十四个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量测定

吴文辉，冯 健，耿媛媛，赵 玲，胡昌江*

(1.成都中医药大学，四川 成都 610075；2.四川新绿色药业科技发展股份有限公司，四川 成都 611930)



十四个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量测定

吴文辉1,2，冯 健2，耿媛媛1，赵 玲1，胡昌江1*

(1.成都中医药大学，四川 成都 610075；2.四川新绿色药业科技发展股份有限公司，四川 成都 611930)

目的：比较14个产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)，以Phenomenex C18柱( 250mm×4.6mm, 5μm) 为分析柱，流动相为乙腈-水(30∶70) ，检测波长为270nm，流速为1.00mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。结果：14个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量范围为1.871 6～11.422 2mg/g。结论：14个产地中仅有6个产地淫羊藿中淫羊藿苷含量符合《中国药典》标准，合格率为42.9%。

淫羊藿；淫羊藿苷；药物含量测定

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimediumpubescens.Maxim.或朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai的干燥叶。其为中医临床常用药，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效，主要用于肾阳虚衰、阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛的治疗[1]。淫羊藿属植物在中国有40余种，广泛分布于除新疆、西藏、内蒙古、河北、山东以外的各个省份，药材主产区种类复杂[2]。中医临床使用过程中发现，在相同用量下，某些产地淫羊藿疗效偏低，而某些产地淫羊藿疗效甚好。故有必要对市面上不同产地的淫羊藿进行对比，为其临床合理用药提供参考依据。

1 仪器与试药

Agilengt 1200 型高效液相色谱仪；Agilengt1200 化学工作站；BP-211D 型电子天平( 德国Satorius ) ；KQ3200B 型超声波清洗器(昆山市仪器有限公司)；BJA-500型高速多功能粉碎机(浙江爱雪厨房设备有限公司)。

淫羊藿苷对照品(批号为110737-200415，中国食品药品检定研究院) ；淫羊藿药材购自成都荷花池中药材市场，经成都中医药大学药学院胡昌江教授鉴定为小檗科植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimediumpubescens.Maxim.或朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai的干燥叶。乙腈( 色谱纯，迪马公司)，水为乐百氏纯净水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性

色谱柱：Phenomenex C18柱(250mm×4.6mm,5μm)，流动相：乙腈-水(30∶70) ，检测波长：270nm，流速：1.0mL/min，柱温：30℃。在上述色谱条件下，淫羊藿苷和样品中其他组分色谱峰可基线分离，淫羊藿苷与相邻色谱峰的分离度 R > 1.50，按淫羊藿苷色谱峰计算，理论塔板数( N) >1 500[3-6]。对照品溶液和供试品溶液色谱见图1。

图1 淫羊藿HPLC色谱

2.2 供试品制备

取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，置于100mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液( 每1mL 含淫羊藿苷对照品0.106 4mg) 。取淫羊藿粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，称定重量，超声处理1h，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm) 滤过，即为供试品[7-10]。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性关系考察 按照上述色谱条件，配置不同浓度的淫羊藿苷对照品溶液，分别为21.28、42.56、63.84、85.12、106.40、127.68μg/mL，分别吸取10μL注入液相色谱仪，测定峰面积。以峰面积值(A)对进样量(C)进行线性回归，得标准曲线方程A=2 287.7X-8.533 3(r=0.999 9) 。结果表明，淫羊藿苷进样量在0. 212 8～1.276 8mg进样量范围内与峰面积积分呈良好的线性关系。

2.3.2 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10μL，重复进样5次，结果表明淫羊藿苷的色谱峰峰面积RSD 为1.63%，表明仪器的精密度良好。

2.3.3 重现性试验 取同一批样品5份，分别按照供试品溶液制备方法制备，取供试品溶液进样10μL，测定峰面积，计算淫羊藿苷含量。结果测得淫羊藿苷含量RSD为1.02%，表明该方法重现性良好。

2.3.4 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8h 进样10μL，测定峰面积，计算淫羊藿苷含量。结果测得淫羊藿苷含量RSD 为1.10%，表明供试品溶液在8h内稳定。

2.3.5 加样回收率试验 取9份已知淫羊藿苷含量的样品(淫羊藿苷含量为5.388 9mg/g)，精密称定，分为3组，每组3份，分别添加样品淫羊藿苷含量50%、100%、150%的对照品溶液( 淫羊藿苷为0.112 5mg/mL的乙醇溶液)。按上述方法制备供试品溶液，进样10μL，测定峰面积，计算加样回收率，结果见表1。

表1 淫羊藿苷加样回收实验结果 (n=6)

2.4 样品含量测定

取14个产地淫羊藿样品，按照上述方法制备供试品溶液，分别进样10μL，测定峰面积，每个产地测定平行2次，计算淫羊藿苷平均含量，结果见表2。

表2 淫羊藿14个产地中淫羊藿苷含量

3 讨论

本实验采用HPLC法测定了14个产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量，结果表明该法精密度、重现性、稳定性均较好。《中国药典》2010版淫羊藿含量测定项下规定本品按干燥品计算，含淫羊藿苷(C33H40O15)不得少于0.50%[1]。但结果表明14 个产地中仅有6个产地淫羊藿符合《中国药典》含量测定标准，合格率为42.9%。因此在临床选用中药时，为保证临床效果，应尽量选用道地药材。

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:306.

[2] 裴利宽,郭宝林.近10年淫羊藿药材及饮片研究进展[J].中国中药,2007,32(6):466-471.

[3] 雷永涛,梁妍,郝小燕,等.不同产地淫羊藿中4种活性成分含量的高效液相色谱法测定[J]. 时珍国医国药,2013,24(6):1404-1405.

[4] 于宵,宋静,熊志立,等.一测多评法测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C 及淫羊藿苷的含量[J].中国中药杂志,2010,35(24):3310.

[5] 邓晓君,曹晴,龙秀红.不同品种淫羊藿的淫羊藿苷含量研究[J].广东化工,2014,41(5):65-66.

[6] 李晓龙,刘虹宇.HPLC 同时测定21 种淫羊藿中朝藿定C 和淫羊藿苷的含量[J].药物分析杂志,2011,31(5):931-934.

[7] 李玉山,邬应龙.川产淫羊藿属植物中淫羊藿苷的提取分离工艺研究[J].食品科技,2008,33(11):206-208.

[8] 余晓晖,侯嘉,赵磊,等.甘肃不同产地淫羊藿中总黄酮和淫羊藿苷含量测定[J].甘肃中医学院学报,2014,31(1):13-16.

[9] 朱升,欧海军,赵淑儿,等.高效液相色谱法法测定不同产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量[J].时珍国医国药,2008,9(19):2080-2081.

[10] 唐志华.淫羊藿中淫羊藿苷的提取工艺[J].湖北农业科学,2013,52(22):5567-5569.

(责任编辑：尹晨茹)

Determination of the Icariin in 14 Areas of the Epimedium

Wu Wenhui1,2,Feng Jian2,Geng Yuanyuan1,Zhao Ling1,Hu Changjiang1*

(1.Chengdu University of TCM,Chengdu 610075,China;2.Neo-Green Pharmaceutical Co.Ltd.,Chengdu 611930,China)

Objective:Comparison of the icariin in 14 areas of the Epimedium.Methods:Using high performance liquid chromatography (HPLC), the analytical columnPhenomenex C18column (250mm×4. 6mm, 5μm), mobile phase acetonitrile water (30∶70), the detection wavelength was 270nm; the flow rate was 1.0mL/min; column temperature is 30℃.Results:The content of icariin in 14 varieties of 1.871 6～11.422 2mg/g.Conclusion:Epimedium 14 origin in only 6 different regions with "standard" Chinese Pharmacopoeia 2010 edition content.

Epimedium; Icariin; Area

2014-05-21

国家中医药管理局行业专项(No. 20110700717)

吴文辉(1986-)，男，成都中医药大学博士研究生，研究方向为中药炮制与临床。

胡昌江(1952-)，男，成都中医药大学教授，博士生导师。E-mail：hhccjj@hotmail.com。

R284.1

A

1673-2197(2014)18-0008-02