细节决定成败
2014-04-01卫平知
卫平知
摘要:一件事情能否顺利地做成功,取决于实际操作时每一个细节的成败。大到航天飞机的发射,小到有关一个知识的实验。
关键词:细节 DNA 实验
1986年1月28日,美国航天飞机“挑战者”号从发射架上升空73秒后发生爆炸,价值12亿美元的航天飞机化作碎片,7名机组人员全部遇难,造成了世界航天史上最大的惨剧。事故原因是因为右侧固态火箭推进器上面的一个O形密封环失效,导致一连串的连锁反应,并且在升空73秒后,爆炸解体坠毁。此事在当时震惊全世界。
众所周知,DNA技术在现代社会的应用主要有两方面:一个是重大刑事案件的侦破(如杀人案),可通过DNA技术准确确定犯罪嫌疑人的身份;另一方面用于亲子鉴定,人的血液、毛发、唾液、口腔细胞等都可以用于亲子鉴定。DNA亲子鉴定,否定亲子关系的准确率几近100%,肯定亲子关系的准确率可达到99.99%。
分组实验“DNA的粗提取与鉴定”是学生特别感兴趣的一个实验。然而本实验操作步骤多、时间长、用到的实验器材多,学生由于某一个细节不注意造成实验失败的有很多,好多失败的学生都想重做一遍,但由于没有足够的时间或受实验材料的限制而无法补做。下面谈一谈在这个实验操作中应该注意的几个细节。
一、不清楚鸡血细胞液的盛放容器
1.正确做法。盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料制品。因为鸡血细胞破碎后释放出来的DNA,易被玻璃容器吸附。所以,在第1步提取鸡血细胞核物质时,最好放入塑料烧杯内提取。这样才能保证提取到足够的DNA来观察和鉴定。
2.错误做法。在配有塑料烧杯的情况下,好多学生都将鸡血细胞液倒入到100毫升的玻璃烧杯内提取DNA,使提取出的DNA量有所减少。
二、不清楚每步搅拌的速度、力度和方向
1.正确做法。第1步提取鸡血细胞的细胞核物质时,要快速搅拌,使鸡血细胞快速破裂释放出DNA;而第3步析出DNA的粘稠物;第5步将DNA粘稠物再溶解和第7步提取含杂质较少的DNA时,搅拌要轻要慢,以便获得完整的DNA分子。每次搅拌时都要沿一个方向搅拌,否则DNA分子易断裂。
2.错误做法。学生在做第1步时知道应该快速搅拌,于是想当然地认为在以后各步搅拌时都要快速搅拌。结果是:在第3步观察DNA丝状物时几乎看不到(因为DNA分子已被搅断);在第5步溶解DNA黏稠物时,纱布上的黏稠物很少,用镊子几乎夹不起(因为断裂的DNA分子没有被过滤出来,进入到滤液中);在第7步提取含杂质较少的DNA时,卷在玻璃棒上的DNA分子只有寥寥几根,有的甚至于没有(因为DNA分子已被搅断,留在了溶液中)。
三、不清楚加水方式
1.正确做法。在第3步加水时,要沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水。
2.错误做法。加水时不沿烧杯内壁并且快速倒入烧杯。
四、不清楚每个过滤步骤要什么不要什么
1.正确做法。本实验共需过滤3次,其中第1步提取鸡血细胞的细胞核物质和第6步过滤含有DNA的氯化钠溶液,要的是滤液;第4步滤取含DNA的黏稠物,要的是滤出物。
2.错误做法。学生将第1步和第6步的滤液倒掉,将第4步的滤出物倒掉。该要的倒掉了,不该要的留下来了。
五、不清楚每个过滤步骤的纱布层数
1.正确做法。本实验共需过滤3次,其中第1步提取鸡血细胞的细胞核物质和第6步过滤含有DNA的氯化钠溶液,要2层纱布;第4步滤取含DNA的黏稠物,要4层纱布。
2.错误做法。学生在做第1步和第6步时纱布层数多,导致过滤时间加长或者就过滤不下去;做第4步时,纱布层数少,导致纱布上的粘稠物很少。
六、添加氯化钠试剂不正确
1.正确做法。在做第2步溶解细胞核内的DNA和第5步将DNA粘稠物再溶解时,要加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液;在第8步DNA的鉴定时,要加入物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液。
2.错误做法。学生在该加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液时(第2、5步)加入了物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液,而在该加入物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液时(第8步)却加入了物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液,导致实验失败。
七、二苯胺试剂试剂配制错误
1.正确做法。二苯胺试剂要现配现用,使用时每10mlA液中加入B液2滴。
2.错误做法。每10mlB液中加入A液2滴;或者A液、B液各取一半。
八、配制(或加入)的试剂没有混合均匀
1.正确做法。二苯胺试剂配制好以后及配好的二苯胺试剂加入到盛有5ml物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液的试管后都必须混合均匀。
2.错误做法。这两步都没有混合均匀或其中一步没有混合均匀,这都会导致鉴定实验的失败。
除了上述原因之外,还有如容器清洗不干净、不会振荡试管等也会导致实验失败。
实验是综合性很强的动手动脑过程。要顺利完成一个实验,不仅要有扎实的理论基础,更要有熟练的动手操作能力和良好的动手操作习惯来做后盾。完美的成功来自对每个细节的孜孜追求。只有踏踏实实走好每一步,才能到达成功的彼岸。
(责编 田彩霞)