锡盟地区犬感染布鲁氏菌病的血清学调查

徐桂杰 苏乙拉 内蒙古锡林郭勒职业学院 026000

目前，犬布鲁氏菌病在全球多个国家和地区都有发生，而且发病数量逐年上升，由犬布鲁氏菌病感染人的病例报道也日益增多。因此犬布鲁氏菌病的控制和根除对人类健康和公共卫生安全具有重要意义。开展锡盟地区犬感染布鲁氏菌病的血清学调查，可以了解犬布病在本地区的流行情况，并且能为预防和控制人间犬布鲁氏菌感染提供参考。

1 实验方法

1.1 试验材料

从锡盟地区随机采集145 只犬的血样。

1.2 试验方法

无菌采集受检犬的静脉血1.0～1.5mL，离心析出血清-20℃冷冻备用。进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验。

（1）虎红平板凝集试验∶于洁净陶瓷板上滴加30uL 抗原，随后加入30ul 受检血清，搅拌混匀，同时设立阳性和阴性血清对照。

（2）试管凝集试验∶对平板凝集试验显示阳性的血清抗体进行半定量检测。

(1)于96 孔板第一孔加入200uL0.5%石炭酸，以后每孔加人100uL0.5%石炭酸。

(2)于第一孔中加入受检血清20ul，混合均匀后吸取20uL 加入第二孔中，依次做倍比稀释。即从第1 至第12 孔血清稀释度分别为1∶10、1∶20、1∶40、l∶80、1∶160、1∶320、1∶640……。

(3)将100 uL20 倍稀释的抗原加入各血清中，振荡混匀，此时血清稀释度分别为1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280……。

(4)同时设立阳性血清和阴性血清对照。

(5)置于湿盒中放入3 度温箱，24h 后取出读取结果。

1.3 结果判定

(1)虎红平板凝集试验：在阳性和阴性对照成立的前提下，受检血清在4min 内出现肉眼可见的凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(一)。

(2)试管凝集试验：在阳性和阴性对照成立的前提下，以出现50%以上凝集现象的最高稀释度判为血清抗体效价。血清效价l∶80 以上判为阳性；1∶20和1∶40 判为疑似反应；无凝集现象，液体均匀浑浊者判为阴性。

2 结果分析

(1)用虎红平板凝集试验，从锡盟地区采集的145份受检血清中检出阳性血清7 份，阳性率为4.82%。

(2)对7 份阳性血清进行的试管凝集试验显示：阳性血清2 份(抗体效价为1∶80)，阴性血清3 份，疑似血清2 份。

(3)通过血清学检测可判为布鲁氏菌感染犬2例，占总样本数的1.37%。

(4)试管凝集试验验证平板凝集试验，其符合率为28.5%(2／7)。

3 讨论

使用平板凝集试验不能对布鲁氏菌病进行确诊，可作为筛选试验,结合患犬发病情况，试管凝集试验的特异性较高。通过血清学检测可判定布鲁氏菌感染率为1.37%。

4 预防

养犬业的发展给公共卫生带来了许多问题，狗咬伤人同时能传染很多种人畜共患的传染病,其中犬布病应引起重视。随着城市家养宠物犬的逐年增多，宠物犬中本病的流行情况也是一个值得研究的问题。在牧区，犬多因进食患病动物脏器而感染本病。人与病犬密切接触,病犬的分泌物中带有的布氏杆菌极有可能使人感染。因此要加强犬的管理,防止其感染布氏杆菌病。定期对其进行血清学检查,一旦发现后及时进行无害处理,将犬尸药物消毒、焚烧或深埋处理。养犬者应提高警惕，须经常对环境及犬进行药物消毒,以防布氏杆菌病传染给人。