奶粉中蛋白质检测实验室间比对评估

李晨，陈霞

（泰州市疾病预防控制中心，江苏泰州 225300）

实验室间比对是判定实验室检测能力的重要手段之一，也是实验室内部质量控制的补充措施［1–2］。实验室间比对是按照预先规定的条件，由两个或多个实验室对相同或类似被测物品进行检测的组织、实施和评价的活动。为进一步提高泰州市疾病预防控制中心实验室的检测能力，加强检测的质量管理，确保检测结果的准确性、可比性和可靠性，该中心于2013年组织并实施了5市疾控中心的实验室间比对活动，项目为奶粉中的蛋白质测定。

1 实验部分

1.1 比对样品制备

泰州市大型乳制品集团提供的进口奶粉（3种蛋白质含量水平），经过单因素方差分析，满足比对试验要求。

1.2 比对样品检测方法

推荐采用GB／T 5009.5–2003 《食品中蛋白质的测定》第一法或第二法。

1.3 比对对象

扬州、南通、徐州、镇江和泰州疾控系统43个实验室，其中地（市）级5家，县（区）级34家，行业疾控机构4家。

1.4 比对样品考核方法

样品分为3个浓度，分别为A，B，C 3组，43个参试实验室随机分为两组，第1组23个实验室，发放A，B两个浓度样品；第2组20个实验室，发放B，C两个浓度样品，每个参试实验室从1~43分别赋予一个代码。

1.5 比对结果评价方法

该次比对结果统计分析采用稳健统计方法［3–4］，该法是目前国际上对实验室能力验证和实验室间比对结果进行评价的最常用方法，能客观、科学地评价每一个参试实验室的结果。以Z比分数［包括实验室间Z比分数(ZB)和实验室内Z比分数(ZW)］评价实验室的能力检测结果，数值的统计判定：| Z |≤2，结果满意；2＜| Z |＜3，结果有问题（或可疑结果）；| Z |≥3，结果不满意或离群。

2 结果与分析

共发放了43份奶粉样品，其中A样为23份，B样为43份，C样为20份，即为23个实验室收到A和B两种样品，20个实验室收到B和C两种样品。37家实验室在规定时间内提交了蛋白质的测定结果，检测数据的总回收率为86.0%，第1组20个参试实验室提交了A和B两种样品的检测结果，第2组17个实验室提交了B和C两种样品的检测结果。

2.1 样品均匀性检验

依据《能力验证样品均匀性评价指南》（CNAS–GL03：2006）［5］的规定，分别从所制备的3种浓度样品中各随机称取18份样品进行检测，利用F检验对样品的均匀性进行统计检验，结果见表1和表2。A，B，C 3组样品均通过相应置信水平检验，3组奶粉的F值分别为2.64，1.12，1.47，均小于3.23［F0.05(8，9)］，表明样品内和样品间无显著性差异，样品的均匀性能够满足实验室间比对试验的要求。

表1 比对样品的均匀性检验结果 g／（100 g）

表2 均匀性检验数据统计分析结果

2.2 比对样品检测结果分析

37家实验室所提交的蛋白质测定结果中，结果满意(| Z |≤2)的有33家，结果可疑(2＜| Z |＜3)的有3家，结果不满意(| Z |≥3)的有1家。两组测定结果分析见表3～表5。

2.3 Z值结果柱状图

图1、图2分别为第1组奶粉蛋白质测定ZB，ZW比分数柱状图，图3、图4分别为第2组奶粉蛋白质测定ZB，ZW比分数柱状图。

表3 第1组比对样品测定结果分析

表4 第2组比对样品测定结果分析

表5 比对样品检测数据统计结果

图1 第1组奶粉蛋白质测定ZB比分数柱状图

图2 第1组奶粉蛋白质测定ZW比分数柱状图

图3 第2组奶粉蛋白质测定ZB比分数柱状图

图4 第2组奶粉蛋白质测定ZW比分数柱状图

2.4 参试实验室总体能力状况统计结果

本次比对试验结果的满意率为89.2%，有问题率为8.11%，不满意率为2.70%，结果见表6。

表6 参试实验室的总体能力状况统计表

3 结论

(1)实验室间比对试验结果，总体情况较好，采用稳健统计方法对参试实验室的检测结果、参加实验室的总体能力状况和各参加实验室的能力状况进行了统计。对于出现的可疑结果和不满意结果，进行了技术分析［6–7］，并针对分析提出相应的技术建议［8］。

(2) 37家实验室均选用凯氏定氮法，经过分析，发现结果不满意的那一家实验室取样量过大，按照国家规定的操作方法进行操作，样品消化时间不长便干涸成一个黑球，消化无法继续进行，原因为浓硫酸加入量不够所致，可通过增加其用量使消化完全。浓硫酸必须过量但又不能加入太多，以避免温度过高，硫酸铵分解。第二个造成可疑结果的原因为滴定终点的判断。该法采用溴甲酚绿–甲基红混合指示剂，滴定终点时由蓝绿色变为灰色以指示终点的到达。但这是一个渐变过程，不易观察，而是观察蓝绿色消失刚变为红色为滴定终点［9］。还有氢氧化钠溶液的用量和硼酸吸收液的温度均需严格控制，否则均会造成结果的偏离。

［1］ GB／T 15483.1–1999 实验室间比对的能力验证第Ⅰ部分：能力验证计划的建立和运作［S］.

［2］ GB／T 15483.1–1999 实验室间比对的能力验证第Ⅱ部分：实验室认可机构对能力验证的选择和使用［S］.

［3］ CNAS–GL03: 2006 能力验证结果的统计处理和能力评价指南［S／OL］.［2009–03–06］http: //www.cnas.org.cn.

［4］ 王承忠.实验室间比对的能力验证及稳健统计技术［J］.理化检验：物理分册，2005，41(1): 48–51.

［5］ CNAS–GL03: 2006 能力验证样品均匀性评价指南［S／OL］.［2006–03–06］.http://www.cnas.org.cn.

［6］ 戴坤富，杨志国，曾茹萍，等.实验室间能力验证理化比对试验结果分析［J］.中国卫生检验杂志，2013，23(7): 1 811–1 813.

［7］ 王卫华，卢晓华，徐锐锋，等.酱油中3-氯-1，2-丙二醇检测实验室间比对分析［J］.化学分析计量，2012，21(3): 89–91.

［8］ 陆娟.实验室间比对试验结果分析评价［J］.现代预防医学，2008，35(1): 130–134.

［9］ 黄婷婷，曾家民，丘山，等.食品中蛋白质测定方法的改进［J］.现代食品科技，2010，26(7): 763–766.