HPLC—ELSD法测正心泰胶囊中黄芪甲苷的含量

2014-04-29郑凯郑琰

中国保健营养·中旬刊 2014年4期

郑凯郑琰

【摘要】目的：建立HPLC-ESLD法测定正心泰胶囊中黄芪甲苷含量的方法。方法：采用Aglient C18 色谱柱；漂移管温度：50℃；载气压力：30 PSI 流动相：乙腈-水（32：68）；流速：1.0mL/min，柱温：20℃。结果：黄芪甲苷进样量在0.4169-8.036ug范围内浓度对数与峰面积对数线性关系良好（r=0.9994）；平均回收率（n=6）为101.3%，RSD为1.7% 。结论：本法简捷、准确、重复性好，可作为评价正心泰胶囊中黄芪甲苷的质控方法。

【关键词】蒸发光散射检测器；高效液相色谱；黄芪甲苷；正心泰胶囊

【中图分类号】R286 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）04-1957-02

Conten Determination of Astragaloside IV IN Zhengxintai Capsule by HPLC-ESLD

ZhengKai

（ChaoYang Institute for Food and Drug Control，ChaoYang 122000）

【ABSTRACT】Objective：To establish a method for determination of Astragaloside IV in Zhengxintai CapsuLe by HPLC-ESLD. Methods：A column of Aglient C18 was adopted； drgt temperature：50℃；carrier gas pressrue：30psi； the moile phase was mixture of acetonitrile-water（32：68）at a flow rate of 1.0mL·min-1；column temperture：20℃.Results：The linear range of Astragaloside IV was0.4169-8.036ug（r=0.9994）.The average recovery（n=6）was 101.3%，and RSD was 1.7%. Conclusion：the method is simple，accurate，and can be used for the quantitative analysis of Astragaloside IV in Zhengxintai Capsule.

【KEY WORDS】ELSD；HPLC；Astragalosid IV； Zhengxintai CapsuLe

正心泰胶囊收在于《中国药典》2010年版一部，由黄芪、葛根、丹参、槲寄生、山楂、川穹等六味中药材组成的复方制剂。具有补气活血，化瘀通络，用于气虚血瘀所致的胸痹，症见胸痛、胸闷、心悸、气短、乏力；冠心病心绞痛见上述症候者。药典规定含量测定以葛根素为指标成分，有关黄芪甲苷含量未作规定，本研究为正心泰胶囊中黄芪甲苷含量的测定建立一种简单、快速的检验方法。

1 仪器与试药

Waters E2695型高效液相色谱仪 Waters 2424 ESLD蒸发光检测器；赛多利斯CPA225D电子分析天平（十万分之一）

黄芪甲苷对照品（批号：110781-200612中国药品生物制品检定所）；乙腈（色谱纯，美国天地公司），水为超纯水，其他试剂均为分析纯，正心泰胶囊，见表2

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Agilent C18 （4.6mm×250mm，5um）；蒸发光散射检测器；漂移管温度50℃；载气压力：30 psi；流动相：乙腈-水（32：68）；流速：1.0mL·min-1；柱温：20℃。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液

取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成含0.2mg/ml和0.1mg/ml的溶液。

2.2.2 供试品溶液

取供试品内容物，研细，取约4.0g，精密称定置具塞锥形瓶中，精加甲醇100mL，称重，超声30min，放冷，再称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取50mL，置水浴上蒸干。残渣加水50mL使溶解。用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次50mL，合并正丁醇提取液，用100mL氨试液洗涤1次，再用正丁醇饱和的水100mL洗涤一次，取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，转移5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

2.3干擾实验

为进一步考察试验的合理性，按照处方量制得不含黄芪的阴性对照溶液，依法测定，结果阴性对照溶液在对照品相应的保留时间处无色谱峰，表明阴性对照无干扰，专属性好，见图一。

A、对照品

B C

B、样品 C、阴性对照

图1：正心泰胶囊HPLC色谱图

2.4精密度试验

精密吸取供试品溶液20uL，注入液相色谱仪，重复进样6次，RSD=1.3%（n=6），表明精密度良好。

2.5 重复性试验

对同一批号（批号：130308）样品，依法平行提取6份，测定，结果黄芪甲苷含量平均值为45ug·粒-1，RSD=1.5%（n=6）。

2.6 稳定性试验

精密吸取供试品溶液20uL，分别于配制后0、2、4、8、16、24h注入液相色谱仪，重复进样6次，RSD=1.7%（n=6）。结果表明，供试品溶液在24h内基本稳定。

2.7 线性关系考察

分别精密吸取黄芪甲苷对照品溶液（0.4107mg·mL-1）1、2、5、10、15、20uL，注入液相色谱仪，用外标两点对数方程计算。以对照品进样量（ug）为横坐标，色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程：logY=1.3021logX+6.0803 r=0.9995 结果表明，黄芪甲苷在0.4107-8.024ug范围内浓度对数与峰面积对数线性关系良好。

2.8 回收率试验

精密称取已知含量的样品6份，每份2g，精密量取50mL对照品溶液（0.008214mg·mL-1），加入样品中，再精密量取甲醇50mL加入样品中，依法提取，测定。计算回收率（n=6）。结果平均回收率为101.3%，RSD=1.3%，见表1.表明本法回收率较好，准确度高。

2.9 含量测定

分别精密吸取对照品溶液2、5uL与供试品溶液20uL，注入液相色谱仪，平行测定2次，用外标两点对数方程计算，结果见表2

3 讨论

3.1 提取方法考察

本研究对样品的提取方法进行了考察，分别采用沸水浴上加热回流1h，超声处理1h，超声处理30min。结果显示，3种提取方法结果相差不大（RSD=0.1%），故选择超声处理30min。

3.2 测定目的

黄芪甲苷结构为三萜皂苷，为黄芪中十多种皂苷的主要成分，也是黄芪制剂质量检验的指标成分，通过建立黄芩甲苷测定方法，可以更加有效的控制本产品的内在质量。

参考文献

[1] 张莲珠 HPLC测定黄芪甲苷概况【J】.中成药.2005，27（5）：587-587.

[2] 刘玮锦蔡大可刘亮锋赖平 HPLC测定当归补血片中黄芪甲苷的含量【J】.药物分析杂志.2009.29.第9期.（1553-1555）.