导致马立克疫苗免疫失败的原因分析

田伟 仇铮 姜丽萍 丛秋实

摘 要：鸡马立克氏病是鸡的主要传染病之一，鸡马立克病疫苗的预防接种是控制疾病的主要手段，而在其使用过程中经常出现免疫失败的现象，本文系统的阐述了导致马立克疫苗免疫失败的原因进行分析，为鸡马立克氏疫苗的正确使用提供帮助。

关键词：鸡马立克氏病；雏鸡；免疫失败

鸡马立克氏病（MD）是一种高度接触性传染性肿瘤性疾病，主要以内脏、肌肉、皮肤淋巴瘤的形成和周围神经的淋巴细胞浸润和增生为其病理特征。马立克氏病病毒（MDV）属于B群疱疹病毒，具有很强的细胞结合特性，体内病毒存在于白细胞及肿瘤中，羽毛囊中的成熟病毒是主要传染源。病鸡和隐性感染鸡群可长期带毒并排毒，病毒在羽毛囊上皮细胞可进行复制形成有感染力的完全病毒，其对外界有极强的抵抗力。病毒随脱落的羽毛或皮屑等污染粪便、垫料、尘埃、空气、饲养用具、人员服装、鞋帽等，并可在室温下存活长达6个月。病毒感染方式主要通过经呼吸道感染，与病鸡直接或间接接触的健康鸡群，也能受到感染。马立克氏病病毒不能经蛋传递，种蛋蛋壳表面如沾有携带成熟病毒的羽毛，则可造成传染。

马立克氏病毒最容易感染育雏期的雏鸡，被病毒感染后的雏鸡，要经较长的潜伏期才能表现症状。自然感染的病例，最早发病的时间在3周龄以后，整个育成期及开产后一个时期内都能够发生马立克氏病，但以2～5月龄发病率最高。马立克氏病有多种病型，根据临床症状和病理变化的不同，马立克氏病可分为神经型、眼型、皮肤型、急性内脏型和混合型。

1 马立克疫苗概述

MD分为3个血清型，血清Ⅰ型是致肿瘤的高致病力血清型，血清Ⅱ型为无致病力的自然弱毒，血清Ⅲ型为火鸡疱疹病毒。MDV感染鸡后，既可产生体液免疫，又可产生细胞免疫，但以细胞免疫为主。

火鸡疱疹病毒疫苗可抵抗MDV标准强毒攻击，但对超强毒株攻击的保护率低于70%。主要为Fc126株的低代次种毒制苗，如果过度传代（约70代以后），则失去保护力。

血清Ⅰ型疫苗毒株主要有R2/23（美国超强毒Md11细胞培养致弱株）及来自荷兰自然弱毒株CVI988。因CVI988克隆株效果于HVT相当，现阶段国内主要使用CVI988非克隆株，其效果优于HVT和血清Ⅱ型毒株，CVI988也必须在液氮中保存。

血清Ⅱ型毒株主要用SB- 1株和Z4株病毒制造疫苗。通过接触性传播，能从羽毛囊上皮中排毒。通常与HVT疫苗联合使用抵抗超强毒的感染，这可能对疫苗接种有辅助作用。但值得注意的是，某些品种鸡可以被血清Ⅱ型疫苗激发淋巴细胞白血病的发生（普遍认为MDV能够激活淋巴性白血病病毒在宿主染色体上的前病毒DNA的LTR启动子）。

疫苗免疫是防控马立克氏病的关键措施。当前，用于制造马立克疫苗的病毒主要有3种，分别为人工致弱的MDV1（如CVI988）、MDV2和HVT。现阶段国内多应用Ⅰ型（CVI988/Rispens）、火鸡疱疹病毒（Fc126）与Ⅰ型+Ⅲ型液氮保存疫苗。Ⅰ型鸡马立克氏液氮疫苗（CVI988/Rispens）是一种细胞结合病毒，是将病毒接种于鸡胚成纤维细胞后培养，经过消化，收获离心沉淀细胞。之后，按一定比例混合，加入适量细胞冻存液，最后经程序降温而制成。为保证细胞活性，只能放在-196℃的液氮中保存，出厂的时候必须放置在液氮罐里，使用的时候，要用38度的温水迅速解冻，以保证细胞的存活率。经检测，Ⅰ型鸡马立克氏液氮疫苗具有安全、免疫效力高和无外源病原污染等优点。在疫苗使用过程中，疫苗从液氮中取出过程的时间、融解水温、稀释后放置时间、稀释液温度和pH值等因素的变化均可能对疫苗的效价产生一定程度的影响。

2 导致马立克氏病免疫失败的原因

2.1 鸡群鸡体方面

2.1.1 鸡群的机体素质

鸡群接种疫苗或抗原后产生免疫力的能力不同，这直接和疫苗的接种效果有关，例如许多先天弱雏接种马立克疫苗后并没有产生足够的抗体，并未对鸡群形成有效的保护，当环境中有马立克氏病毒的存在，很容易感染并在相应的日龄发病。

2.1.2 品种因素

MDV易于感染鸡群，但是火鸡、山鸡和鹌鹑等较少感染，每个品种鸡群对马立克氏病毒的易感性均不同，这就导致了易感的鸡群由于有较低的抵抗力而易于发病。

2.1.3 免疫抑制作用

免疫系统是指参与免疫反应的各种细胞、组织和器官，对于禽类的免疫系统主要包括法氏囊、胸腺与淋巴结。以上组分作为机体免疫功能的基本保证，其任何一部分的缺陷都将引起免疫功能障碍，丧失抵抗感染能力，而形成免疫抑制性性疾病。而当鸡群出现了免疫抑制病的存在，T细胞与B细胞等相关的免疫细胞受到抑制作用而失去免疫功能，导致疫苗免疫后不能产生相应的抗体。

2.1.4 母源抗体的干扰

众所周知，母源抗体可对活疫苗免疫产生干扰，同样，母源抗体对同源MD疫苗有干扰作用，能够影响MD疫苗的效果。此外，对于弱毒株，母源抗体有中和作用。

2.2 环境因素

2.2.1 孵化场环境因素

雏鸡出壳后应立即注射MD疫苗，尽早注射MD疫苗，有利于疫苗的表达。孵化场作为雏鸡的第一个生活环境，若孵化场中含有马立克氏病毒，雏鸡出壳后马上就会感染病毒。因此必须做好孵化场的环境消毒与人员消毒。

2.2.2 免疫空白期间感染

1日龄雏鸡接种马立克氏疫苗后，需要1～2周时间才能产生保护作用，而在这1～2周期间视为免疫空白期，一旦环境中有马立克氏病毒的存在，易感鸡群感染疾病的概率相应加大。

2.2.3 饲养环境

良好的饲养环境是控制疾病的必要途径，加强饲养管理等综合措施可以保证鸡群生长发育的正常，并能维持良好的体况，减少疾病发生的概率，减少死淘率。严格生产区和非生产区的消毒制度，严格出入人员的消毒，严格按照免疫程序免疫鸡群，减少应激，提高饲养管理水平等综合措施是有效地防制马立克氏病的重要手段。

2.3 疫苗使用方面

2.3.1 疫苗的选购

目前，在部分地区市面上没有正规批文的疫苗仍在广泛的流行。这些疫苗往往因为价格低廉而受到了很多养殖户的青睐。但这些疫苗往往在抗原种类、含量、佐剂、是否SPF与微生物污染程度等存在严重的质量问题，养殖户使用后常造成应激大、抗体水平整齐度差等而易发病或直接导致发病情况，造成重大经济损失，因此选择合格厂家的疫苗产品尤其重要。

2.3.2 疫苗的保存与运输

鸡马立克冻干疫苗没有按使用说明书中要求温度保存，直接影响免疫效果。鸡马立克液氮疫苗保存不善，液氮罐中液氮不足或保存中液氮罐倾斜，导致液氮水平面处在疫苗以下，在用稀释液稀释疫苗后颜色与正常颜色不符，均会导致免疫的失效。同时，对疫苗的稀释后长时间未用疫苗，运输时间过长，中途周转次数过多，使活毒疫苗抗原失活，使疫苗的效价下降，影响疫苗的免疫效果。

2.3.3 免疫操作不规范

对于液氮疫苗，在应用过程中应严格按照厂家说明使用。从液氮罐中小心取出疫苗安瓿应确保所有安瓿瓶均在液氮面以下。立即放入37℃的温水中解冻，此过程最好在10 s内完成。然后把安瓿放在37℃的温水中轻摇，并应在90 s内使安瓿中疫苗完全解冻。从取出疫苗安瓿至疫苗溶液配制完毕不应超过2 min。配好后立即使用，皮下或肌肉注射，每羽0.2 mL。应在1 h内用完，使用过程中每10～15 min轻摇瓶子一次，保持疫苗溶液混合均匀。

2.3.4 疫苗的免疫效力

CVI988马立克氏病疫苗的蚀斑数要求在2 000（DFU）以上，Fc126株的蚀斑数要求在1 000（DFU）以上。大剂量的疫苗有利于早期建立免疫力。HVT疫苗只能防治马立克氏病发生，却不能阻止MDV感染，也不能阻止马立克氏病病毒的传播和对环境的污染。因而最好是选择由SPF蛋生产的疫苗。

2.3.5 乱加药物

在应用过程中，人们往往在马立克氏病稀释液中加入其它药物，例如抗生素和维生素等，这破坏了稀释液中的pH值而影响马立克氏病苗的活力。

3 总结

目前，该病仍然严重威胁着养禽业的发展，疫苗虽然可以预防马立克氏病的发生，但免疫失败时有发生，常常导致本病的局部暴发。鸡马立克氏病疫苗使用是否正确，直接决定疫苗的使用效果。为此，本文阐述常见的马立克氏疫苗，后在疫苗应用过程中易于造成免疫失败的原因进行了综述。因本病无特效治疗方法，加强对本病的预防工作具有十分重要的意义。

（编辑：狄慧）