原发性肝细胞癌OSM、OSMR表达与临床资料关系及意义

钱俊甫

（平煤神马医疗集团总医院，河南 平顶山 467000）

原发性肝细胞癌OSM、OSMR表达与临床资料关系及意义

钱俊甫

（平煤神马医疗集团总医院，河南 平顶山 467000）

目的 探讨原发性肝癌（HCC）及癌旁组织中OSM、 OSMR 表达与临床资料的关系及意义。方法 用固相夹心法酶联免疫吸附法（ELISA）检测30例HCC及其癌旁组织中OSM、OSMR表达水平，常规检测患者术前血清AFP、AST、ALT、TBIL水平，并同时将30例肝癌患者按性别、年龄、Child 分级、AFP、乙型肝炎表面抗原、肝硬化、TNM分期、肿瘤有无假包膜情况进行分组，通过方差分析与Logistic回归对肝癌及癌旁组织OSM、OSMR表达与以上临床资料进行分析，研究原发性肝细胞癌中OSM OSMR表达与临床资料关系及意义。结果 ①肝癌及癌旁组织中OSM、OSMR表达与年龄、性别、乙型肝炎表面抗原阳性、Child分级、肝硬化、AST、ALT、TBIL等因素无关（P＞0.05）；②肝癌及癌旁组织中OSM、OSMR表达与AFP、TNM分期、肿瘤有无假包膜相关（P＜0.05）。结论 OSM、OSMR与HCC发生、发展密切相关；肝癌及癌旁组织中OSM、OSMR表达与AFP、TNM分期、肿瘤无假包膜密切相关。

原发性肝细胞癌；肿瘤抑制素M；受体；临床资料；表达

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)预后差、术后复发率高、远处转多见、5年生存率较低等特征，常迅速侵犯肝实质导致肝功能衰竭,病死率高，被认为是常见而又难治的恶性肿瘤[1]。肿瘤抑制素M（oncostatin M，OSM）及其受体(oncostatin M receptor，OSMR)可与多种细胞因子相互作用而构成调控网络，发挥着复杂的调节功能。本研究采用ELISA法检测肝癌组织中的OSM、OSMR的表达，旨在了解OSM、OSMR表达与临床资料关系及意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

30 例肝癌（HCC组）及癌旁组织(癌旁组)，标本均取自平煤总医院普外科2009年10月至2013年7月行手术治疗的HCC患者，所有病例均经病理证实的HCC。其中男24例，女6例，平均年龄52.8岁，＜60岁20例，≥60岁10例；乙肝表面抗原（HBsAg）阳性25例，肝硬化24例；甲胎蛋白(AFP)平均520.6 μg/L，＜200 μg/L者13例，≥200 μg/L者17例；肿瘤直径平均5 cm，＜3 cm者7例，≥3 cm者23例；病理分级：Ⅰ～Ⅱ级22例，Ⅲ级8例；TNM分期采用UICC标准：Ⅰ～Ⅱ期18例，Ⅲ期以上12例；肝功能Child分级：A级26例，B级4例。另常规检测患者手术前血清AFP、AST、ALT、TBIL水平。正常对照组11例，6例来源于同期手术治疗的肝血管瘤患者（所有病例均经病理证实），5例均为肝外伤术中切除的正常肝组织；11例均无乙、丙肝病毒感染史及肝硬化病史。

1.2 方法

①试剂：人OSM、OSMR ELISA检测试剂盒购自美国ADL公司。②标本的采集及保存：所有样本均取自术中切除的新鲜组织标本，癌旁组织距癌肿边缘2 cm以上，肉眼无肿瘤组织。标本切除离体后，采样时选取无组织坏死或出血的部位，以研钵研磨成组织匀浆，每份标本取组织匀浆1 g加生里盐水200 μL，混匀，高速离心机离心（10000转/分）20 min取上清，-20 ℃冰箱保存，待测（避免反复冻融）。③用ELISA法检测组织匀浆OOSM、OSMRS水平。操作步骤：严格按照OSM、OSMR试剂盒说明书操作。

表1 各组中OSM及OSMR浓度比较（pmol/L ，）

表1 各组中OSM及OSMR浓度比较（pmol/L ，）

注：1）与肝癌组比较，P＜0.05；2）与对照组（正常肝脏和肝血管瘤）比较，P＜0.05

分组 例数 OSM OSMR肝癌 30 0.796 ±0.048 1.719±0.084癌旁 30 2.847±0.1361),2) 10.805±0.8731),2)血管瘤 6 1.472±0.3511) 5.356±0.7461)正常肝脏 5 1.560±0.4271) 5.537±0.9781)

表2 肝癌、癌旁组织OSM、OSMR在不同临床资料中表达比较

1.3 统计学分析

计量资料以 表示，数据应用SPSS13.0软件包对试验数据进行处理，组间比较应用单因素方差分析，与临床资料关系用Logistic回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HCC组织中OSM、OSMR分子表达均低于癌旁组织（P＜0.05），与对照组比较明显低于正常肝组织及血管瘤组织(P＜0.05)，见表1。

2.2 癌旁组织中OSM、OSMR分子高表达，与其他组比较有明显差异（P＜0.05），见表1。

2.3 肝癌及癌旁组织中OSM、OSMR表达与年龄、性别、HBsAg阳性、Child分级、肝硬化、AST、ALT、TBIL因素无关(P＞0.05)，见表2。

2.4 肝癌及癌旁组织中OSM、OSMR表达与、AFP、TNM分期肿瘤有无假包膜相关（P＜0.05），见表2。

3 讨 论

OSM是Zarling等[2]1986年首次从PMA活化U937细胞培养中分离纯化时发现的细胞因子，该因子明显抑制A375人黑素瘤细胞生长，因而被命名为抑瘤素-M(oncostatin M，OSM)。进一步的研究发现，它由巨噬细胞和T细胞产生的耐热、耐酸的单链糖蛋白。

OSMR广泛分布于多种肿瘤细胞、内皮细胞和上皮细胞。OSM介导的生物学活性主要是特定受体形成异源二聚体复合物，该复合物激活、活化JAK，使受体分子酪氨酸磷酸化；同时也可激活有丝分裂原激活的蛋白激酶(MA PK)途径，从而通过多种途径发挥转录激活因子的作用。

肿瘤细胞无论在原发部位或继发部位都与周边环境存在着密切的关系，在周边的肿瘤浸润及浸润边缘的反应性炎症，往往通过调控一些细胞因子（抑制性T细胞，抑制性巨噬细胞、NK细胞等)以及在这些细胞因子参与下的信号传递，在肿瘤周边形成一种免疫特定环境（immunological privileged milieu ）[4,5]，这种免疫特定环境在局部限制肿瘤细胞生长，防止远处转移，并诱导淋巴细胞归巢。正是该环境中T细胞、M∮活化，才使局部OSM表达增高，而正常肝细胞和肝血管瘤组织缺乏这种活化的T细胞、M∮，故OSM表达低于癌旁组织。另外HCC的发生、发展是多因素、多基因的过程，有许多癌基因、抑癌基因和细胞因子参与其中，这都可能是OSM、OSMR在HCC、癌旁、血管瘤和正常肝组织表达的可能机制。Znoyko等[3]研究认为，OSM在肝脏被表达在Kupffre cell，而OSMRB则多表达在肝细胞上，而且在肝硬化组织中OSM表达恒定，正常肝脏组织多变；OSMRB正常肝脏组织低表达，肝硬化无表达。Lacreusette A等[6]在对恶性黑色素瘤研究发现OSMR低表达和缺失，这与本实验中OSM、OSMR在HCC癌旁及HCC临床各期的表达是一致的。

本实验结果显示，HCC 组织中OSM、OSMR分子表达均低于癌旁组织（P＜0.05；P＜0.05），与对照组比较明显低于正常肝组织及血管瘤组织(P＜0.05)；癌旁组织中OSM、OSMR分子高表达，与其他组比较有明显差异（P＜0.05）；肝癌及癌旁组织中OSM OSMR 表达与年龄、性别、乙型肝炎表面抗原 HBsAg 阳性、Child 分级肝硬化AST ALT TBIL等因素无关(P＞0.05)；肝癌及癌旁组织中OSM OSMR表达与、AFP、TNM 分期 肿瘤有无假包膜相关（P＜0.05） 本研究发现，OSM表达与假包膜与肿瘤的转移和侵袭有关，转移和侵袭程度越重，OSM表达水平越低。基因甲基化干扰了APC 的表达或功能，导致β-catenin 在细胞内聚集，而该分子在介导上皮细胞黏附中发挥重要作用，另外OSM表达减低，从而其抑瘤活性减弱，这种作用便于HCC 的肝内转移及远处转移。研究还发现，OSM表达和AFP浓度呈负相关，AFP浓度越高，OSM表达水平则越低。Yoshida[7]等认为AFP2L百分比及绝对值与肝癌的分化程度密切相关，这就不难理解OSM、AFP表达情况的关系，但其二者具体相互作用的机制还不清楚。

[1] 吴孟超,张柏和.我国肝脏外科现状和发展前景[J].中华外科杂志,1996,34(9):515-517.

[2] Zarling,J.M.,Shoyab M,Marquardt H,et al. Oncostatin M: A growth regulator produced by differentiated histiocytic lymphoma cells[J].Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1986,83(24):9739-9743.

[3] Vestweber D.Ligand-specificity of the selectins[J].Cell Biochem, 1996,61(4):585-591.

[4] Wang JM,Deng X,Gong W,et al.Chemokines and their role in tumor growth and metastasis[J].J Immunol Methods,1998,220(1):1.

[5] Ma D,Niederkorn JY.Efficacy of tumor-infiltrating lymphocytes in the treatment of hepatic metastases arising from transgenic intraocular tumors in mice[J].Invest Ophthalmol Vis Sci,1995,36(3): 1067.

[6] Lacreusette A.Loss of oncostatin M receptor beta in metastatic melanoma cells[J].Oncogene,2007,26(6):881-892.

[7] Yoshida S,Kurokohchi K,Arima K,et al Clinical significance of lens culinaris agglutinin-reactive fraction of of serum alpha fetoprotein in patients with hepatocellular carcinoma[J].J Oncol,2002, 20(2):305-309.

Expression and Effects of Oncostatin M and Its Receptor in Hepatocellular Carcinoma Tissues and the Relationship between Clinical Data

QIANG Jun-fu
(Department of Genera Surgery, the Pingdingshan Coal General Hospital, Pingdingshan 467000, China)

Objective To resarech the expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues,tissues surrounding hepatoma and the relationship between clinical data, to explore possiblely mechanisms and significance by which they affect hepatocellular carcinoma. Methods ELISA immunohistochemistry and ELISA absorbance method was used to detect the expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma in 30 patients with corroborative HCC thyough pathology , 5 normal liver tissue and 6 cases tissue of Hemangiomas. Routinely testing the level of AFP, AST, ALT, TBIL in patients with preoperative serum, distinguishing different groups by sex, age, Child classification, AFP, HBsAg, liver cirrhosis, TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in 30 cases patients with HCC. Analysised the relationship between clinical data and oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues,tissues surrounding hepatoma by variance analysis and Logistic regression, to resarech expression and effects of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues and the relationship between clinical data. Results ①The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are unrelated with the groups of sex, age, Child classification, HBsAg, liver cirrhosis in patients with HCC(P＞0.05). ②The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are interrelated with the AFP,TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in patients with HCC(P＜0.05). Conclusion ①The expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma is very important to intffer the occurrence and progress of HCC. ②The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are closely interrelated with the AFP,TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in patients with HCC.

HCC; OSM; OSMR; Clinical data; Expression

R735.7

B

1671-8194（2014）20-0084-03