老年性痴呆患者血清中期因子水平检测及意义

朱仙芝，邱建达，李再忠

·论著·

老年性痴呆患者血清中期因子水平检测及意义

朱仙芝，邱建达，李再忠

目的探讨血清中期因子（MK）表达水平与老年性痴呆（AD）疾病的关系。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测39例AD患者和42例正常对照组血清MK表达水平。结果AD患者血清MK水平高于正常对照组（＜0.01）。28例AD患者(71.8%)血清MK表达水平高于界值（566pg/ml），对照组除1例外其他均低于界值（＜0.01)。MK与AD有较强关联性（=0.723，＜0.05），两组MK水平诊断试验显示特异性为0.98，阳性预测值为0.97，阳性似然比32倍，均显示有较大临床诊断价值。AD患者血清MK的高水平组与正常对照组的简明精神状态量表评分结果差异无统计学意义（＞0.05）。结论血清中MK表达水平在AD患者中显著增加，可能与该疾病的病理进程有一定相关性，对AD患者特异性诊断有较高的价值。

阿尔茨海默病；中期因子；生物学标记；诊断试验

中期因子（MK）属于肝素结合生长/分化因子家族，能促进多种细胞的生长和存活[1]，对神经元有保护作用[2]。生理情况下，MK在胚胎期高表达，在成年人脑中几乎检测不到[3]。而在肿瘤发生，炎症和组织细胞修复的过程中，MK的表达均明显增强。阿尔茨海默病（AD），是一种中枢神经系统变性病，其病因及发病机制尚未完全阐明，已有的研究证实其特征性病理改变为淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结。有研究表明AD患者脑部老年斑组织与MK发生免疫反应，还发现MK可以与淀粉样蛋白结合并具有中和细胞毒性作用[4]。本研究用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测AD患者和正常人血清MK水平，以探讨MK与AD的关联性。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2010年11月至2012年12月浙江省象山县中医院收治的AD患者39例，其中男15例，女24例；年龄68～79岁，平均（73.49±5.65）岁；受教育年限（6.78±3.45）年。另选本院同期健康体检者42例为对照组，其中男16例，女26例；年龄70～80岁，平均（75.21±5.39）岁；受教育年限（6.35±3.79）年。两组一般资料差异无统计学意义（＞0.05）。

1.2 方法清晨抽取实验对象的肘静脉空腹血3.0ml，

所有样本均在进院未作治疗前抽取，半小时内以3000r/min离心5min，吸取上层血清于灭菌EP管，置－80℃保存。采用ELISA测定血清MK浓度，操作方法参照人中期因子蛋白酶联免疫试验检测系统说明进行，测试剂盒购自捷克Biovendor公司。MK异常判断界值为566 pg/ml[5]。简明精神状态量表（MMSE）评分方法，受试者受教育程度，文盲≤17分，小学文化≤20分，中学及以上文化≤24分者作为老年痴呆疑似患者，并进行进一步的检查确诊。

1.3 统计方法采用SPSS17.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差表示，两组间均数比较采用检验；非正态分布资料采用秩和检验；计数资料比较采用2检验；关联性分析采用Cramer法。＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

3 讨论

本研究显示，AD患者血清MK表达水平显著升高，提示AD患者脑和血清中MK表达水平增高可能抑制AD患者淀粉样蛋白诱导的细胞凋亡。然而，AD患者血清MK的来源和MK表达水平升高的机制并不清楚，推测AD患者脑组织和血清中MK改变是同步的。另外，有研究表明血管内皮细胞也能释放MK，推测是否为AD患者神经递质异常释放而刺激脑血管内皮细胞释放MK。此外，AD患者在脑细胞功能紊乱前就有可能发生血脑屏障的破坏，而引起MK进入外周血循环使得血清MK水平增高。所以AD患者血清和脑组织中MK表达水平都明显增高，使AD与MK间具较高关联性。

本研究显示两组血清MK检测对诊断AD敏感性较高（72%），尤其是特异性高（97.6%）、误诊率低（2.4%），阳性预测值与验后概率均高（96.6%），阳性似然比为30.2，对AD可能有较高的诊断价值。

表1 两组血清MK含量比较pg/ml

有研究报道乳腺癌、食管癌、胃癌、结肠癌、肝癌、肝外胆管癌及宫颈癌等，与健康对照和良性食管疾病患者等相比血清MK均增高[6]。但胃癌、结肠癌等肿瘤病例是以血清MK500pg/ml为截断界值，其特异性在30%左右。另外人群肿瘤总患病率也相对有限，不过在做AD特异诊断时仍应排除该方面的影响；还有报道70%的恶性肿瘤患者尿液中也可检测到MK值的升高，这也为人们提供了一个新的研究方向。

本文AD患者有71.8%MK表达水平异常，将AD患者分为高MK组和正常MK组，两组结果显示患者血清MK水平的高低与MMSE评分差异无统计学意义（＞0.05）。提示血清MK水平还不能够敏感地反映AD疾病进展及脑功能损伤程度。在反映AD患者疾病的特异性方面还有待做进一步研究。

综上所述，血清MK水平在AD生物学诊断方面可能有较大参考价值，而血清MK水平是否可以成为一个AD标志物，用于疾病诊断和发病风险预测及预后还需做大样本量的进一步深入研究。

[1]Muramatsu H,Zou P,Suzuki H,et al.A4bl-and a6bl-Intrgrins are functionalreceptorsformidkine,aheparin-bindinggrowthfactor[J]. Cell Sci,2004,117(10):5405-5415.

[2]Wada M,KamataM,AizuY,et al.Alteration of midkine expression intheischemicbrainofhumans[J].JNeurol Sci,2002,200(1/2):67-73.

[3]Matsumoto K,Wanaka A,Takatsuji K,et al.A novel family of heparin-binding growth factors,pleiotrophin and midkine,is expressed in the developing rat cerebral cortex[J].Brain Res Dev Brain Res,1994,79(2):229-241.

[4]Monji A,Yoshida I,Tashiro K,et al.Inhibition of A beta fibril for mationandA beta-inducedcytotoxicityby senile plaque-associated proteins[J].Neurosci Lett,2000,278(1/2):81-84.

[5]Shimada H,Nabeya Y,Tagawa M,et al.Preoperative serum midkine concentration is a prognostic marker for esophageal squamous cell carcinoma[J].Cancer Sci,2003,94(7):628-632.

[6]曲杰,黄敏,许方,等.胃癌和结肠癌患者血清MK的定量检测及其临床意义[J].中国实验诊断学,2011,15(2):234-236.

Detection of serum midkine levels in patients with Alzheimer's disease

ZHU Xianzhi,QIU Jianda,LI Zaizhong.(Xiangshan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Xiangshan 315700,Zhejiang,China)

ObjectiveTo explore the correlation of serum midkine(MK)expression level and the pathophysiology of Alzheimer's disease(AD).MethodsSerum MK expression level in patients with AD(n=39)and healthy controls(n=42)were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsSerum MK expression level in patients with AD[(780.11±290.31)pg/ml]were significantly higher than those of healthy controls [(361.58±102.24)pg/ml,P＜0.05].MKhad a strong correlation with the AD(r=0.723,P＜0.05).SerumMKlevels in 28 patients(71.8%)were more than the dividing value(566pg/ml),but none of the controls did.Diagnostic tests revealed high value,high specificity(0.98)and positive predictive value(0.97).There were no significant difference in the MMSE score between the high-MK level group and normal-MK level group in the patients with AD (P＞0.05).ConclusionSerum MK levels were increased in patients with AD compared with those in controls, it may be contribute to the pathophysiology of this disease.

Alzheimer disease;Midkine;Biological markers;Diagnostic test [Modern Practical Medicine,2014,26(4):381-382]

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.003

R741

A

1671-0800(2014)04-0381-02

2013-11-10

（本文编辑：孙海儿）

315700浙江省象山，象山县中医医院（朱仙芝、邱建达）；宁波市康宁医院（李再忠）

李再忠，Email:lzznb@126.com