FQ-PCR、TRFIA方法检测乙肝标志物的临床价值

张菊萍，王 珍

(青海省交通医院，西宁810000)

病毒性乙型肝炎(乙肝)是由乙肝病毒(HBV)感染引起的传染性疾病，近年研究显示，全球约20亿人群感染HBV，其中约4亿人为慢性HBV携带者［1］。目前，临床常用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、荧光定量聚合酶链(FQ-PCR)等方法检测HBV的感染情况［2］。2007年3月～2012年3月，我院采用FQ-PCR、TRFIA方法检测1 200例疑似乙肝患者的乙肝标志物，明显提高了其检测结果的准确性。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择同期在我院门诊就诊的疑似乙肝患者1 200例，男711例、女489例，年龄12～80岁。

1.2 方法

1.2.1 乙肝标志物检测 采用TRFIA方法检测患者的 HBV血清学标志物(HBV-M)，包括 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。 PerkinElmer Wallac 6000 DELFIA Xpress全自动时间分辨荧光免疫分析仪由广州匹依公司提供，根据说明书进行操作。

1.2.2 HBV-DNA检测 采用FQ-PCR方法检测患者的HBV-DNA含量，TL988-Ⅳ四通道实时荧光定量PCR仪由西安天隆公司提供，根据说明书进行操作，并按其要求将阳性定量质控标准品进行稀释和处理。HBV-DNA含量＞1×102IU/mL为阳性。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件，计数资料用百分比表示，比较用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV-M阳性率 根据TRFIA检测结果，将疑似乙肝患者的 HBV-M分为8组，即 HBsAg(+)、HBeAg(+)、HbcAb(+)，HBsAg(+)、HBeAb(+)、HbcAb(+)，HBsAb(+)、HBcAb(+)、HBeAb(+)，HBsAg(+)、HBcAb(+)，HBeAb(+)、HBcAb(+)，HBcAb(+)，HBsAb(+)，全阴性。本文前7组阳性者723 例(占 60.25%)，分别为 298(24.83%)、202(16.83%)、6(0.51%)、98(8.17%)、69(5.75%)、46(3.83%)、4 例(0.33%);阴性477 例(占39.75%)。

2.2 HBV-DNA阳性率 根据FQ-PCR检测结果，将患者的HBV-DNA含量分为3级，即＜1×102IU/mL、1×102～1×107IU/mL、＞1×107IU/mL。本文 HBVDNA含量 ＜1×102IU/mL者222例(18.50%)，1×102～1×107IU/mL者 839例(69.92%)，＞1×107IU/mL者 139例(11.58%)，HBV-DNA 阳性率为81.50%。

2.3 FQ-PCR、TRFIA检测的阳性率 本文FQ-PCR检测HBV-DNA含量阴性222例(18.50%)，阳性978例(81.50%);TRFIA 检测阴性477 例(39.75%)，阳性723例(60.25%)。FQ-PCR阳性检出率明显高于TRFIA(χ2=131.25，P ＜0.01)。

3 讨论

HBV因具有抵抗力强、嗜肝性、变异性、致癌性等特征，对乙肝患者身体健康造成不良影响［3］。FQ-PCR是检测核酸水平的有效办法，其原理为对检测所需的核苷酸片段进行扩增，利用掺入其中作为复制原材料的荧光放射物进行观察，检测受检者体内的HBV-DNA含量［4～6］，该方法具有操作简便、灵敏度高等优势，可对乙肝患者体内的HBV-DNA含量进行准确判断［7，8］。本研究行 FQ-PCR检测者的HBV-DNA阳性率为81.5%，准确率较高。TRFIA是近年来新发展的特殊荧光分析方法，其检测HBV-M的灵敏度极高［9］。该方法是利用放射荧光波长的特异性对检测物质进行高灵敏的反映，避免了普通杂色光对其精确度的影响［10］，因其对微量、超微量目标物质检测具有灵敏度高、准确度高等优势，故在HBV-M检测中可测出极微小的差异，提高其检测的准确性［11，12］。本研究行 TRFIA 检测者的HBV-M阳性率为60.25%。研究显示，对行TRFIA方法无法准确检测出血清HBV-DNA低滴度者，采用FQ-PCR方法可在一定程度上对其进行补充［13］。TRFIA方法可避免FQ-PCR方法对HBV-M检测的不敏感［14］。两种方法各有优势，二者联合检测可对HBV感染患者作出诊断，提高判断乙肝患者HBVM、病情诊断及恢复情况的准确性［15］。

综上所述，临床上采用FQ-PCR方法检测乙肝患者的阳性检出率明显高于TRFIA方法，二者联合检测可提高其准确性，有利于病情的判断和诊治。

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