通拉嘎-5对酒精性脂肪肝模型大鼠脂质指标的影响*

乌日图那顺 包纳日斯 兰 英 万 全

（1.北京中医药大学基础医学院，北京 100029；2.内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 010110；3.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007）

通拉嘎-5对酒精性脂肪肝模型大鼠脂质指标的影响*

乌日图那顺1包纳日斯2△兰 英2万 全3

（1.北京中医药大学基础医学院，北京 100029；2.内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 010110；3.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007）

目的 观察蒙药通拉嘎-5对酒精性脂肪肝模型大鼠血清及肝组织中脂质指标的影响。方法 80只Wistar大鼠随机分为空白组和造模组，分别以蒸馏水和高度白酒灌胃8周。造模成功后再随机分为空白组、模型对照组、硫普罗宁组和通拉嘎-5高、中、低剂量组。空白组和模型对照组以羧甲基纤维素钠，硫普罗宁组以硫普罗宁40mg/kg，通拉嘎-5高、中、低剂量组分别以780mg/kg、390mg/kg、195mg/kg通拉嘎-5灌胃4周后处死，腹主动脉采血，取肝组织，检测血清及肝组织中总胆固醇（TC）和三酰甘油（TG）。结果 通拉嘎-5高、中、低剂量组分别与模型对照组比较，血清TC、TG差异均有统计学意义（P＜0.01）；通拉嘎-5高、中剂量组分别与模型对照组比，肝组织中TC、TG差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论 通拉嘎-5可有效地降低酒精性脂肪肝模型大鼠血清和肝组织中的TC和TG，并且通拉嘎-5中剂量为治疗的首选剂量。

蒙药 通拉嘎-5 酒精性脂肪肝 大鼠 脂质指标

依据酒精性脂肪肝发病过程中的临床症状，从蒙医学理论角度可将其分为3个阶段，即初期、中期和晚期，初期属蒙医学“未消毒症”［1］范畴，是因为长期大量服用了含有人体非必需物质酒精而导致胃中毒，出现恶心、呕吐、泛酸、食欲减退，胃部出现烧灼感等“希拉”增盛性症状，而中期和晚期属“通拉嘎未消症”［1］范畴，主要出现非正常性脂肪过盛相关的症状和体征，如腹部肥胖、四肢消瘦、食欲减退、面色灰暗、乏力等。通拉嘎-5［2］（红花、石榴、桂皮、荜茇、白豆蔻）是蒙医学中治疗“通拉嘎未消症”的代表性方药，具有调节胃之消化能、促进精华（通拉嘎）与糟粕（楚布）的分解、祛除“巴达干萨撒利苏”之功效。因此将其选定为自然科学基金课题“蒙医三根调节法及其代表性方剂对酒精性脂肪肝的作用机制研究”当中调节“三根”之一“巴达干”的代表性方药。本实验旨在阐明通拉嘎-5是通过影响酒精性脂肪肝的哪些相关指标而发挥调节“巴达干”之作用，为系统阐明蒙医三根法治疗酒精性脂肪肝的作用机理奠定基础。

1 材料与方法

1.1 动物 健康雄性Wistar大鼠，动物合格证号为SCXK-（军2012-0004）。80只，体质量150～170g。

1.2 仪器和试剂 通拉嘎-5［国家蒙药制剂中心内蒙古国际蒙医医院制剂室提供，批准号：呼卫注字（97）001-104］，硫普罗宁片（山西云中制药有限责任公司生产，国药准字H20093445），胆固醇（TC）和三酰甘油（TG）试剂盒（由上海沪尚生物科技有限公司提供），酶标仪。

1.3 造模和分组 大鼠随机分为两组，空白组15只，以蒸馏水每日0.5mL/100g连续灌胃8周；造模组65只，以56°白酒逐步增加酒精量灌胃，前3d稀释为15％的酒精含量以0.5mL/100g灌胃，再稀释为30％酒精含量灌胃3d，其后增加到45％的酒精含量灌胃8周。8周后空白组和造模组每组随机选取3只鼠处死后取肝脏，制成肝组织病理切片，显微镜下观察，判定是否造模成功。然后将模型组随机分为模型对照组、硫普罗宁组及通拉嘎-5高、中、低剂量组，共5个组，每组10只［3-4］。

1.4 治疗方法 空白组和模型对照组以1％羧甲基纤维素钠溶液每日0.5mL/100g连续灌胃4周；通拉嘎-5高、中、低剂量组分别用780mg/kg、390mg/kg、195mg/kg的通拉嘎-5，以1％羧甲基纤维素钠溶液配制成混悬溶液后每日0.5mL/100g连续灌胃4周；硫普罗宁组用40mg/kg的硫普罗宁片研磨后以1％羧甲基纤维素钠溶液配制成混悬溶液，每日0.5mL/100g连续灌胃4周；与此同时各组继续造模干预。

1.5 标本采集 4周后各组同时禁食不禁水16h，用20％乌拉坦0.5mL/100g腹腔注射麻醉，开腹，腹主动脉采血，3000r/min离心，取血清，-20℃冷藏备用；取肝组织用锡纸包裹，-80℃冷藏备用。

1.6 指标检测 -20℃冰箱内取出血清室温自然融，-80℃冰箱内取出肝组织制成匀浆，然后按试剂盒说明，通过酶标仪检测血清和肝组织中的TC和TG指标。

1.7 统计学处理 应用SPSS17.0统计软件分析。数据以（±s）表示，各组间数据比较采用独立样本t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

各组间血清和肝组织中TC、TG的比较结果见表1。结果显示，模型对照组与空白组各项指标差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。通拉嘎-5高、中、低剂量组分别与模型对照组比较，血清TC、TG差异有统计学意义（P＜0.01）。而通拉嘎-5高、中剂量组分别与模型对照组比较，肝组织中TC、TG差异有统计学意义（P＜0.01）。血清TC和TG在硫普罗宁组、通拉嘎-5高、中、低剂量组间差异无统计学意义（P＞0.05）。肝组织中的TC和TG在通拉嘎-5低剂量组和模型对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）。对于肝组织中的TG指标，通拉嘎-5高、中剂量组间差异有统计学意义（P＜0.01）。

表1 各组大鼠血清及肝组织TC、TG比较（±s）

表1 各组大鼠血清及肝组织TC、TG比较（±s）

与空白组比较，*P＜0.01；与模型对照组比较，△P＜0.01；与通拉嘎-5高剂量组比较，☆P＜0.01。

组别空白组模型对照组肝组织TC、TG（mmol/gprot）TG TC TG 1.58±0.07 9.23±0.65 12.03±0.57 1.92±0.09* 14.24±0.77* 15.22±0.57*硫普罗宁组 1.55±0.08△ 11.30±0.72△ 13.32±0.58△通拉嘎-5高剂量组 1.54±0.08△ 12.34±0.73△ 14.22±0.64△通拉嘎-5中剂量组 1.61±0.09△ 11.69±0.67△ 13.05±0.55△☆通拉嘎-5低剂量组 1.65±0.10△ 13.34±0.73 14.85±0.62 n 血清TC、TG（mmol/L）TC 10 1.82±0.08 10 2.78±0.07*10 2.01±0.08△10 2.01±0.07△10 2.02±0.08△10 2.13±0.08△

3 讨论

酒精性脂肪肝的发病机理之一是脂肪的代谢紊乱［5］。例如酒精进入肝细胞后在乙醇脱氢酶和微粒体乙醇氧化酶的作用下转变为乙醛，再转变为乙酸。这会导致还原性辅酶Ⅰ（NADH）与反应性辅酶Ⅰ（NAD）比值升高，从而抑制线粒体三羧酸循环，使肝内脂肪酸代谢发生障碍，氧化减弱。于是中性脂肪就会堆积于肝细胞中。另外NADH的增多又促进脂肪酸的合成，使脂肪在肝细胞中堆积而发生脂肪变性，最终导致脂肪肝的形成。而TC和TG是最重要的脂质指标，是提示人体脂肪堆积过剩的重要参照指标。因此能否有效地降低血液和肝组织中的TC和TG是某种治疗方法对脂肪肝是否有治疗作用的重要依据。

从本试验结果来看，模型对照组与空白组间血清和肝组织中的TC和TG指标出现了显著性差异。这表明酒精性脂肪肝模型大鼠的血液和肝脏中TC和TG出现了显著升高。而通拉嘎-5高、中、低剂量组分别与模型对照组比，血清TC、TG均有显著性差异。通拉嘎-5高、中剂量组分别与模型对照组比，肝组织中TC、TG有显著性差异。这表明通拉嘎-5对酒精性脂肪肝有显著的降脂作用，并且也证实了中剂量通拉嘎-5为最佳治疗剂量。从蒙医学理论角度看，这恰好也符合通拉嘎-5的功能和主治。通拉嘎-5是治疗“通拉嘎未消症”的代表性方药，具有调节胃之消化能、促进精华（通拉嘎）与糟粕（楚布）的分解、祛除“巴达干萨撒利苏”之功效。而酒精性脂肪肝的一个重要病理变化是肝细胞内堆积了大量的脂肪。脂肪在蒙医学理论中是构成人体的基本要素“七素（包括食物精华、血液、肌肉、脂、骨、骨髓、精）”中的一员，是肌肉之精华。酒精性脂肪肝的蒙医学发病机理是因长期大量饮酒而造成胃之消化功能紊乱，进而导致肝脏内的消化分能也遭到削弱，不能及时对体内的脂肪进行精华与糟粕的分解，不断地堆积而造成了脂肪肝的发生。因此通拉嘎-5的降脂作用可能是治疗酒精性脂肪肝的作用机理之一。

从现代药理学角度来看，通拉嘎-5的组方药材之中含有荜茇，而荜茇的主要有效成份是荜斯茇宁和胡椒碱［8］，有研究发现荜茇宁和胡椒碱均有降脂作用［9-10］。这也从另一方面证实了通拉嘎-5降脂作用的确切性。但对于酒精性脂肪肝而言，通拉嘎-5是否只是单纯地通过降低血液和肝脏中的脂质而发挥作用的呢?还是有其他的协同作用的机制呢？有待进一步研究和阐明。

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［2］杨·阿敏.方剂学［M］.辽宁：辽宁民族出版社，1995：197.

［3］张伟，洪汝涛，田图磊.大鼠酒精性脂肪肝模型的建立［J］.安徽医药，2012，16（7）：885.

［4］罗先钦，徐晓玉，黄崇刚，等.决明子总蒽醌对酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂质过氧化与PPAR-γ表达的影响［J］.中国中药杂志，2012，36（12）：116.

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Effect of Tonglaga-5 on Fat Index in Rats with Alcoholic Fatty Liver

Wuritunashun，Baonarisi，Lanying，et al.
School of Preclinical Medicine，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100029，China

Objective：To observe the effect of Mongolian medicine Tonglaga-5 on the lipid indicators of serum and liver tissue in rats with alcoholic fatty liver.Methods：80 Wistar rats were randomly divided into blank group and model group，and administrated by distilled water and hard liquor in stomach for 8 weeks.After success of modeling，they were randomly divided into blank group，model group，Tiopronin group，Tonglaga-5 low，middle and high dose groups respectively.Blank and model groups were given carboxymethyl cellulose natrium while Tiopronin group were given Tiopronin 40mg/kg.Tonglaga-5 low，middle and high dosage groups were given 1400mg/kg，700mg/kg，350mg/kg of Tonglaga-5 respectively.After 4 weeks intragastric administration，they were put to death.Blood samples were collected from abdominal aorta.Liver tissue was taken，and total cholesterol（TC）and triglyceride（TG）in serum and liver tissue were tested.Results：Compared with model group，TC and TG of serum in Tonglaga-5 low，middle and high dose groups had significant differences（P＜0.01）.Compared with model group，TC and TG of liver tissue in Tonglaga-5 middle and high dose groups had significant differences（P＜0.01）.Conclusion：Tonglaga-5 can effectively reduce TC and TG levels of serum and liver tissue in rat with alcoholic fatty liver，and medium dose is preferred.

Mongolian Medicine；Tonglaga-5；Alcoholic fatty liver；Rats；Fat index

R29

A

1004-745X（2014）10-1779-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.10.003

2014-06-26）

国家自然科学基金资助项目（No.81160549）

△通信作者