滇产百日青的化学成分研究

吴晶晶，黄国利，詹睿，刘莹，陈业高

（云南师范大学化学化工学院，云南昆明650500）

百日青（Podocarpus neriifolius），是罗汉松科（Podocarpaceae）罗汉松属（Podocarpus）植物，产于浙江、福建、台湾、江西、湖南、贵州、四川、西藏、云南、广西、广东等省区.尼泊尔、锡金、不丹、缅甸、越南、老挝、印度尼西亚、马来西亚的沙捞越也有分布[1].罗汉松属植物在传统中医药中常用于治疗热病、哮喘、咳嗽、霍乱、愠怒、胸口发闷和性病等[2].国内外对该属植物研究较多，发现了一些具有较好生物活性的二萜和双黄酮.为了从该种植物中发现新的药用活性成分，本文对滇产百日青的化学成分进行了分离纯化，得到5个化合物.经过波谱分析（核磁共振氢谱、碳谱）确定它们的结构分别为异香草醛（isovanillin）（1）、对羟基苯甲酸（4-hydroxybenzoic acid）（2）、原儿茶酸（protocatechuic acid）（3）、松甾酮A（ponasterone A）（4）、stigmast-5-ene-3 β,7 αdiol（5）.其中化合物（1）、（3）、（4）、（5）为首次从该植物中分离得到，结构式见图1.

1 仪器和药材

1.1 仪器

紫外分析仪（ZF-II型上海顾村中实仪器厂）；质谱（Varian Mat-711质谱仪）；超导核磁共振仪（Bruker DRX-500型，瑞士布鲁克公司）；旋转蒸发仪（SB-2000系列，日本东京理化）.

1.2 试剂

层析硅胶（青岛海洋化工厂），Sephadex LH-20:20-80 μm（Pharmacia Fine Chemical Co.,Ltd.）；反相RP-18:40-60 μm（德国Merck公司），高效薄层层析硅胶G板（烟台化工研究院），显色剂为10%硫酸乙醇溶液，所用溶剂（石油醚，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇）为工业纯（重蒸后使用），其它试剂为化学纯或分析纯.

1.3 药材

百日青叶采自云南西双版纳，由中国医学科学院药用植物开发研究所云南分所彭朝中先生采集，并鉴定为Pterospermum menglunense Hsue.

2 试验方法

干燥的百日青叶3.6 kg，用甲醇浸提4次，合并提取物并减压蒸干后得浸膏650 g.将浸膏悬溶于水中，再用乙酸乙酯反复萃取8次，合并乙酸乙酯萃取物并减压蒸干后得到浸膏78 g，再经硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析以及反相柱层析等分离方法反复分离纯化得到化合物1～5.

3 结果与讨论

从滇产百日青叶的甲醇提取物中分离得到5个化合物，利用现代核磁共振波谱法分别鉴定为异香草醛（isovanillin）（1）、对羟基苯甲酸（4-hydroxy⁃benzoic acid）（2）、原儿茶酸（protocatechuic acid）（3）、松甾酮A（ponasterone A）（4）、stigmast-5-ene-3 β,7 α-diol（5）.其中化合物（1）、（3）、（4）、（5）为首次从该植物中分离得到.

化合物（1）：无色油状物，分子式为C8H8O3，易溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）δ∶9.86（1H,s,CHO），7.46（1H,br d,J=8.5 Hz,H-6），7.45（1H,br s,H-2），7.07（1H,d,J=8.5 Hz,H-5），4.00（3H,s,CH3）；13C-NMR（125 MHz,CDCl3）δ∶129.9（s,C-1）,108.7（d,C-2），147.1（s,C-3），151.2（s,C-4），114.4（d,C-5），127.6（d,C-6），190.9（CHO），56.1（OCH3）.以上数据与文献[3]对照一致，故鉴定化合物（1）为异香草醛.

化合物（2）：白色晶体，分子式为C7H6O3，易溶于甲醇.1H-NMR（500 MHz,CD3OD）δ∶7.89（2H,d,J=8.5 Hz,H-3,7），6.83（2H,d,J=8.5 Hz,H-4,6）；13C-NMR（125 MHz,CD3OD）δ∶168.7（s,C-1），123.0（s,C-2），133.3（d,C-3），116.3（d,C-4），163.6（s,C-5），116.3（d,C-6），133.3（d,C-7）.以上数据与文献[4]对照一致，故鉴定化合物（2）为对羟基苯甲酸.

化合物（3）：白色晶体，分子式为C7H6O4，易溶于甲醇.1H-NMR（500 MHz,CD3OD）δ∶7.44（d,J=2.0 Hz,H-2），6.82（d,J=8.0 Hz,H-5），7.46（dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6）；13C-NMR（125 MHz,CD3OD）δ∶123.42（s,C-1），116.07（d,C-2），146.32（s,C-3），151.80（s,C-4），118.03（d,C-5），124.20（d,C-6），170.58（s,C-7）.以上数据与文献[5]对照一致，故鉴定化合物（3）为原儿茶酸.

化合物（4）：白色针晶，分子式为C27H44O6，易溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz,Pyridine-d5）δ∶2.11-2.23（1H,m,H-1a），1.85-1.97(1H,m,H-1b),4.17（1H,br dd,J=11.5,3.0 Hz,H-2），4.23（1H,br s,H-3），2.01-2.10（1H,m,H-4a），1.65-1.82（1H,m,H-4b），3.02（1H,d,J=13.0 Hz,H-5），6.27（1H,s,H-7），3.60（1H,br s,H-9），1.65-1.82（1H,m,H-11a），1.85-1.97（1H,m,H-11b），2.01-2.10（1H,m,H-12a），2.62（1H,dd,J=12.0,4.0 Hz,H-12b），1.85-1.97（1H,m,H-15a），2.11-2.23（1H,m,H-15b），2.01-2.10（1H,m,H-16a），2.47（1H,dd,J=20.0,11.0 Hz,H-16b），2.93（1H,t,J=9.0 Hz,H-17），1.23（3H,s,CH3-18），1.07（3H,s,CH3-19），1.58（3H,s,CH3-21），3.80（1H,d,J=10.5 Hz,H-22），1.54（1H,d,J=12.5 Hz,H-23a），1.65-1.82（1H,m,H-23b），1.36-1.43（1H,m,H-24a），1.65-1.82（1H,m,H-24b），1.43-1.50（1H,m,H-25），0.81（3H,d,J=5.5 Hz,CH3-26），0.80（3H,d,J=5.5 Hz,CH3-27）；13CNMR（125 MHz,Pyridine-d5）δ∶37.7（t,C-1），67.7（d,C-2），67.7（d,C-3），32.1（t,C-4），51.1（d,C-5），203.2（s,C-6），121.4（d,C-7），165.8（s,C-8），34.1（d,C-9），38.4（s,C-10），20.8（t,C-11），31.7（t,C-12），47.8（s,C-13），83.9（s,C-14），31.4（t,C-15），21.1（t,C-16），49.7（d,C-17），17.6（q,CH3-18），24.1（q,CH3-19），76.4（s,C-20），21.3（q,CH3-21），76.4（d,C-22），30.0（t,C-23），36.8（t,C-24），27.8（d,C-25），22.0（q,CH3-26），23.0（q,CH3-27）.以上数据与文献[6]对照一致，故鉴定化合物（4）为松甾酮A.

化合物（5）：白色晶体，分子式为C29H50O2，易溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）δ∶3.59（1H,m,H-3），5.61（1H,d,J=3.5 Hz,H-6），3.86（1H,m,H-7），0.69（3H,s,H-18），1.00（3H,s,H-19），0.94（3H,d,J=6.5 Hz,H-21），0.82（3H,d,J=7.0 Hz,H-26），0.84（3H,d,J=6.5 Hz,H-27），0.86（3H,t,J=7.5 Hz,H-29）；13C-NMR（125 MHz,CDCl3）δ∶37.0（t,C-1），31.4（t,C-2），71.3（d,C-3），42.0（t,C-4），146.3（s,C-5），123.8（d,C-6），65.4（d,C-7），37.5（d,C-8），42.3（d,C-9），37.4（s,C-10），20.7（t,C-11），39.2（t,C-12），42.2（s,C-13），49.4（d,C-14），24.3（t,C-15），28.3（t,C-16），55.7（d,C-17），11.6（q,CH3-18），18.3（q,CH3-19），36.1（d,C-20），18.8（q,CH3-21），33.9（t,C-22），25.9（t,C-23），45.8（d,C-24），29.1（d,C-25），19.8（q,CH3-26），19.0（q,CH3-27），23.1（t,C-28），12.0（q,CH3-29）.以上数据与文献[7]对照一致，故鉴定化合物（5）为stigmast-5-ene-3β,7α-diol.

[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北

[2] 京:科学出版社,2004.Faiella L,Temraz A,Siciliano T,et al.Terpenoids from the leaves of Podocarpus gracilior[J].Phytochemisty Lett,

[3] 2012,5(2):297-300.徐俊驹,谭宁华,曾广智,等.益智仁化学成分的研究[J].

[4] 中国中药杂志,2009,34(8):990-993.吴彤,李燕,孔德云,等.深绿山龙眼叶的化学成分[J].中

[5] 国药学杂志,2010,45(16):1224-1227.吴志军,欧阳明安,杨崇仁,等.苣叶丹参的多酚类化合物

[6] [J].云南植物研究,1999,21(3):393-398.Li S H,Zhang H J,Yao P,et al.Non-taxane compounds from the bark of Taxus yunnanensis[J].J Asian Nat Prod

[7] Res,2002,4(2):147-154.Li G Y,Wang J H,Li X.Sterols from the pericarp of Sphaerophysa salsula DC[J].J Asian Nat Prod Res,2005,7(2):165-169.