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十四个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量测定

2014-04-26吴文辉耿媛媛胡昌江

亚太传统医药 2014年18期
关键词:淫羊藿苷产地

吴文辉,冯 健,耿媛媛,赵 玲,胡昌江*

(1.成都中医药大学,四川 成都 610075;2.四川新绿色药业科技发展股份有限公司,四川 成都 611930)



十四个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量测定

吴文辉1,2,冯 健2,耿媛媛1,赵 玲1,胡昌江1*

(1.成都中医药大学,四川 成都 610075;2.四川新绿色药业科技发展股份有限公司,四川 成都 611930)

目的:比较14个产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),以Phenomenex C18柱( 250mm×4.6mm, 5μm) 为分析柱,流动相为乙腈-水(30∶70) ,检测波长为270nm,流速为1.00mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:14个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量范围为1.871 6~11.422 2mg/g。结论:14个产地中仅有6个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量符合《中国药典》标准,合格率为42.9%。

淫羊藿;淫羊藿苷;药物含量测定

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimediumpubescens.Maxim.或朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai的干燥叶。其为中医临床常用药,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效,主要用于肾阳虚衰、阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛的治疗[1]。淫羊藿属植物在中国有40余种,广泛分布于除新疆、西藏、内蒙古、河北、山东以外的各个省份,药材主产区种类复杂[2]。中医临床使用过程中发现,在相同用量下,某些产地淫羊藿疗效偏低,而某些产地淫羊藿疗效甚好。故有必要对市面上不同产地的淫羊藿进行对比,为其临床合理用药提供参考依据。

1 仪器与试药

Agilengt 1200 型高效液相色谱仪;Agilengt1200 化学工作站;BP-211D 型电子天平( 德国Satorius ) ;KQ3200B 型超声波清洗器(昆山市仪器有限公司);BJA-500型高速多功能粉碎机(浙江爱雪厨房设备有限公司)。

淫羊藿苷对照品(批号为110737-200415,中国食品药品检定研究院) ;淫羊藿药材购自成都荷花池中药材市场,经成都中医药大学药学院胡昌江教授鉴定为小檗科植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimediumpubescens.Maxim.或朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai的干燥叶。乙腈( 色谱纯,迪马公司),水为乐百氏纯净水,其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性

色谱柱:Phenomenex C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(30∶70) ,检测波长:270nm,流速:1.0mL/min,柱温:30℃。在上述色谱条件下,淫羊藿苷和样品中其他组分色谱峰可基线分离,淫羊藿苷与相邻色谱峰的分离度 R > 1.50,按淫羊藿苷色谱峰计算,理论塔板数( N) >1 500[3-6]。对照品溶液和供试品溶液色谱见图1。

图1 淫羊藿HPLC色谱

2.2 供试品制备

取淫羊藿苷对照品适量,精密称定,置于100mL棕色量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液( 每1mL 含淫羊藿苷对照品0.106 4mg) 。取淫羊藿粉末(过三号筛)约0.2g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇20mL,称定重量,超声处理1h,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm) 滤过,即为供试品[7-10]。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性关系考察 按照上述色谱条件,配置不同浓度的淫羊藿苷对照品溶液,分别为21.28、42.56、63.84、85.12、106.40、127.68μg/mL,分别吸取10μL注入液相色谱仪,测定峰面积。以峰面积值(A)对进样量(C)进行线性回归,得标准曲线方程A=2 287.7X-8.533 3(r=0.999 9) 。结果表明,淫羊藿苷进样量在0. 212 8~1.276 8mg进样量范围内与峰面积积分呈良好的线性关系。

2.3.2 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10μL,重复进样5次,结果表明淫羊藿苷的色谱峰峰面积RSD 为1.63%,表明仪器的精密度良好。

2.3.3 重现性试验 取同一批样品5份,分别按照供试品溶液制备方法制备,取供试品溶液进样10μL,测定峰面积,计算淫羊藿苷含量。结果测得淫羊藿苷含量RSD为1.02%,表明该方法重现性良好。

2.3.4 稳定性试验 取同一供试品溶液,分别于0、2、4、6、8h 进样10μL,测定峰面积,计算淫羊藿苷含量。结果测得淫羊藿苷含量RSD 为1.10%,表明供试品溶液在8h内稳定。

2.3.5 加样回收率试验 取9份已知淫羊藿苷含量的样品(淫羊藿苷含量为5.388 9mg/g),精密称定,分为3组,每组3份,分别添加样品淫羊藿苷含量50%、100%、150%的对照品溶液( 淫羊藿苷为0.112 5mg/mL的乙醇溶液)。按上述方法制备供试品溶液,进样10μL,测定峰面积,计算加样回收率,结果见表1。

表1 淫羊藿苷加样回收实验结果 (n=6)

2.4 样品含量测定

取14个产地淫羊藿样品,按照上述方法制备供试品溶液,分别进样10μL,测定峰面积,每个产地测定平行2次,计算淫羊藿苷平均含量,结果见表2。

表2 淫羊藿14个产地中淫羊藿苷含量

3 讨论

本实验采用HPLC法测定了14个产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量,结果表明该法精密度、重现性、稳定性均较好。《中国药典》2010版淫羊藿含量测定项下规定本品按干燥品计算,含淫羊藿苷(C33H40O15)不得少于0.50%[1]。但结果表明14 个产地中仅有6个产地淫羊藿符合《中国药典》含量测定标准,合格率为42.9%。因此在临床选用中药时,为保证临床效果,应尽量选用道地药材。

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:306.

[2] 裴利宽,郭宝林.近10年淫羊藿药材及饮片研究进展[J].中国中药,2007,32(6):466-471.

[3] 雷永涛,梁妍,郝小燕,等.不同产地淫羊藿中4种活性成分含量的高效液相色谱法测定[J]. 时珍国医国药,2013,24(6):1404-1405.

[4] 于宵,宋静,熊志立,等.一测多评法测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C 及淫羊藿苷的含量[J].中国中药杂志,2010,35(24):3310.

[5] 邓晓君,曹晴,龙秀红.不同品种淫羊藿的淫羊藿苷含量研究[J].广东化工,2014,41(5):65-66.

[6] 李晓龙,刘虹宇.HPLC 同时测定21 种淫羊藿中朝藿定C 和淫羊藿苷的含量[J].药物分析杂志,2011,31(5):931-934.

[7] 李玉山,邬应龙.川产淫羊藿属植物中淫羊藿苷的提取分离工艺研究[J].食品科技,2008,33(11):206-208.

[8] 余晓晖,侯嘉,赵磊,等.甘肃不同产地淫羊藿中总黄酮和淫羊藿苷含量测定[J].甘肃中医学院学报,2014,31(1):13-16.

[9] 朱升,欧海军,赵淑儿,等.高效液相色谱法法测定不同产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量[J].时珍国医国药,2008,9(19):2080-2081.

[10] 唐志华.淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺[J].湖北农业科学,2013,52(22):5567-5569.

(责任编辑:尹晨茹)

Determination of the Icariin in 14 Areas of the Epimedium

Wu Wenhui1,2,Feng Jian2,Geng Yuanyuan1,Zhao Ling1,Hu Changjiang1*

(1.Chengdu University of TCM,Chengdu 610075,China;2.Neo-Green Pharmaceutical Co.Ltd.,Chengdu 611930,China)

Objective:Comparison of the icariin in 14 areas of the Epimedium.Methods:Using high performance liquid chromatography (HPLC), the analytical columnPhenomenex C18column (250mm×4. 6mm, 5μm), mobile phase acetonitrile water (30∶70), the detection wavelength was 270nm; the flow rate was 1.0mL/min; column temperature is 30℃.Results:The content of icariin in 14 varieties of 1.871 6~11.422 2mg/g.Conclusion:Epimedium 14 origin in only 6 different regions with "standard" Chinese Pharmacopoeia 2010 edition content.

Epimedium; Icariin; Area

2014-05-21

国家中医药管理局行业专项(No. 20110700717)

吴文辉(1986-),男,成都中医药大学博士研究生,研究方向为中药炮制与临床。

胡昌江(1952-),男,成都中医药大学教授,博士生导师。E-mail:hhccjj@hotmail.com。

R284.1

A

1673-2197(2014)18-0008-02

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