阿尔茨海默病患者血清脑源性神经营养因子水平研究

胡卫红 丁宇杰 陆光华 徐韩 李霞 肖世富

阿尔茨海默病患者血清脑源性神经营养因子水平研究

胡卫红 丁宇杰 陆光华 徐韩 李霞 肖世富

目的探讨阿尔茨海默病(AD)与血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平的关系。方法采用酶联免疫吸附法对46例AD患者(研究组)和44例正常对照者(对照组)的外周血清进行BDNF水平检测。所有受试者均进行简易精神状态量表(MMSE)、Hachinski缺血指数(HIS)及汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评定，AD患者用临床痴呆评定量表(CDR)进行痴呆严重程度分级。结果研究组血清BDNF水平低于对照组(P＜0．01)。研究组轻度、中度与重度AD患者血清BDNF水平均低于对照组(P＜0．01)，重度AD血清BDNF水平低于轻度AD(P＜0．05)。研究组血清BDNF水平与年龄、病程呈负相关(P＜0．01)，与MMSE评分呈正相关(P＜0．01)。结论AD患者存在血清BDNF水平降低，且与其年龄、病程及痴呆程度显著相关。

阿尔茨海默病脑源性神经营养因子HAMD

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一种慢性退行性神经变性疾病，以老年斑、神经元纤维缠结及神经元脱失为主要病理特征［1］。脑源性神经营养因子(brain－derived neurotrophic factor，BDNF)是一种作用广泛而有效的神经营养因子，对神经元有保护作用，在神经元的生长、分化、突触可塑性、神经元的存活和修复过程中发挥着重要作用，并可能参与了AD的病理过程［2，3］。有研究显示外周血清BDNF水平与脑皮质BDNF水平呈正相关［4］，因此血清BDNF水平可在一定程度上反映脑中BDNF的变化。然而目前有关AD与血清BDNF的关系尚存在着矛盾的结论。因此，本研究拟以AD患者为对象，进一步探讨AD与血清BDNF水平的关系。

1 对象与方法

1．1 对象研究组为2012年6月～2013年5月上海交通大学医学院附属精神卫生中心住院及门诊就诊的年龄≥60岁的老年患者。符合美国国立神经疾病及交流障碍与卒中研究所－阿尔茨海默病及相关疾病学会(NINCDS－ADRDA)制定的很可能AD(probable AD)诊断标准。简易精神状态量表(MMSE)＜17分(文盲)、20分(小学)、24分(中学以上)，Hachinski缺血指数(HIS)＜4分，汉密尔顿抑郁量表(HAMD)＜7分。共纳入AD患者46例，其中男24例，女22例;年龄62～89岁，平均年龄(75．65±5．04)岁。受教育情况:文盲12例，小学17例，中学以上17例。并根据临床痴呆评定量表(CDR)分值将AD分为轻度15例、中度19例、重度12例。对照组为健康志愿者。MMSE评分28～30分，HIS＜4分，HAMD＜7分。无高血压及神经精神科疾病史，无内分泌疾病及痴呆家族史。收集健康受试者44名，其中男22名，女22名;年龄60～88岁，平均年龄(74．58±5．26)岁。受教育情况:文盲8名，小学16名，中学以上20名。以上所有受试者或家属均知情同意。

1．2 实验方法所有受试者均于上午6时采集空腹静脉血5 ml，室温静置凝集1h，以2500r/min离心10 min，取血清分装于EP管中，置于－20℃冰箱冷冻保存。采用双抗体夹心ABC－ELISA法测定血清BDNF浓度。试剂盒由上海舜田生物科技有限公司提供，一板96孔，灵敏度:最小可测人BDNF达0．6 ng/ml。重复性:板内变异系数＜10%，板间变异系数＜15%。

1．3 统计分析采用SPSS16．0统计软件进行数据处理。两组间均数比较采用独立样本t检验;多组间均数比较采用方差分析;相关性分析应用Pearson相关分析。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 两组血清BDNF水平比较研究组血清BDNF水平为(17．34±3．15)ng/ml，对照组为(22．15± 5．63)ng/ml，研究组血清BDNF水平低于对照组(t= 4．857，P＜0．01)。

2．2 不同严重程度AD患者与对照组血清BDNF水平比较研究组轻度AD患者血清BDNF水平为(19．03±2．41)ng/ml，中度AD患者为(17．14± 2．05)ng/ml，重度AD患者为(15．26±3．17)ng/ml;对照组为(22．15±5．63)ng/ml。方差分析显示:4组血清BDNF水平比较有显著性差异(F=6．835，P＜0．01);采用SNK法进一步多重分析显示:轻度、中度与重度AD患者血清BDNF水平均低于对照组(P＜0．01);重度AD血清BDNF水平低于轻度AD(P＜0．05)，而轻度与中度以及中度与重度AD之间比较无显著性差异(P＞0．05)。

2．3 血清BDNF水平与AD患者年龄、病程及MMSE得分Pearson相关分析患者年龄(r=－0．568，P= 0．001)、病程(r=－0．374，P=0．004)与血清BDNF水平呈显著负相关，而MMSE评分与患者血清BDNF水平呈显著正相关(r=0．285，P=0．007)。

3 讨论

BDNF是德国神经生物学家Barde等于1982年首次从猪脑中纯化，发现具有防止神经元死亡功能的一种碱性蛋白质［2］，而AD是一种慢性进行性神经变性疾病，因此，BDNF与AD的关系近年来备受关注。一些研究显示Aβ可以下调BDNF表达，损害其在轴突内的运输［5］。Aβ还可以损害BDNF诱导的有关基因表达［6］。而给予外源性BDNF可以逆转Aβ所致的神经变性改变，如突触密度降低、突触营养不良、神经细胞固缩和海马萎缩［7］。因此，Aβ沉积可能是导致AD患者脑内BDNF降低的重要因素，而BDNF则是重要的神经保护因子。

在外周血清的研究中，也有较多的研究显示AD患者存在BDNF水平的降低［8～10］。Lee GJ等［11］的研究还显示AD患者不但存在血清BDNF水平的下降，且还与MMSE评分密切相关。Pláteník J等［12］报道血清BDNF水平下降主要与中重度AD相关。但也有不一致报道。O’Bryant SE等［13］的研究显示血清BDNF水平在AD和健康对照组无显著差异。Nagata T等［14］也报道AD患者血清BDNF水平与痴呆程度无显著相关性，只是与攻击行为密切相关。还有研究显示AD患者存在血清BDNF水平增高［15］。因此，外周血清BDNF水平与AD的关系目前尚不能作出肯定的结论。

本研究通过对46例AD患者与44例正常对照者血清BDNF水平的研究显示，AD患者存在血清BDNF水平的显著降低，且与痴呆严重程度呈正相关，而与年龄、病程呈负相关。这与有关报道基本一致［11，16］。但本研究也存在不足，样本偏小，为横断面研究，因此，尚须前瞻性、大样本的研究来进一步证实。

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Serum brain-derived neurotrophic factor levels in Alzheimer’s disease．

HU Weihong，DING Yujie，LU Guanghua，et al．Department of Geriatrics，Shanghai Mental Health Center，Medical School of Shanghai Jiaotong University，Shanghai 201108，China

ObjectiveTo explore the correlation between level of serum brain－derived neurotrophic factor(BDNF)and Alzheimer’s disease(AD)．MethodsSerum level of BDNF were measured in 46 patients with AD(study gorup)and 44 healthy controls(control group)by enzyme－linked immunosorbant assay．All subjects were assessed with Mini Mental State Examination(MMSE)，Hachinski Ischemic Score(HIS)and Hamilton Depression Scale(HAMD)．The severity of AD was evaluated according to Clinical Dementia Rating Scale(CDR)．ResultsSerum level of BDNF were significantly lower in AD patients than that in control group(P＜0．01)．Serum BDNF level in patients with mild AD，moderate AD and severe AD were all significantly lower than that in control group(P＜0．01)．Serum BDNF level in patients with severe AD was significantly lower than that in mild AD(P＜0．05)．Serum BDNF level in study group was significantly negatively correlated with age and duration(P＜0．01)，and was significantly positively correlated with score of MMSE(P＜0．01)．ConclusionsSerum level of BDNF is low in patients with AD and is correlated with age，duration and the severity of AD．

Alzheimer’s diseaseBrain－derived neurotrophic factorHAMD

R742

A

1009－7201(2014)－06－0424－03

10．3969/j．issn．1009－7201．2014．06．007

2014－08－01)

201108，上海交通大学医学院附属精神卫生中心

丁宇杰，E－mail:xiaojie－d@163．com