自体细胞免疫治疗对亚健康人群疲劳及细胞免疫功能的效果研究

郭素敏 杨永辉 王建梅

亚健康状态是指人的身心处于疾病与健康之间的一种健康低质状态，此时机体虽无明确的疾病，但在躯体上、心理上和人际交往上出现种种不适应的感觉和症状，从而呈现出活力、反应能力和对外界适应能力降低的一种生理状态。自体细胞免疫治疗对人体整体功能状态进行调理，因而在亚健康的防治上有着积极的作用。本文以NK自体免疫细胞治疗亚健康状态，将NK细胞治疗对亚健康人群疲劳及细胞免疫状态的影响报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采用WHO推荐的MDI健康评估量表，对被测试者进行健康综合评价，标准为:满分100分，85分以上为健康状态，70分以下为疾病状态，70～85分为亚健康状态。筛选MDI健康评估量表分值在70～85分的亚健康状态患者32例，其中男20例(62.5%)，女12 例 (37.5%);年龄33 ～56 岁，平均年龄(42±5)岁;其中管理层干部13例，个体工商户19例。以上病例均排除器质性病变及抑郁症。

1.2 治疗方法 所有研究对象分别在自体细胞免疫治疗前、2周期、4周期和6个月后抽取血标本检测细胞免疫功能并进行MDI健康评估量表调查。细胞免疫功能采用免疫荧光法在流式细胞仪上测定T淋巴细胞及其亚群和NK细胞，其中CD3+与全部成熟T淋巴细胞(TT)反应，CD4+和CD8+分别识别辅助性T细胞(Th)和抑制性T(Ts)细胞亚群，CD3阴性而CDl6或CD56阳性为NK细胞。NK细胞制备及回输:采集外周血50～80 ml分离出单个核细胞，洗涤3次，用含γ-干扰素的 GT-551无血清培养基重悬常规培养24 h后加入白介素-2(IL-2 10 ng/ml)培养13～14 d后，计数总数 ＞1 ×109，检测无细菌、真菌污染后生理盐水洗3次，加入含2%人血白蛋白的复方氯化钠中，回输前检测内毒素试验＜0.5EU/ml，分2次回输，回输前肌内注射苯海拉明20 mg。对亚健康群体采用自体细胞NK治疗4周期，每1个月治疗1个周期。

1.3 观察指标及疗效评定 NK细胞免疫治疗前、2个周期后、4周期后及6个月后分别对研究对象进行疲劳评定量表调查及外周血淋巴细胞亚群中 CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平的检测。对比治疗前、2周期后及6个月后亚健康人群的疲劳的程度及细胞免疫功能是否有所改善，并进行统计学分析。

2 结果

2.1 近期疗效 亚健康患者经自体免疫细胞治疗后疲劳评定量表积分均有所下降，该治疗可改善亚健康人群疲劳状态，但2周期治疗后［(102.7±18.1)分］对比治疗前［(154.3±21.2)分］，差异无统计学意义(P＞0.05)，4周期治疗后［(87.8 ±18.4)分］及 6 个月后［(186.5±19.0)分］较治疗前对比差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 细胞免疫功能情况 亚健康患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及均偏低，经自体免疫细胞治疗后CD8+细胞低于治疗前，其余各指标均上升，其中治疗4周期及6个月后对比治疗前有统计学意义(P＜0.05)，而治疗2周期时较治疗前无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

注:与治疗前比较，*P ＜0.05

2.3 不良反应 在NK细胞回输期间，有3例出现低热，体温约37.5～37.8℃，数小时后自行恢复。无过敏及高热等情况发生，无消化道等其他不适反应。

3 讨论

亚健康是由心理、社会、自然等诸多因素综合影响人体而形成的。其发生的关键是系统出现了平衡失调，从而使健康变态变型，质量下降，功能减退。影响人体整体系统平衡的主要因素有越来越恶劣的生活环境、紧张的生存压力、倾斜的生活方式等方面［1］。

郝群珍［2］提出工作压力是导致人们亚健康最主要的因素之一。有研究显示年龄和性别因素也是影响亚健康不可忽视的两个方面，在40岁以上的人群中，亚健康的比例陡增，女性略高于男性［3，4］。本研究参与的亚健康人群40～50岁的超过一半，入选的亚健康人群中男性多于女性，分析与入组人群均为管理层或个体户有关。疲劳是一种主观症状，越来越成为困扰人们身体健康的一个重要因素。疲劳评定量表不但描述躯体及心理的疲劳特征，而且可用来区别一般的疲劳和病理状态的疲劳。本项研究显示:患者通过自体细胞免疫治疗后疲劳分值明显改善，并且随着治疗周期的增多疲劳改善的程度也进一步好转，6个月时与治疗4周期时基本相似，说明自体免疫治疗可很好的改善机体疲劳，提高生活质量，作用可持续较长时间。

在亚健康人群中普遍存在着“三高一低”的倾向，即高血脂、高血糖、高血黏度和免疫力低下。这与现在人们的少运动、高热量等生活、饮食方式分不开的。大部分亚健康人群都伴有轻度免疫力低下，易患感冒及其他病毒性疾病。本研究发现亚健康人群的细胞免疫功能低下，尤其是T细胞亚群状态异常和比例失调，如外周 CD3+、CD4+细胞明显减少，CD4+/CD8+比例倒置等。NK细胞是分离患者自体外周血单个核细胞后在体外GMP实验室通过细胞因子诱导刺激下培养获得的一群不具有 MHC限制性的 CD3－CD56+细胞。本文结果表明，治疗后外周血CD8+细胞比例较治疗前明显下降，而CD3+、CD4+细胞及 CD4+/CD8+比值较治疗前均升高，并且随着治疗周期的增多也进一步升高，6个月时与治疗4周期时基本持平，说明自体免疫细胞治疗后体内免疫细胞处于高水平的激活状态，有效的改善了患者体内免疫微环境平衡失调和功能抑制状态，利于机体自身免疫功能的恢复。

1 董玉整.亚健康及其产生的三个主要原因.中华流行病学杂志，2003，24:758-759.

2 郝群珍.压力导致亚健康的影响因素与干预对策.护理研究，2007，21:493-495.

3 李秀敏，魏彦茹.亚健康影响因素的统计分析.中国卫生统计，2007，24:192-193.

4 陈志伟，邵雅裴，李雄.慢性疲劳与心理因素的关系初探.江西中医药，2008，4:17-18.