K-ras基因突变对非小细胞肺癌患者预后的影响

刘晖群 刘敏知 熊林楷

NSCLC是目前临床上最常见的肺癌类型。诸多研究表明，分子生物学因素如癌基因、抑癌基因、肿瘤细胞脱氧核糖核酸含量、肿瘤粘附分子、肿瘤血管生成等对NSCLC的生物学行为均可以产生巨大的影响，从而决定着NSCLC的形态特征、生长方式、恶性程度、转移、复发等，并进一步影响着患者的预后[1-3]。本研究旨在探讨K-ras基因突变对NSCLC患者预后的影响，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集2006年3月-2008年7月江西省肿瘤医院收治的92例患者，所有患者均经病理检查确诊为NSCLC，且临床资料完整，相关检查得到完善。排除随访丢失的患者以及采用其他方案治疗的患者。根据患者是否发生K-ras基因突变将上述患者分为K-ras基因突变阳性组、K-ras基因突变阴性组。K-ras基因突变阳性组患者11例，包括男性9例，女性2例；年龄54～73岁，平均(61.7±7.8)岁；病理分型包括腺癌10例，鳞癌1例；临床分期Ⅱ期3例，Ⅲa期1例，Ⅲb期5例，Ⅳ期2例；有吸烟史患者7例，从未有过吸烟史患者4例。K-ras基因突变阴性组患者81例，包括男性52例，女性29例；年龄50～72岁，平均(59.7±8.0)岁；病理分型包括腺癌69例，鳞癌7例，其他类型5例；临床分期Ⅱ期22例，Ⅲa期8例，Ⅲb期37例，Ⅳ期14例；有吸烟史患者69例，从未有过吸烟史患者12例。K-ras基因突变阳性组与K-ras基因突变阴性组之间的患者性别、年龄、病理类型、临床分期、吸烟史相比，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 研究方法

1.2.1 治疗方案 严格按照美国国立综合癌症网络(NCCN)提供的NSCLC治疗指南给予研究对象综合治疗。11例K-ras基因突变阳性组患者，4例采用以手术为主的综合治疗，7例采用以化疗为主的综合治疗；在化疗方面，培美曲塞联合铂类(PP方案)治疗10例，吉西他滨联合铂类(GP方案)治疗1例，化疗周期2～6个，平均(4.5±0.9)个。81例K-ras基因突变阴性组患者，30例患者采用以手术为主的综合治疗，51例患者采用以化疗为主的综合治疗；在化疗方面，PP方案治疗74例，GP方案治疗7例；化疗周期2～6个，平均(4.3±1.0)个。2组患者治疗方案、化疗方案、化疗周期数相比，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2.2 K-ras基因突变检测 采用蝎形探针扩增阻滞突变系统(ARMS法)对研究对象组织学标本行K-ras基因突变检测，试剂盒由英国Delivering Pharmacogenomics公司生产，检测K-ras基因第12位以及第13位密码子的7种突变，包括Gly12Cys(GGT>TGT)突变、Gly12Val(GGT>GTT)突变、Gly12Ala(GGT>GCT)突变、Gly12Arg(GGT>CGT)突变、Gly12Asp(GGT>GAT)突变、Gly12Ser(GGT>AGT)突变、Gly13Asp(GGC>GAC)突变。

1.2.3 随访方式 对所有研究对象进行随访，随访方式包括门诊就诊、电话、E-mail等方式，记录每个患者的生存情况，本研究中末次随访日期为2014年2月，所有研究对象均得到有效随访。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 NSCLC患者K-ras基因突变率及其突变类型

92例NSCLC患者，11例患者K-ras基因突变阳性，阳性率为11.96%。K-ras基因突变类型分别为K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突变3例，K-ras Gly12Val(GGT>GTT)突变2例，K-ras Gly12Ala(GGT>GCT)突变2例，K-ras Gly12Arg(GGT>CGT)突变2例，K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突变与K-ras Gly12Val(GGT>GTT)突变并存1例，K-ras Gly12Cys(GGT>TGT)突变与 K-ras Gly12Ala(GGT>GCT)突变并存1例。

2.2 K-ras基因突变阳性组与K-ras基因突变阴性组之间中位生存期的比较

K-ras基因突变阳性组包括Ⅰa～Ⅱb期患者2例，总生存时间17～24个月；Ⅲa～Ⅳ期患者9例，总生存时间6～35个月，中位生存期10个月。K-ras基因突变阴性组包括Ⅰa～Ⅱb期患者22例，总生存时间15～67个月，中位生存期25个月；Ⅲa～Ⅳ期患者59例，总生存时间7～28个月，中位生存期19个月。Log-rank检验显示K-ras基因突变阳性组Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期显著低于K-ras基因突变阴性组Ⅲa～Ⅳ期患者，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

自从20世纪80年代以来，诸多科研工作者对肺癌尤其是NSCLC的病因、诊断、治疗、预后进行了大量的分子生物学研究，从而认识到NSCLC的发生、发展、转移、侵袭、多药耐药等生物学行为与机体内细胞基因功能或结构异常有关，如抑癌基因的突变与失活、原癌基因的突变与失活、端粒酶相关的细胞永生性激活、宿主抗肿瘤免疫基因的破坏、基因不稳定性、转移抑制相关基因异常、旁分泌与自分泌生长因子的激活、肿瘤血管生长因子的激活等[4-5]。随着研究的深入，目前已经初步形成了NSCLC分子诊断、分子分期、分子治疗、分子预后等新的理论[6]，各种NSCLC分子生物学标志物逐步应用于临床。

K-ras基因属于原癌基因，它定位于人体染色体12p12.1，编码1种定位于细胞膜上的p21-ras偶联蛋白，其功能主要是将细胞生长、分化信号从激活受体传导至蛋白激酶。K-ras基因突变后其编码的蛋白会丧失灭活的功能，从而刺激细胞自发性生长、分化，在各种恶性肿瘤如NSCLC、胰腺癌、结直肠癌、乳腺癌等的发生以及发展过程中发挥重要作用[7]。目前国内外有关K-ras基因突变与NSCLC的研究报道较多。Meng等[1]报道，20%～30%的NSCLC患者K-ras基因突变阳性，其中以腺癌最为常见，K-ras基因突变可以缩短NSCLC患者尤其是早期腺癌患者的总生存期。Garassino 等[8]报道，NSCLC患者的药物敏感性、肿瘤生物学行为受K-ras基因突变类型的影响。

在本研究中，我们对92例NSCLC患者进行了K-ras基因突变检测，有11例患者K-ras基因突变阳性，其中9例为单位点突变，2例为多位点突变，K-ras基因突变阳性率为11.96%，略低于前述20%～30%的比例，这可能是由于地域差异、抽样误差等因素所致。此外，我们还分析了K-ras基因突变对NSCLC患者中位生存期的影响，由于K-ras基因突变阳性组Ⅰa～Ⅱb期患者病例数过少，无法求出中位生存期，因此本研究仅对K-ras基因突变阳性组Ⅲa～Ⅳ期患者与K-ras基因突变阴性组Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期的比较，结果显示前者中位生存期显著低于后者(P<0.05)，这说明K-ras基因突变对NSCLC患者预后在一定程度上可以产生负性影响，但是其确切机制有待进一步研究。

[1] Meng D,Yuan M,Li X,et al.Prognostic value of K-RAS mutations in patients with non-small cell lung cancer:a systematic review with meta-analysis〔J〕.Lung Cancer,2013,81(1):1-10.

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