青海省玉树州猪弓形虫感染情况调查

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弓形虫病(Toxoplasmosis)是一种世界范围内广泛流行的专性细胞内寄生的人畜共患寄生虫病，可自然感染猪、黄牛、水牛、马、山羊、绵羊、鹿、兔、猫、犬和鸡等16 种动物。在各种家畜中以猪的感染率最高，在养猪场感染死亡率高达60%以上。

1 材料与方法

1.1 材料

猪弓形虫IgG 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）由深圳芬德生物技术有限公司生产，主要用于检测猪血清或血浆中弓形虫特异性抗体，评估猪场弓形虫感染状况。我们采用该试剂盒对玉树州5 县1 市的生猪养殖场猪弓形虫感染概况进行了调查。

我们于2013年4～11月于玉树州5 县1 市的生猪养殖场采集猪血液，每只猪采集3～5mL 血液，待血液凝固析出血清后，以2500r/min 离心5min 分离血清，-20℃保存备检。

1.2 方法

（1）样品制备。用样品稀释液将待检血清按100 倍稀释（如2μl 血清加入198 μl 样品稀释液中混匀）。阴、阳性对照不用稀释。浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20 倍稀释。

（2）检验方法。使用前将试剂盒置室温下30 分钟，恢复至室温。取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2 孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。空白对照孔加样品稀释液100μl，阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl，样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。混匀，置37℃下反应30 分钟。扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，重复洗涤5 次，拍干。每孔加酶标记物100μl（空白孔除外），置37℃下反应30 分钟。洗涤步骤同前。每孔依次加底物液A、底物液B 各50μl，混匀，37℃避光反应10 分钟。每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450 nm(可用630 nm 作参比波长）测定各孔吸光值（A 值）。

（3）结果判定。实验正常的情况下，阴性对照≤0.20，阳性对照≥0.5；C.O（临界值）=2.1×阴性对照均值（阴性对照均值小于0.1 时按0.1 计算）；样品值＞C.O 为阳性，样品值≤C.O 为阴性。

2 结果

通过本次调查，我们明确了青海玉树州5 县1市的猪弓形虫感染概况，调查结果显示，在玉树州所收集到768 份猪血液样品中，共检测到118 份血清样品呈弓形虫血清抗体阳性，猪弓形虫血清抗体阳性率为15.36%；玉树市、杂多县、称多县、治多县、囊谦县及曲麻菜的猪弓形虫血清抗体阳性率分别为19.25%、16.81%、16.56%、15.94%、8.60%、11.61%及15.36%，经统计学分析不同县、市间的猪弓形虫血清学阳性率，无统计学差异（P＞0.05）。

3 讨论

弓形虫是猪的“五大高热病”的病原之一，感染了弓形虫的猪肌肉中会存在弓形虫孢囊，人们食用了生的或不熟的肉质能够引发弓形虫感染。在本次调查中，我们采集到768 份猪血液样品中，共检测到118份血清样品呈弓形虫血清抗体阳性，猪弓形虫血清抗体阳性率为15.36%，远低于先前报道的我国中部地区37 个大规模养猪场24.5%的弓形虫感染率。由此看来，我州防治弓形虫的工作取得了一定的进展。

然而我州的猪弓形虫感染率仍然处于较高的感染水平。以往的调查显示，弓形虫流行猪场多与流浪猫的出入(有的场本身养猫)有关；还有报道称，土壤中弓形虫卵囊污染较严重的猪场，猪群的弓形虫感染率也较高，土壤的污染程度或许可以反映猪场弓形虫感染率，而土壤的污染程度又与猪场猫群密度有重要关系。因此，在一定地域中控制和预防猪群感染弓形虫的关键在于控制本区域内的猫和啮齿动物的数量。因此猪舍内应严禁养猫并防止猫进入圈舍，并严防饮水及饲料被猫粪直接或间接污染。