.05)。结论降低患者进行阴道超声辐射的时间可以减少患者绒毛细胞超微结构的改变。

持续阴道超声辐射；人胚早孕绒毛细胞；超微结构；变化

近年来，随着医学的发展，超声检查越来越多地被应用于医学检查方面，但是，这种超声检查会伴有一定的辐射，对人体造成伤害[1]。因此，为了探究持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的影响，我院选取80名意外怀孕，自愿要求终止妊娠的早孕患者进行试验，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选取我院2010年2月至2011年8月期间即将进行人流的80例早孕患者为研究对象，根据随机数字表法分为两组，试验组40例，年龄20～32岁，平均(25±1.3)岁，妊娠40～63 d；对照组40例，年龄21～34岁，平均(26±1.7)岁，妊娠42～63 d。所有患者在孕前均未进行过超声检查，并且月经规律，孕期无阴道流血症状，在怀孕半年以内没有服用过避孕药，也都没有流产史，怀孕近期内均未发生感染现象，无吸烟饮酒的不良嗜好等。所有患者的一般资料比较差异均无统计学意义，具有可比性。所有的患者均签署知情同意书，了解并同意各自的治疗方法。

1.2 方法①试验组患者在进行人流前经过阴道超声照射10 min，对照组患者的照射时间为5 min，两组患者的照射情况除了在时间长短方面不同外，其他各项的条件均相同。采用百胜AU3 B型超声诊断仪进行检查，将探头的频率设置为7.5 MHz，并且要求所有患者采取仰卧位，然后将经阴道探头置于阴道内准确找到妊娠囊，最后两组患者进行不同时间的照射。在经过照射24～30 h后对所有患者进行人工流产操作，取患者新鲜的绒毛组织，用生理盐水冲洗后予2.5%的戊二醛和1%的四氧化锇中固定。②细胞染色体的制备与测定：利用具有碱性解链作用的酶以及羟基磷灰石将绒毛细胞分离，然后通过紫外分光光度法对DNA单链断裂(SSB)和双链断裂(DSB)进行定量检测。③观察绒毛细胞的超微结构：选取3～4根分枝较好的绒毛枝，放置在2.5%的戊二醛和1%的四氧化锇中固定，然后用丙酮进行梯度脱水，再用Epon812环氧树脂进行包埋，接着利用超薄切片机将其切片，并用醋酸双氧铀及柠檬酸铅双染色，最后通过透射电镜观察绒毛细胞的超微结构。

1.3 统计学方法应用SPSSl5.0软件进行数据分析，计量数据以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，计数资料以百分比表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者经过不同时间照射后绒毛组织DNA变化比较经过定量检查发现，两组患者的单、双链DNA含量的比较差异具有统计学意义(P＜0.05)，表明试验组患者的DNA变异较大，而对照组患者经照射后的变异较小，见表1。

表1 两组患者绒毛细胞单双链DNA含量比较（μg/μl，±s）

表1 两组患者绒毛细胞单双链DNA含量比较（μg/μl，±s）

2.2 两组患者绒毛细胞超微结构变异比较试验组患者的绒毛细胞超微结构的异常率为40.00%，而对照组患者仅为10.00%，其差异有统计学意义(χ2= 9.600 0，P＜0.05)，见表2。

表2 两组患者绒毛细胞超微结构变异情况比较（例）

3 讨论

超声波检查是一种利用人体对超声波的反射以及折射来对人体结构进行观察的检查方式，一般就是把较弱的超声波照射到人的身体上，然后将人体内部组织的反射波利用仪器转化为不同的图像或是曲线显示出来，例如，B超就能够清楚地显示出人体内部各个脏器和周围组织的各种断面像，并且显示的图像具有很好的实体感，能形象简便的将疾病的部位、形状、大小等反映出来，非常近似真实的解剖结构，因此可以利用超声检查来对疾病进行早期的诊断，从而有利于疾病的治疗[2-3]。但是有研究指出：通过对腹部被辐射后的早孕绒毛细胞进行研究发现，辐射的剂量过大、时间越长，给胚胎造成的潜在危害就会越大[4]。孕妇在经阴道超声检查时，选择的探头频率要远超过经腹检查时探头频率的一倍，达到较高分辨率的目的，从而可以将患者诊断早孕的时间缩短[5]。但是由于进行阴道超声检查时探头距离胚胎的位置更近，所以其对胚胎产生的生物效应就更加不容忽视[6]。绒毛是一种来源于滋养层的在受精卵有丝分裂过程中形成的衍生物，它携带与胚胎及胎儿一样的遗传物质，是维持早孕胚胎发育的重要组织，一旦绒毛出现损伤，则将对胎儿有近期或远期影响，绒毛细胞受损势必影响胚胎发育[7-8]。

本研究结果显示，在被照射5 min后，进行人流的患者绒毛细胞的DNA以及超微结构的变异率为10.00%，明显低于被照射10 min患者的40.00%，差异具有统计学意义(P＜0.05)。并且绒毛细胞的超微结构在胞质内空泡化现象、微绒毛的排列以及细胞核周围的间隙、线粒体形态、粗面内质网形状等方面均无较大变化，说明在进行阴道超声检查时，持续的时间越长对患者造成的损害就越大，对胚胎的影响越严重[9-10]。

综上所述，持续阴道超声辐射时间长对人胚早孕绒毛细胞超微结构及绒毛细胞DNA会产生明显的改变，因此，在进行阴道超声检查时间不应超过10 min，从而降低对胚胎早期的损伤，确保胚胎安全。

[1]余俏燕,孟军,武艳玲,等.阴道超声辐射对人类早孕胚胎绒毛超微结构的影响[J].宁夏医学杂志,2010,32(8):713-714.

[2]王鹤,王海鹰,孟军,等.经阴道超声致人胚绒毛细胞器损伤时序的研究[J].宁夏医学杂志,2013,35(6):549-550.

[3]刘海涛,饶美兰,刘国成,等.阴道超声对人早孕绒毛细胞HSP70的影响[J].吉林医学,2013,34(23):4661-4663.

[4]杨玉,孟军.阴道超声对人早孕胚胎绒毛超微结构的影响及其可复性的研究[J].中国社区医师医学专业,2010,12(12):69-70.

[5]Barnett SB,Ter Haar GR,Ziskin MC,et al.Effect of transvaginal ultrasound irradiation on expression of Bcl-2 and Caspase-3 in human embryo cytotrophoblasts[J].Chinese Journal of General Practice,2011,9(7):1030-1031.

[6]王慧.官腔镜检查术在绝经后出血中的诊断价值[J].中国妇幼保健,2010,25(20):2905-2906．

[7]吕涛,刘艳丽,吕晓玉,等.阴道超声与宫腔镜检查诊断绝经后出血的价值对比[J].中国老年学杂志,2013,33(15):3797-3798.

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[9]谢杏美,王玉霞,石晓蓝,等.血清β-HCG及孕酮联合阴道超声在异位妊娠保守治疗中的价值[J].广东医学,2010,31(9): 1144-1147.

[10]肖文惠.经腹部与经阴道超声检查对早期异味妊娠诊断价值的探讨[J].中国医药指南,2012,10(23):132-133.

Study on changes of persistent vaginal ultrasound radiation on human embryonicvilli ultrastructure.

CHEN Yu-ge,MENG Jun,WANG Hai-ying,YANG Yu.The Obstetrics and Gynecology Department,Shekou People's Hospital of Shenzhen.Shenzhen 518067,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo explore the human embryonic villi ultrastructure changes by persistent vaginal ultrasound radiation.MethodsEighty cases of induced abortion in our hospital from Sep.2010 to Mar.2012 were selected as the study objects and divided into two groups,vaginal ultrasound radiation was performed in experimental group patients for 10 minutes,while the control group was irradiated for 5 minutes,after 24 to 30 hours of irradiation, induced abortion was adopted in two groups and detected their pile weave,pile weave DNA and changes of ultrastructure after irradiation in two groups were compared.ResultsAfter detecting,it showed that the ssDNA of pile weave of experimental group was(-0.19±0.06),dsDNA was(0.15±0.09),which were significantly lower than control group [(0.23±0.07)and(0.19±0.07)],differences between two groups were statistically significant(P＜0.05);in experimental group,the incidence of abnormal ultrastructure in pile weave was 40.00%,while in control group was 10.00%,difference was statistically significant(P＜0.05).ConclusionIt can reduce the changes of ultrastructure in pile weave that lower the time of vaginal ultrasound radiation.

Persistent vaginal ultrasound radiation;Human embryonic villi cells;Ultrastructure;Change

R714.12

A

1003—6350（2014）13—1927—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.13.0747

2014-02-10)

广东省深圳市科技局立项（编号：201002175)

陈玉阁。E-mail：cyg_sz@sina.com