手足口病患儿EV71、CoxA16及EBV和CMV的检测与临床意义

杜潘艳，乔国昱，赵丽梅，王振荣

(1.河北省唐山市妇幼保健院检验科;2.河北省唐山市协和医院检验科，河北唐山063000)

*通信作者(corresponding author):dpy405@sohu．com

手足口病(hand foot and mouth disease，HFMD)是一种全球性的急性传染病，病原体以肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus，CoxA16)为主。轻者预后良好，重症多合并神经系统疾病。EBV(Epstein-Barr virus，EBV)和巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)是广泛分布的病原体，均属疱疹病毒，儿童免疫功能尚不成熟，容易感染EBV或CMV病原体，也可引发神经系统疾病［1－2］。研究收集了临床确诊的HFMD患儿，分别检测患儿咽拭子EV71、CoxA16以及EBV和CMV病毒核酸。

1 资料与方法

1.1 病例资料:收集2010年6月至2012年10月期间临床确诊的HFMD患儿352例，男198例，女154例，年龄4个月～9岁，平均年龄(2.36±1)岁。根据临床症状分为轻度184例，重度168例。入选病例诊断标准参照卫生部《手足口病诊疗指南》(2008年版)。

1.2 实验材料:试剂盒及阴、阳性质控品(广州中山大学达安基因股份有限公司)。

1.3 标本采集:规范采集患儿急性期咽拭子标本，在装有3～5 mL无菌的0.9%氯化钠注射液采样管中充分搅动，得液态标本。

1.4 病毒检测:使用实时荧光PCR方法检测EV71、CoxA16以及EBV、CMV病毒核酸。按照试剂盒说明书对2.1所得液态标本分别进行EV71和CoxA16 RNA以及EBV和CMV DNA提取、循环条件设置、RT-PCR扩增及结果判定。

1.5 统计学分析:应用SPSS19.0统计软件进行数据处理，采用χ2检验。

2 结果

2.1 肠道病毒EV71、CoxA16检测结果:352例患儿中检出EV71或CoxA16共164例，检出率为46.59%，其中99例EV71感染病例中，重度52例;65例CoxA16中，重度24例。

EV71(－)CoxA16(－)和EV71或CoxA16(+)组间轻度、重度病例分别比较，均无显著性差异;EV71(+)组重度病例显著高于CoxA16组(p＜0.05)。

2.2 EBV、CMV检测结果:352例患儿中检出EBV(+)41例和CMV(+)71例，检出率分别为11.65%和20.17%，其中EBV(+)CMV(+)10例(2.84%)。

2.3 不同组间EBV和CMV检测结果:EV71(－)CoxA16(－)组EBV(+)21例中，重度15例，CMV(+)38例中，重度25例，EBV(+)CMV(+)6例中，重度4例;EV71或Cox-A16(+)组EBV(+)10例中，重度8例，CMV(+)23例中，重度14例，EBV(+)CMV(+)4例中，重度2例。

EV71(－)CoxA16(－)与 EV71或 CoxA16(+)组间EBV、CMV以及 EBV(+)CMV(+)间均无差异;EV71或CoxA16(+)病例重度组中EBV、CMV(+)病例均显著高于轻度组(p＜0.05);而EBV(+)CMV(+)结果在轻度组与重度组间无差异。

3 讨论

HFMD多侵犯学龄前儿童，近年来呈上升趋势。研究中EV71、CoxA16检出率(46.59%)低于有些报道(71.4%)，标本种类、采集时间或方法可能影响检测结果［3］。所以临床表现典型病例EV71或CoxA16检测为阴性的患者不能轻易排除HFMD的诊断。研究结果反映了病例收集期间本地区HFMD病原体以EV71和CoxA16并存流行，EV71较易引发重症病例;其次结果显示HFMD患儿的EV71与CoxA16的检出与患儿病情无直接关系。

EBV和CMV一般为潜伏感染，当机体免疫力低下时被激活，症状临床表现多样，轻重不一，可引起多系统病变。EBV感染还可引发儿童传染性单核细胞增多症、鼻咽癌和Buurkitt淋巴瘤等严重疾病。研究发现HFMD患儿中存在EBV或CMV合并感染，尽管EV71和CoxA16检出情况对EBV和CMV检出无明显影响，但合并EBV或CMV感染对HFMD病情有明显促进作用。提示临床对HFMD病例应及时进行EBV和CMV检测，有利于正确诊断及合理治疗，对手足口病例中合并EBV或CMV感染应予以重视，以免延误病情。研究中EBV合并CMV感染对EV71或CoxA16检出或病情均未见明显影响，有待于今后扩大样本量进一步探讨。

［1］Plosa EJ，Esbenshade JC，Fuller MP，et al．Cytomegalovirus infection［J］．Pediatr Rev，2012，33:156 －163．

［2］贾伟，师志云，赵志军，等．宁夏某医院儿童患者EB病毒感染特点分析［J］．检验医学与临床，2011，8:1954－1955．

［3］李亮，汪华，史智扬，等．江苏省手足口病病原体阳性检出率相关因素及病原学特征［J］．南京医科大学学报(自然科学版)，2010，30:128－133．