饲料微生物检测和血清抗体监测的应用

孔春梅

在畜禽养殖过程中，有的养殖户在饲料管理方面往往只注意饲料的营养价值，而忽视饲料微生物污染；在疫苗免疫上，机械地执行免疫程序，盲目免疫，认为只要打了疫苗就能防病，而忽视抗体监测。其实，饲料微生物污染检测和抗体监测在养殖生产中举足轻重，值得推广和应用。

1饲料中微生物检测

1.1饲料中微生物污染的危害

饲料中富含各种氨基酸、矿物质、维生素等，且比例合理、营养价值全面是培养微生物的良好培养基。饲料在生产、加工、运输、销售、存储等过程中容易受到微生物的污染，发生霉变，而在生产实践中，很多被污染的饲料通常不会有外观、气味的变化，很容易被忽视。被污染的饲料造成饲料的营养价值降低、适口性变差，当被动物食用后，会引起动物发病、机体抗病率下降、生长缓慢，并能将病菌通过粪便、尿等排泄物污染土壤和水源。因此，应控制微生物对饲料的污染， 加强饲料微生物的检测， 确保饲料的安全。

1.2 饲料中病原微生物检测内容

饲料中微生物检测内容包括细菌总数、大肠杆菌群、沙门氏菌、霉菌检测。

饲料中的细菌总数是指试样经过处理，稀释至适当浓度，在一定条件（用特定的培养基，在温度30℃±1℃培养72h±3h等）下培养后，所得1g（mL）试样中所含细菌总数。细菌总数能反映饲料被细菌污染的程度和饲料在生产过程中的卫生管理状况，并可推断饲料是否耐贮存。

饲料中大肠菌群数是指将试样稀释至适当浓度，用乳糖胆盐发酵培养基，36℃±1℃下培养24h±2h，根据确诊试验为大肠菌群阳性的管数，查出每100g（mL） 试样中大肠菌群的最大可能数（MPN）。大肠菌群数量的高低主要用来推测该饲料中存在肠道致病菌污染的可能性。

饲料中沙门氏菌是指根据沙门氏菌的生理特性，选择有利于沙门氏菌增值而大多数细菌受到抑制的培养基，进行选择性增菌、选择性平板分离，以为求检出饲料中的沙门氏菌。饲料安全卫生标准中一般对沙门氏菌都做出“不得检出”的规定，以确保饲料的卫生安全。沙门氏菌对畜禽健康危害极大，会引起畜禽发生伤寒和副伤寒、急性胃肠炎等疾病。

饲料中霉菌是根据霉菌的生理特性，选择适宜于霉菌生长而不适于细菌生长的培养基，采用平皿计数法，测定霉菌数。霉菌是危害饲料安全的主要微生物类群[1]。其在自然环境中容易生长，且很多霉菌毒性极强，严重影响畜禽健康生长；有的霉菌不产生毒素，但即使不产毒素的霉菌生长也会造成饲料营养价值降低、适口性下降。很多养殖业主只有肉眼看见霉变，才认为是霉变，其实有的霉变肉眼不一定能见到。

2血清抗体监测

2.1血清抗体监测的作用

2.1.1评价免疫效果、制定免疫程序

在养殖生产实践中，有些养殖户机械地效仿其它场的免疫程序，盲目免疫，而忽视抗体监测工作。认为只要做了免疫接种工作，就万事大吉。其实，免疫效果受幼畜（禽）母源抗体和成年畜（禽）抗体水平高低、免疫时间、免疫方法、疫苗种类、免疫次数和当地疫病流行情况等因素的影响。良好免疫效果的获得依赖于首次免疫和再次免疫时机是否合适；幼畜（禽）母源抗体水平决定首次免疫的时间；上一次免疫畜禽体内的残留抗体水平决定再次免疫时间。因此，每个养殖场都要以本场所测的实际抗体水平为依据， 确定免疫时间，并结合当地的实际， 制定适合本场的免疫程序。在每次接种疫苗后，抽样检测免疫效果，看免疫是否成功，及时进行补免或重免工作，调整改进免疫程序，达到防疫灭病的目的。

2.1.2辅助诊断动物疫病

抗体监测可作为诊断动物疫病的一个重要依据。其作为诊断时必须与临床症状、病理变化、流行病学等各种资料进行综合分析。

2.2 血清抗体监测方法

目前实验室常用的抗体监测方法主要是血凝-血凝抑制试验（HA- HI）、正向间接血凝试验（IHA）、平板凝集试验和ELISA 等。其中，HA- HI 试验（β- 微量法）最常用。

2.3监测结果分析

在评价监测结果时，根据抗体效价的高低、均匀度、畜禽免疫状况、临床症状、病理变化、流行病学等进行综合分析， 以对各个群体的健康状况、免疫的成功状况， 或是对疾病诊断提供依据。

2.3.1抗体低于保护值

若进行过免疫接种， 则表示免疫不成功或是上次免疫接种的保护期就要过了，应进行补免；若未进行过免疫接种，说明未被野毒感染， 则根据季节、周边流行情况决定是否进行免疫接种及免疫接种的方式。

2.3.2抗体高于保护值（ 属正常范围）

进行过免疫接种， 则表示接种成功且在保护期内， 注意监测， 避免出现空白期； 若未进行过免疫接种， 则表示在过去的一段时间曾出现过野毒感染，提醒是否对其进行淘汰或是补免。

2.3.3抗体水平大大高于保护值

若进行过免疫接种， 看接种的时间与抽样检测时的间隔， 若时间不是很长（ 如7 d至1个月以内），且均匀度高， 临床无任何可见病变， 则可判断是疫苗的免疫性极佳；若注射疫苗的时间较长，且猪群曾出现过可见临床症状， 抗体水平参差不齐，说明曾发生过野毒感染。

2.3.4 整齐度及均匀度

血清中抗体水平的整齐度是评价免疫状况的一个重要指标， 在看其抗体水平的同时， 应关注其均匀度。均匀度高则可根据上述标准来判断， 若均匀度低则应考虑免疫是否失败或是否存在野毒感染。

3小结

3.1现阶段仍有的饲料工厂加工方法简单或缺乏有效的管理，饲料生物安全问题依然存在。这要求养殖户选择质量好信誉好厂家的饲料，把好饲料质量关；在注重饲料营养价值的同时，抽样送检饲料或饲料原料中微生物检测，能有效避免一些由饲料污染引起的疾病。

3.2 养殖场应建立疫苗免疫抗体监测制度，定期或不定期进行抗体监测，检查免疫效果，并为养殖生产制定免疫程序提供依据，反过来也能检验现有免疫程序是否合理，有效避免在防疫活动中盲目性，为安全养殖最大限度地提供保障。

3.3现阶段绝大部分养殖场并不具有兽医化验室，不能开展检测工作。这要求养殖业主具有保健意识，积极主动抽样送检。

（编辑：何芳）