中药处方犬粮的安全性评价及其对犬创伤恢复能力的影响

摘要[目的]评价中药处方犬粮的安全性及其对犬创伤恢复能力的影响。[方法]选取1龄中华田园犬8只，随机分为试验组和对照组，每组4只、雌雄各半。预试1周后，对照组饲喂普通犬粮、试验组饲喂中药处方犬粮4周，于试验开始前和结束后测定体重并采血，分析体重和血液指标的变化。对试验犬进行腹壁切开术，观察各组犬创口愈合情况。[结果]中药处方犬粮能极显著提高犬体重和增加犬血液中红细胞、白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数目（P<0.01），显著增加血红蛋白和单核细胞数目（P<0.05）。试验前后，试验组犬碱性磷酸酶含量显著增加（P<0.01），其他血液生化指标变化不显著（P>0.05）。剖腹伤口愈合时间试验组显著短于对照组（P<0.05）。[结论]该处方犬粮可安全用于宠物临床，对创口愈合具有一定的促进作用。

关键词中药处方犬粮；安全性；创伤恢复能力；犬

中图分类号S853.9文献标识码A文章编号0517-6611（2014）21-07095-04

Safety Evaluation of Traditional Chinese Medicine Prescription Dog Food and Its Effect on the Trauma Recovery Ability of Dogs

LI Zhanzhan， DENG Yifeng et al（College of Veterinary Medicine， Nanjing Agricultural University， Nanjing， Jiangsu 210095）

Abstract[Objective] To evaluate the safety of traditional Chinese medicine prescription for dogs and effects on trauma recovery ability. [Method] 8 1years old Chinese rural dog were selected and randomly divided into test group and control group， 4 dogs in each group. The control group was fed with normal dog food， test group was fed with traditional Chinese medicine preparation for dogs for 4 weeks. The change of weight and blood was analyzed. Then trauma recovery ability was recorded. [Result] Traditional Chinese medicine prescription for dogs can significantly（P<0.01） improve weight， erythrocyte， leukocyte， neutrophil， lymphocyte number in blood， obviously increase（P<0.05） hemoglobin， mononuclear cell number. After test， the content of alkaline phosphatase is significantly improved（P<0.01）， the variation of other blood biochemical index is not significant（P>0.05）. Trauma recovery time of test group is significantly shorter than control group（P<005）. [Conclusion] The dog food can be used in pet clinic， which has a promoting effect on wound healing.

Key wordsTraditional Chinese medicine prescription for dogs； Safety； Trauma recovery ability； Dog

19近年來，宠物犬的饲养数量与日俱增，各类宠物食品应运而生，其中各类处方食品在宠物疾病的预防、治疗和恢复中发挥着巨大的作用。目前，宠物临床上有多种处方食品，如尿石症处方食品可有效预防尿石症的发生并促进尿结石的排出；消化道处方食品可减轻消化道疾病的症状，促进机体的恢复；肝脏处方食品可减轻肝脏负担，配合临床治疗可促进疾病的恢复等。鉴于宠物术（大病）后机体食欲不振、气血两亏、抵抗力低下的体况，南京农业大学动物医学院外科教研组研制出一种可以促进宠物尽快恢复的处方食品。该处方食品针对患犬体况，通过选用易消化的原料和添加中药活性物质，以提高患犬食欲、促进消化机能、增强机体免疫力，加速患犬体质恢复。笔者探讨了该处方食品对犬免疫力及病犬恢复效果的影响，旨在为其在市场上的推广应用提供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验动物及其饲养。选用体格健壮、发育良好、体重相近的中华田园犬8只，随机分为试验组和对照组，每组4只，雌雄各半。试验组饲喂中药处方犬粮，对照组饲喂普通犬粮。每天8：00和16：00饲喂2次，饲料不限量，给食以吃饱且食槽无剩余料为原则；保证充足清洁饮水，犬舍清洁，通风良好。

1.1.2试验饲料。试验犬粮为中药处方犬粮（苏州珍妮宠物食品有限公司提供），含有当归、黄芪、苍术等中药提取物及酵母提取物等成分；对照犬粮为市售“好滋味”牛肉味犬粮（上海诺瑞宠物食品有限公司产品）。

1.1.3主要试剂谷丙转移酶（ALT）、谷草转移酶（AST）、谷氨酰基转移酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、血清尿素氮（UREA）、血清肌酐（CREA）等生化测定试剂，购自神舟英诺华公司；肝素钠，由南京农业大学动物医学院提供；舒眠宁，由南京农业大学动物医学院外科教研组自制。

1.1.4主要仪器与设备。生化分析仪（神舟英诺华 D280）、血液分析仪（法国 HORIBA ABX60）、离心机（Anke TDL802B）。

1.2试验方法

1.2.1试验方案。试验犬购买回来后，注射犬瘟热、犬细小病毒二联疫苗。先用普通市售犬粮预饲1周后开始试验。试验开始后，试验组改喂试验犬粮，对照组仍饲喂市售犬粮，每天记录动物临床表现，30 d后试验结束，测定体重及相关血液指标。对所有试验犬进行腹壁切开手术，术后不使用任何药物，比较2组试验犬的伤口愈合情况。

1.2.2血样采集及处理。在试验开始和结束前1 d，早晨空腹前肢头静脉采血5 ml，取0.5 ml血样置于血常规检测专用Eppendorf管内，与抗凝剂混匀后备用；将剩余血液3 000 r/min离心10 min，取血清分别装于Eppendorf管中，-20 ℃下保存备用。

1.2.3腹壁切开术。饲喂试验结束后，1 d内为各组试验犬施行剖腹术，试验犬先肌注阿托品（0.4 mg/kg体重）和846（0.05 ml/kg体重）、10 min后静脉推注舒眠宁（0.05 ml/kg体重），将犬麻醉后，腹底壁广泛剪毛、消毒、隔离后行剖腹术。腹中线切开皮肤5 cm、分离皮下组织，提起腹壁、在腹中线上打开腹壁；彻底止血后进行缝合，7号线结节缝合腹膜和腹中线、4号线结节缝合皮下组织、7号线结节缝合皮肤。术后不使用抗生素，每天观察伤口愈合情况。

1.2.4血液指标和生化指标的测定。将采集的动物血样立即使用自动血球分析仪（HORIBA ABX60）进行血常规测定。将上述血清样品解冻后，分别装样，使用血生化自动分析仪测定谷丙转移酶（ALT）、谷草转移酶（AST）、谷氨酰基转移酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、血清尿素氮（UREA）、血清肌酐（CREA）等生化指标。

1.2.5平均日增重。分别于试验开始和结束时测定各组犬体重，计算平均日增重。

1.2.6剖腹伤口愈合时间。观察上皮爬行及闭合情况。伤口愈合标准：定义为创面完全上皮化所需的时间，而上皮化依靠肉眼观察[1]。

1.3数据统计与分析所有数据使用SPSS 19.0统计软件进行自身配对t检验统计分析，结果均以平均值±标准差表示。

2结果与分析

2.1中药处方犬粮对犬体重的影响由表1可知，试验期间对照组犬平均体重增加0.09 kg，试验前后差异不显著（P>0.05）；试验组犬的平均体重增加0.29 kg，试验前后差异极显著（P<0.01）。

2.4中药处方犬粮对犬剖腹术后恢复时间的影响从图1可以看出，试验组犬手术创口愈合良好，平均在第7天已基本闭合完全；而第7天对照组犬术后创口尚有哆开，创缘有肿胀。试验表明，对照组犬的术后伤口愈合所用时间为（10.50±0.87）d，显著长于试验组犬所用的恢复时间[（7.75±0.49）d]（P<0.05）。

42卷21期李占占等中藥处方犬粮的安全性评价及其对犬创伤恢复能力的影响3讨论与结论

3.1中药处方犬粮对犬体重的影响体重的变化能反映动物肠胃功能的状况，食物的性状和口味在一定程度上影响着动物的食欲和采食量。适口的食物与良好的消化机能在一

注：a.试验组；b.对照组。

图1犬第7天创口愈合情况定范围内可以促进犬体重的提升。

苍术为多年生草本植物，味辛、入脾、胃经，主要治疗湿困脾胃、食欲不振、消化不良[2]。研究表明，苍术能兴奋胃平滑肌，促进胃蠕动，治疗脾虚泄泻和胃溃疡，增加体重，苍术的健脾胃作用一部分是由于苍术口桉叶醇及茅苍术醇能明显抑制K、Ca及氨甲酰胆碱对回肠的收缩作用[3-4]。酵母提取物风味独特，对犬具有较好的诱食性，其中的活性成分可以促进食物消化，提高机体抗病能力。该试验中试验组犬很快接受试验犬粮，这与酵母提取物能改善食物风味有关；试验结束后，试验组犬体重极显著增加（P<0.01），表明苍术促进脾胃功能的作用，这与李伟等在大鼠试验中的结果相一致。

3.2中药处方犬粮对血液CBC的影响当归味甘、辛，性温，归肝、心、脾经，具有补血活血、润肠通便等功效[5]。该试验中试验组犬红细胞数目和血红蛋白含量均显著性提高（P<0.05），可能与试验犬粮中含有当归成分有关。研究表明，当归多糖能促进造血微环境中的巨噬细胞分泌红细胞生成素（EPO）、粒-巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）等多种造血生长因子来促进血细胞的发生；能显著增加内源性脾结节数并促进骨髓有核细胞DNA合成，从而刺激脾脏和骨髓造血功能[6-7]。

机体特异性免疫包括细胞免疫和体液免疫。正常生理情况下，动物血液中的T淋巴细胞数目以及由活化的B淋巴细胞产生的抗体水平是衡量机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标[8]。单核巨噬细胞系统细胞的数量和其吞噬能力能反映出动物机体非特异性免疫功能状态。单俊杰[9]和杨铁虹[10]等报道当归多糖能通过诱导细胞因子L2和IFNγ，增强IFNγ活性，从而能显著促进巨噬细胞、混合淋巴细胞的增殖反应。据报道，黄芪可明显促进T细胞及nk B淋巴细胞的体外增殖，通过诱导ILα，IL1β及IL6m RNA的表达从而减轻氨甲蝶呤对巨噬细胞系增值的抑制作用、诱导脐血单核细胞定向分化为功能成熟的树突状细胞（DCs）来刺激同种异体T细胞增殖[11-13]。该试验中试验组犬的白细胞总数分类数目显著升高（P<0.05），反映出当归和黄芪活性成分的促相关白细胞增殖的作用，这与单俊杰等的研究结果相一致。当归和黄芪共同促进了吞噬细胞和淋巴细胞的增殖，增强了犬的特异性免疫和非特异性免疫，提高了犬的抗感染能力，为创伤后的快速恢复奠定了基础。

3.3中药处方犬粮对犬血液生理生化指标的影响血清中ALP的活性反映动物的生长速度和生产性能。该试验中饲喂中药处方犬粮后试验组犬ALP含量极显著升高，而同时体重也极显著高于试验前（P<0.01），这与朱年华等在猪的试验结果相一致。

血清中AST、ALT和GGT的含量变化是反映肝脏功能状态的重要指标[14-16]。笔者通过对犬血清中AST、ALT和GGT含量的测定来评价试验犬粮对肝功能的影响，结果表明AST、ALT、GGT含量均在正常范围内。据报道，苍术酮能抑制叔丁基过氧化物诱导的DNA损伤及大鼠肝细胞毒性，具有保肝作用[17-18]，这与该研究结果相一致。

肾脏是动物排泄体内代谢产物的主要器官。临床上常用血清UREA和CREA的含量作为检验肾脏功能的指标[19]。该试验结果表明试验组犬UREA和CREA的含量均在正常范围内。研究表明，黄芪成分可通过提高肾组织NO含量及NOS活性，提高SOD活性，清除氧自由基来减少过量氧自由基对肾组织的损害，同时可终止链式的脂质过氧化反应，保护血管内皮细胞结构和功能的完整性，达到改善肾脏血管内皮功能的作用，从而保护肾脏[20]。这与该试验中试验组犬肾功能正常的结果相一致。

3.4中药处方犬粮对犬剖腹术后伤口恢复的影响 创伤愈合主要是以成纤维细胞增殖、迁移、肉芽组织形成、胶原分泌、创口胶原化瘢痕形成及改建为特点的过程。炎症反应是创面愈合的基础，创伤后48 h内白细胞可发挥吞噬作用、氧自由基抗菌效应和补体激活作用，同时组织中的单核细胞活化变成的巨噬细胞活化后能释放 TGF-β、PDGF 以吸引平滑肌细胞和成纤维细胞来到伤口与白细胞一起清除坏死组织和异物，保护正常组织、防止感染。成纤维细胞是伤口愈合的重要修复细胞之一，其增殖速度通常与伤口愈合速度密切相关。

黄芪味甘微温，入脾、肺经，具有补气而托毒生肌、利水消肿、益卫固表等功效，被誉为“疮家圣药”[2]。据报道，黄芪多糖能够直接调节创伤后淋巴细胞的增殖，增强成纤维细胞的增殖及迁移能力，促进血管内皮细胞游走与增殖[21-23]。王刚等[24]发现当归多糖能促进血小板聚集[25]，能通过调节对角质形成细胞的TGFβ及ILlα的表达，影响真皮成纤维细胞Ⅲ型胶原的分泌，从而促进成纤维细胞增殖，促进皮肤创面愈合。

该试验结果表明试验组犬伤口愈合时间显著短于对照组（P<0.05）。究其原因，可能是因为当归成分促使机体聚集血小板、促进伤口凝血闭合，黄芪成分通过提高患犬白细胞数目增强局部炎症反应，促进炎性细胞清创和肉芽的新生，同时与当归活性成分协同刺激成纤维细胞增殖，促进胶原分泌、创口胶原化，但其具体机制有待进一步研究。

笔者首次以直接饲喂中药处方日粮方式代替以前用饲料添加剂拌料饲喂方式，研究了中药活性成分对犬创伤后恢复能力的影响。结果表明，该中药处方犬粮具有较好的适口性，能很好地被犬接受并适应，能够改善犬的肠胃消化功能，从而促进犬的生长，增强犬的体质；犬食用该处方犬粮后不会影响肝肾等脏器功能，同时能够在正常范围内显著提高犬白细胞数目，增强特异性免疫和非特异性免疫；该处方犬粮补血、补气，可促进患病（手术）后犬机体的恢复。另外，犬体质的增强和患病后恢复能力的提高也说明该犬粮提高了犬的身体抵抗力，再次证明该犬粮有提高犬体质抵抗力的作用。此外，关于该中药处方犬粮是否能促进幼犬的发育等，有待进一步探究。

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