桂枝桃仁及其配伍对抗凝血作用影响的研究*

周 蓓

(广西中医药大学药学院， 广西 南宁 530001)

临床常以桂枝、桃仁两药配伍基本构成的方剂，利用通脉行瘀的特点，用来治疗瘀血内结的各种病证。目前实验报道多集中对单味药或将桂枝-桃仁放入中药复方的药效学研究，而对两者配伍后的报道甚少。因此，本研究在中药七情配伍理论的指导下，观察桂枝-桃仁配伍后与单味药相比，对小鼠出、凝血时间和凝血酶时间的影响，探讨两者的配伍关系。

1 材料

1.1 实验动物 昆明种小鼠，体重为(20±2)g，雌雄各半，由广西中医药大学实验动物中心提供。动物合格证号：SYXK 桂2011-0001。

1.2 药物 桂枝为樟科乔木植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的嫩枝[1]。桃仁为蔷薇科小乔木桃[Prunus persica(L.)Batsch或山桃P.davidiana(Carr.)Franch.]的成熟种子[1]。桂枝、桃仁均购置广西中医药大学附属第一医院中药房，并经广西中医药大学药学院中药鉴定教研室教授鉴定为正品。生产批号：20110701。阿司匹林肠溶片，25 mg/片，南京白敬宇制药有限责任公司。无菌生理盐水，100 mL/瓶。

凝血酶时间测定试剂盒(液体)，购自南京建成生物工程研究所。GB-204型电子秤，瑞士梅特勒-托利多仪器上海有限公司。内径1 mm，长15 cm的玻璃毛细管，华西医科大学仪器厂。移液枪，上海肯强仪器有限公司。磨砂载玻片、镊子、剪刀、离心管1.5 mL、灌胃针头、注射器、滤纸、秒表、解剖刀、小鼠固定器等均由广西中药药效研究重点实验室提供。

2 方法

2.1 分组 取昆明种小鼠50只，按小鼠体重随机分5组：空白组；阿司匹林组；桂枝组；桃仁组；配伍组。

2.2 药液制备 按照传统煎煮法，将药材桂枝、桃仁、桃仁-桂枝(1：1)分别煎煮。先将药材置煎煮容器内，加5～7倍量的自来水浸泡30 min，过滤。煎煮3遍，头煎40 min，药渣加3～5倍量水继续煎煮，二煎20 min，混匀，合并2次滤液，浓缩至所需浓度。冷却装入灭菌药瓶，置4℃冰箱备用。

2.3 处理方法 所有小鼠分笼饲养于广西中医药大学实验动物中心。自由饮水、进食，定期更换垫料，适应环境3 d后，开始灌胃，灌胃严格遵循操作规则及浓度要求，减少由操作不当引起的动物死亡。每日1次，连续10 d。灌胃均按0.2 mL/20 g。空白组给予等体积的生理盐水。

2.4 观察指标及检测方法

2.4.1 小鼠出血时间的测定 采用断尾法[2]。末次给药1 h后将小鼠固定，用毫米尺测量尾长度后，用手术剪于距尾尖1.5 mm处剪断尾，待血液自行溢出开始计时，每间隔30 s用滤纸吸去血滴1次，直至血流自然停止(用滤纸吸时无血为止)，即为出血时间。

2.4.2 小鼠凝血时间的测定 采用毛细玻管法[2]。末次给药1 h后，将内径为1 mm，长度为15 cm的玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛，至毛细玻管内血柱超过10 cm时取出，平放于桌面，每隔30 s折断毛细管约0.5 cm，并缓慢向左右拉开，观察折断处是否有血丝，自血液流入毛细管内开始计时，至血凝丝出现为止，即为凝血时间。

采用玻片法[2]。末次给药1 h后，将5号针头插入小鼠眼眶内，使血液自动流出，去掉第一滴血后，在载玻片上滴1滴血，直径大约5 mm，立即用秒表计时，每隔30 s用大头针自血滴边缘向中间轻挑一次，当有血丝挑起时停止计时，即为凝血时间。左右各测一次，取平均值。

2.4.3 小鼠凝血酶时间测定 小鼠来源、分组、给药同前，末次给药后1h摘眼球取全血，全血与0.109M的柠檬酸三钠按9：1混合均匀，3000 rp离心15min，收集上层血浆，转移到离心管中，预热至37℃水浴，孵育3 min，加配制好的凝血酶试剂0.l mL，秒表记录。实验操作严格按照试剂盒要求操作。

3 结果

3.1 对小鼠出血时间的影响 见表1。

表1 各组小鼠出血时间比较

注：与空白组比较，﹡P<0.05；与阿司匹林组比较，▲P<0.05；与桂枝组比较，△P<0.05

3.2 对小鼠凝血时间的影响 见表2。

表2 各组小鼠凝血时间比较

注：与空白组比较，﹡P<0.05；与阿司匹林组比较，▲P<0.05

3.3 对小鼠凝血酶时间的影响 见表3。

表3 各组小鼠凝血酶时间比较

注：与空白组比较，﹡P<0.05；与阿司匹林组比较，▲P<0.05

4 讨论

配伍理论是中药复方的核心问题，药对是中药复方配伍中最基本、最常见和最简单的形式，专指临床上相对固定的两味药所组成的方剂。药对桂枝、桃仁源于经方，属张仲景最具特色的配伍之一。中医药理论认为，桂枝与桃仁两药配伍，共奏活血化瘀，消癥散结之效。其中桃仁味苦甘平，苦能泄降导下以祛瘀，甘能和畅气血以生新，为活血通经常用之药；桂枝甘温助阳，可行里达表，以“动”为用，有温通一身之阳气、流畅血脉而和血散瘀之功[3]。仲景化瘀消癥一类方剂如《金匮要略》桂枝茯苓丸、《伤寒论》桃核承气汤、《金匮要略》鳖甲煎丸、“调经祖方”的温经汤等均以此为基本药对。

现代药理学研究表明，绝大部分具有活血祛瘀作用的中药均有不同程度的抗凝作用。现代医学认为：正常的止血、凝血过程与血管壁的结构与功能、凝血因子的含量及其活性等因素密切相关。桂枝具有抗菌、抗病毒、解热镇痛、镇惊、抗惊厥、抗炎，对心血管作用等多种药理活性[4]。其中，桂皮油能使血管扩张，增强血液循环，改善外周循环的作用，桃仁提取物有显著抑制血凝的作用，并且能扩张外周血管，增加器官血流量[5]。本研究结果表明，与桂枝组比较，配伍组抗凝血的作用更强，符合七情理论“相使”的配伍关系，以桃仁为主，桂枝为辅的药对配伍的功效优于其中的单一药物。本研究以期为桂枝、桃仁药对的临床合理遣药组方提供实验依据，为促进桂枝-桃仁药对的理论研究和临床应用提供参考。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典[M].北京：化学工业出版社，2005：195-196.

[2]陈奇.中药药理研究方法学[M].第2版，北京：人民卫生出版社，1996：8.

[3]郭延东.张仲景运用桂枝对药探析[J].中国中医基础医学杂志，2011，17(4)：430-431.

[4]《中华本草》委员会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：1626.

[5]何赛萍，徐晓东.桃核承气汤析[J].浙江中医学院学报，1999：23(5)：9-11.