氟硅唑与代森锰锌混配对梨黑星病菌的联合毒力及田间防效

赵建江， 张小风， 王文桥， 马志强， 韩秀英

（河北省农林科学院植物保护研究所，河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心，农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室，保定 071000）

氟硅唑与代森锰锌混配对梨黑星病菌的联合毒力及田间防效

赵建江， 张小风， 王文桥， 马志强， 韩秀英*

（河北省农林科学院植物保护研究所，河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心，农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室，保定 071000）

摘要为了明确氟硅唑与代森锰锌混配对梨黑星病菌的联合毒力，采用菌丝生长速率法测定了氟硅唑、代森锰锌及其不同配比对梨黑星病菌的毒力，以Wadley公式进行评价，并通过田间试验验证其对梨黑星病的防治效果。结果表明：氟硅唑与代森锰锌质量比为1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40进行复配对菌丝生长均表现为增效，其中1∶25增效作用最明显，增效系数为2.68；在田间药效试验中，40%氟硅唑乳油与80%代森锰锌可湿性粉剂，以质量比1∶25进行桶混，750～1 200倍稀释对梨黑星病的防治效果均在85%以上，与其单剂40%氟硅唑乳油8 000倍和对照药剂10%苯醚甲环唑水分散粒剂7 000倍对梨黑星病的防治效果相当，但显著高于其单剂80%代森锰锌可湿性粉剂700倍的防治效果。氟硅唑与代森锰锌以1∶25进行桶混，可以在田间推广使用。

关键词氟硅唑； 代森锰锌； 梨黑星病菌； 增效作用； 田间防效

梨黑星病（Venturia nashicola Tanaka et Yamamoto）是我国梨区普遍发生的重要病害。从落花到梨果采收期间均可发病，如防治不当，将会严重影响梨的品质和产量［1］。目前，通过遗传改良和培育抗病品种增强梨树对黑星病的抗性已取得一定进展［2-3］，但在生产实际中，仍以化学防治为主。

氟硅唑是一种高效、广谱的麦角甾醇生物合成抑制剂（EBIs），对梨黑星病具有良好的防治效果，现已成为防治该病害的主要药剂。研究发现，河北辛集和曲阳的梨黑星病菌对氟硅唑的敏感性显著低于泊头和赵县［4］。农药的合理复配，不但可以延缓病菌抗药性的产生，提高防效，而且可以扩大杀菌谱，降低用药成本［5-6］。如代森锰锌与霜脲氰7∶1（质量比）的混合物对防治马铃薯晚疫病具有增效作用［7］。代森锰锌是一种广谱性多作用位点的保护性杀菌剂，病菌对此药剂不容易产生抗性，可以和多种内吸性药剂混配使用［8］。为了明确氟硅唑与代森锰锌复配对梨黑星病菌是否具有增效作用，笔者进行了氟硅唑与代森锰锌混合物对梨黑星病菌联合毒力的测定，并进行了该混合物对梨黑星病的田间药效评价。

1 材料与方法

1.1 供试培养基及菌株

马铃薯梨块培养基（PDA＋L′）：马铃薯200 g，鸭梨150 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蒸馏水1 000 m L，p H 6.0～6.2。

梨黑星病菌（Venturia nashicola）采自河北省辛集市垒头镇北小陈村，采用单孢分离法进行分离和纯化，分离纯化后将菌株转接到“PDA＋L′”平板上［9］，于20℃保存备用。

1.2 供试药剂

95.51%氟硅唑（flusilazole）原药，天津久日化工有限公司提供；96%代森锰锌（mancozeb）原药，利民化工股份有限公司提供；40%氟硅唑乳油（flusilazole 400 EC）美国杜邦公司提供；80%代森锰锌可湿性粉剂（mancozeb 800 WP）利民化工股份有限公司提供；10%苯醚甲环唑水分散粒剂（difenoconazole 100 WG），瑞士先正达作物保护有限公司提供。

1.3 室内毒力测定方法

采用菌丝生长速率法［10］测定供试药剂对梨黑星病菌的抑制作用。分别用适量丙酮将氟硅唑和代森锰锌原药溶解，然后配制成质量浓度为1 000μg／mL的母液，并按氟硅唑和代森锰锌的不同质量比例（1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40）混合，得到不同配比混合液，用无菌水进行系列稀释，按药液与培养基1∶9的体积比配制成最终含药量为10、5、1、0.5、0.1μg／mL的含药平板。单剂氟硅唑和代森锰锌含药平板的含药量分别为10、5、1、0.5、0.1、0.05μg／mL和20、10、5、1、0.5μg／mL。同时设丙酮和清水对照。用直径5 mm的打孔器在预培养60 d的菌落边缘打取菌饼，正面朝下接种到含药平板上，每处理重复3次，置于20℃培养箱中，黑暗培养60 d后，采用十字交叉法测量各处理的菌落直径。计算各处理浓度的抑制率，采用DPS软件，求出氟硅唑、代森锰锌及其混合物的毒力回归方程，EC50值和相关系数。试验重复2次。采用Wadley法［6］进行联合毒力评价。

EC50（th）＝（a＋b）／［a／EC（A）50＋b／EC（B）50］

增效系数（SR）＝EC50（th）／EC50（ob）

式中A、B分别代表两种药剂在混剂中所占比例，ob为实际观察值，th为理论值。SR＞1.5为增效作用；SR＝0.5～1.5为相加作用；SR＜0.5为拮抗作用。

抑制率（%）＝［（对照菌落增长直径－处理菌落增长直径）／对照菌落增长直径］×100。

1.4 田间药效试验

田间试验分别于2011年和2012年在河北省辛集市垒头镇北小陈村同一梨园进行。梨树品种为‘鸭梨’，树龄20年，株行距为3 m×6 m，梨园土壤肥力中等，梨树长势及管理水平一致，黑星病历年发生。试验设：40%氟硅唑乳油8 000倍、80%代森锰锌可湿性粉剂700倍、10%苯醚甲环唑水分散粒剂7 000倍、78.46%氟硅唑与代森锰锌的混合物（质量比1∶25）750、1 000、1 200倍和空白对照共计7个处理。每处理4次重复，共28个小区，小区随机区组排列，每小区2株梨树。采用泰山－18型机动高压喷雾器均匀喷施，至流失为止，株施药液10 L左右。梨树落花后、病害发生前用第一次药，以后根据病情发展和气候条件用药。2011年用药时间为：4月30日、5月15日、6月3日、7月4日、7月23日、8月3日和8月23日；2012年用药时间为：5月2日、5月18日、6月5日、7月2日、7月19日、8月10日和8月29日。

施药前的病情指数为零，最后一次用药后14 d调查病情。每小区调查2株，分东、南、西、北、中方向5点取样，每点取当年生枝条的40片叶，按病叶上病斑面积占整个叶片面积的百分率分级［11］，计算病叶率、病情指数及防治效果。数据采用Fisher’s LSD法进行差异显著性分析。

病叶率（%）＝（病叶数／调查总叶片数）×100；

病情指数＝［∑（病叶数×相对级数）／（调查总叶片数×最高级数）］×100。

2 结果与分析

2.1 氟硅唑与代森锰锌混合物对梨黑星病菌菌丝生长的抑制作用

从表1可知，氟硅唑与代森锰锌按质量比1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40进行混配对梨黑星病菌的菌丝生长均表现出良好的抑制作用，5个配比对梨黑星病菌的菌丝生长均表现出增效作用，当氟硅唑与代森锰锌以1∶25进行复配时，增效作用最明显，增效系数为2.68。

表1 氟硅唑与代森锰锌混合物对梨黑星病菌菌丝生长的抑制作用1）Table 1 Inhibitory action of flusilazole-mancozeb mixtures against mycelial growth of Venturia nashicola

2.2 田间防治效果

从表2可知，2011年和2012年得到了相似的试验结果。40%氟硅唑乳油与80%代森锰锌可湿性粉剂，以有效成分质量比1∶25进行复配，对梨黑星病表现出良好的防治效果。该混合物750、1 000和1 200倍稀释，对梨黑星病的防效均在85%以上，与其单剂40%氟硅唑乳油8 000倍和对照药剂10%苯醚甲环唑水分散粒剂7 000倍对梨黑星病的防治效果相当，但显著高于单剂80%代森锰锌可湿性粉剂700倍的防治效果。

表2 不同药剂对梨黑星病的防治效果1）Table 2 Control efficacy of different fungicides on pear scab

3 结论与讨论

本研究表明，氟硅唑与代森锰锌以质量比1∶25混配后对梨黑星病菌的菌丝生长表现出良好的增效作用。该混合物750～1 200倍稀释对梨黑星病的田间防治效果与三唑类杀菌剂40%氟硅唑乳油8 000倍和10%苯醚甲环唑水分散粒剂7 000倍的防效相当，优于保护剂80%代森锰锌可湿性粉剂700倍的防效。因此，氟硅唑与代森锰锌以1∶25进行混配可以在田间推广使用。

氟硅唑因其杀菌谱广、防治效果显著等优点而被广泛用于真菌病害的防治。但由于该药剂的长期单一使用，致使病原菌对其产生了抗药性。Kunz等［12］早在1997年就曾报道苹果黑星病菌对氟硅唑产生了较强的抗药性，其田间防效显著降低。本研究结果表明，氟硅唑与代森锰锌以质量比1∶25混配750倍稀释时，对梨黑星病的防效高达95%，与其单剂40%氟硅唑乳油8 000倍的防效相当，但混剂中40%氟硅唑乳油的稀释倍数为10 125倍，明显高于其单用时的稀释倍数。因此，氟硅唑与代森锰锌以1∶25混配使用，可以有效地降低氟硅唑的使用剂量，从而降低氟硅唑对病原菌的药剂选择压，进而延缓梨黑星病菌对氟硅唑抗药性的产生。

氟硅唑属于麦角甾醇合成抑制剂类杀菌剂，它是通过抑制C-14α-脱甲基化酶的活性，从而阻碍麦角甾醇的合成，进而导致病原菌的细胞膜结构破坏和细胞死亡［13］。代森锰锌是乙撑二硫代氨基甲酸盐类杀菌剂，是一种典型的多作用位点的保护性杀菌剂，它主要是通过抑制病原菌体内丙酮酸的氧化，从而抑制病原菌的呼吸。这两种作用机理截然不同的杀菌剂混配后增效作用明显，但是其增效机理还有待于进一步研究。

参考文献

［1］ 孙爱芹，胡江川.梨黑星病的发生与防治［J］.安徽农业科学，2010，38（1）：76-77，133.

［2］ 王家珍.晚熟耐贮梨新品种-新苹梨选育［J］.果树学报，2004，21（4）：391-392.

［3］ 刘遵春，廖明安，包东娥.金花梨变异单系对梨黑星病的抗性研究［J］.西北林学院学报，2006，21（2）：108-109.

［4］ 齐永志，张小风，赵卫松，等.梨黑星病菌对氟硅唑的敏感性及与不同杀菌剂之间的交互抗性［J］.农药学学报，2012，14（2）：165-169.

［5］ 朱卫刚，胡伟群，陈定花，等.丙环唑和苯醚甲环唑复配对水稻纹枯病的联合毒力［J］.农药，2008，47（5）：365-366.

［6］ 范子耀，王文桥，孟润杰，等.吡唑醚菌酯与苯醚甲环唑混合物对茄链格孢的联合毒力及其对马铃薯产量的影响［J］.农药学学报，2011，13（6）：591-596.

［7］ 王文桥，马志强，韩秀英，等.霜脲氰和代森锰锌对马铃薯晚疫病菌的离体活性及混合增效作用［J］.农药学学报，2002，4（1）：28-33.

［8］ 王美琴，刘慧平，韩巨才，等.番茄叶霉病菌对多菌灵、乙霉威及代森锰锌抗性检测［J］.农药学学报，2003，5（4）：30-36.

［9］ 钮绪燕，李丽青，赵华，等.梨黑星病菌的分离培养和基质研究［J］.西北农林科技大学学报（自然科学版），2003，31（5）：80-82.

［10］孙广宇，宗兆峰，王建明，等.植物病理学实验技术［M］.北京：中国农业出版社，2002：139-146.

［11］赵晓军，周建波，李霞，等.不同药剂对山西梨区梨树黑星病的田间防效比较［J］.山西农业科学，2008，36（7）：71-73.

［12］Kunz S，Deising H，Mendgen K.Acquisition of resistance to sterol demethylation inhibitors by populations of Venturia inaequalis［J］.Phytopathology，1997，87（12）：1272-1278.

［13］叶滔，马志强，毕秋艳，等.植物病原真菌对甾醇生物合成抑制剂类（SBIs）杀菌剂的抗药性研究进展［J］.农药学学报，2012，14（1）：1-16.

中图分类号：S 482.2

文献标识码：B

DOI：10.3969／j.issn.0529-1542.2014.03.038

收稿日期：2013-05-28

修订日期：2013-07-22

基金项目：公益性行业（农业）科研专项（200903033）

*通信作者E-mail：hanxiuying＠163.com

Joint-toxicity and field efficacy of mixtures of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola

Zhao Jianjiang， Zhang Xiaofeng， Wang Wenqiao， Ma Zhiqiang， Han Xiuying
（Plant Protection Institute，Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences，IPM Center of Hebei Province，Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Northern Region of North China，Ministry of Agriculture，P.R.China，Baoding 071000，China）

AbstractIn order to clarify the synergistic interaction of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola，the toxicity of flusilazole，mancozeb and their mixtures at different ratios against V.nashicola was determined by mycelial growth rate test，the joint-toxicity of the two fungicides was assessed with Wadley formula，and the efficacy on controlling pear scab was assessed by field trials.The results showed that the mixtures of 1∶20，1∶25，1∶30，1∶35 and 1∶40 exhibited synergistic interaction on the mycelial growth.The synergistic effects of the 1∶25 mixture was the most obvious with synergistic ratio of 2.68.The field trials demonstrated that the mixture 750－1 200 times of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）exhibited good control effect，with efficacy of over 85%，equal to that of flusilazole 400 EC 8 000 times and difenoconazole 100 WG 7 000 times，respectively，significantly higher than that of mancozeb 700 WP.The mixture of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）can be widely applied in the fields.

Key wordsflusilazole； mancozeb； Venturia nashicola； synergistic interaction； field efficacy