促红细胞生成素对改善早产儿脑损伤的效果研究

刘后存 闫 平

1.武汉大学基础医学院，湖北武汉430000；2.湖北省随州市妇幼保健院儿科，湖北随州441300

促红细胞生成素对改善早产儿脑损伤的效果研究

刘后存1,2闫 平1

1.武汉大学基础医学院，湖北武汉430000；2.湖北省随州市妇幼保健院儿科，湖北随州441300

目的探讨重组人类促红细胞生成素（EPO）对改善早产儿脑损伤的临床疗效。方法将脑损伤的45例早产儿（男30例，女15例），随机分为治疗组（25例）和对照组（20例）。对照组给予常规治疗，治疗组除常规治疗外，在出生后即给予EPO治疗，每次500 U/kg，每周3次，连续治疗3～4周。测试所有患儿纠正胎龄40周NBNA评分、血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S-100B浓度，监测并比较两组患儿血红蛋白（Hb）、网织红细胞（Ret）和血小板（PLT）、肝肾功能等指标。结果①治疗组NBNA评分正常率为79.81%，高于对照组（38.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）；②治疗组入院第3、7天血清NSE和S-100B均明显低于对照组，差异有统计学意义（均P＜0.05）；③生后3、6个月治疗组MDI[（91.65±6.37）、（96.70±7.34）分]、PDI评分[（87.10±5.56）、（95.80±5.33）分]均高于对照组[MDI：（81.06±10.71）、（87.00±9.37）分；PDI：（81.88±6.68）、（89.69±8.08）分]，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）；④治疗2周后EPO治疗组Hb、Ret水平[（168.30±20.80）g/L、（3.95±0.80）%]明显高于对照组[（150.16±15.14）g/L、（2.66±0.51）%]，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组患儿PLT水平及肝肾功能等指标均在正常范围，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论EPO可保护受损伤神经细胞，促进神经系统损伤修复，在改善早产儿脑损伤预后方面有着积极的作用。

促红细胞生成素；早产儿；脑损伤

近年来随着围生医学及新生儿重症监护技术的不断提高，早产儿尤其是极低出生体重儿存活率大大改善，但早产儿脑损伤发病率也逐年上升，神经系统发育后遗症并未成比例下降。早产儿脑损伤主要表现在脑瘫以及神经功能发育障碍，不仅涉及运动，也涉及到认知和行为，存活的早产儿10%～20%有不同程度的伤残是影响早产儿生命健康和生存质量的重要因素[1]。目前针对早产儿脑损伤的预防与治疗措施均处于探索阶段，未取得令人满意的效果。国内外均在探索更加有效的防治方法。促红细胞生成素（EPO）是人体循环中一种具有促进红细胞生成功能的可溶性糖蛋白，临床上广泛应用于肾性贫血和早产儿贫血，近年来许多研究发现，EPO具有明显的神经营养、神经保护和促进神经生长发育的作用，可作为一种新型的多功能神经保护剂[2]，有效改善早产儿脑损伤预后。加大对EPO改善早产儿脑损伤的研究，有着极其重要的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年5月～2013年12月新生儿科脑损伤的45例早产儿（男30例，女15例）为研究对象，其中胎龄（32.0±2.5）周，出生体质量（1260±328）g。按入院先后次序随机分为治疗组（25例），对照组（20例）。异常判定标准参照第4版《实用新生儿学》有关早产儿脑损伤诊断标准。分娩方式：剖宫产15例，顺产25例，臀助产5例。两组在胎龄、出生体质量、分娩方式、Apgar评分、脑损伤分度之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。纳入标准：其中胎龄≥28周，并且≤36周；出生体重＜2500 g；出生后不超过72 h。剔除标准：并发宫内TORCH感染、严重先天性畸形；先天性心脏病；遗传代谢性疾病；患甲状腺疾病母亲所生的早产儿。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法对分配到治疗组的患儿，与家长进行沟通签署知情同意书，取得家长同意。所有患儿生后均给予常规治疗，即在治疗原发病的基础上，予以呼吸支持、营养支持，维持和稳定正常血气、血压、血糖，补充维生素K，控制输液量、止惊和降低颅内压，应用神经节苷脂营养神经细胞，及时处理早产儿各种并发症。治疗组在此基础上，出生后即使用EPO（上海凯茂生物医药有限公司生产，国药准字：S19991023）采用皮下注射，每次500 U/kg，每周3次，连续治疗3～4周。

1.2.2 新生儿行为神经测定评分所有患儿于纠正胎龄40周时进行神经行为测定，采用鲍秀兰等[3]制订的新生儿行为神经测定（neonatal behavioral and neurological assessment，NBNA）评分标准进行评分[3]，由受过专业训练的同一新生儿专科医师进行评定，在24～26℃室温、安静的环境中进行，包括对早产儿行为能力6项，主动肌张力4项，被动肌张力4项，原始反射3项，一般状况3项，每项评分有三个分度（0、1、2分），总分是40分，评分＜35分为异常。

1.2.3 血清NSE，S-1OOB浓度检测采集所有患儿入院第1、3、7天外周静脉血2 mL进行离心处理，并将血清置于-70℃冰箱保存。采用ELISA法测定血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100B浓度，ELISA试剂盒均由瑞典ABsanptecmedica公司提供，严格按试剂盒说明书进行操作。

1.2.4 智力发育情况采用中国科学院研究所和中国儿童发展中心（children's development center of China，CDCC）共同编制的0～3岁婴幼儿智能发育检查量表[4]（CDCC量表），对所有患儿于胎龄纠正至40周后，3、6个月时对神经系统发育情况进行测定，由专业人员进行检查。CDCC量表分为智力量表和运动量表两部分，智力量表的评分检查包括121个项目，其结果以智力发育指数（mental developmental index，MDI）来表示，运动量表的评分检查包括61个项目，其结果用心理运动发育指数（psycho-moter developmental idex，PDI）来表示。量表发育指数理论分等级：≥130分为非常优秀，120～＜130分为优秀，110～＜120分为中上，90～＜110分为中等，80～＜90分为中下（迟钝），70～＜80分为临界状态，70分以下为智力低下。

1.2.5 不良反应的监测在治疗过程中，密切关注两组早产儿病情变化，分别于治疗前及治疗2周后取静脉血复查血常规监测血红蛋白（Hb）、网织红细胞（Ret）和血小板（PLT）及肝肾功能、血压等指标。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿新生儿行为神经能力测定

治疗组早产儿在纠正胎龄40周时的NBNA评分正常率为79.81%，高于对照组（38.00%），差异有统计学意义（χ2=5.938，P＜0.05）。与对照组比较，治疗组早产儿的NBNA测试评分有了较大的提高。

2.2 两组患儿血清NSE，S-100B蛋白浓度比较

入院时治疗组患儿血清NSE和S-100B浓度水平均高于对照组，但差异无统计学意义（P＞0.05）；入院第3、7天治疗组患儿血清NSE和S-100B浓度均低于对照组，两组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

表1 两组患儿血清NSE及S-100B浓度变化（μg/L，x±s）

2.3 两组患儿3、6个月CDCC量表测智能发育MDI和PDI

在纠正胎龄40周后3、6个月时，治疗组CDCC量表检查MDI[（91.65±6.37）、（96.70±7.34）分]、PDI评分[（87.10±5.56）（95.80±5.33）分]均显著高于对照组[MDI：（81.06±10.71）、（87.00±9.37）分；PDI：（81.88±6.68）、（89.69±8.08）分]，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。实验结果显示，促红细胞生成素对改善早产儿神经行为发育方面成效显著。见表2。

表2 治疗组及对照组患儿3、6个月CDCC比较（分，x±s）

2.4 两组患儿治疗前后血象变化情况比较

治疗2周后，治疗组Hb、Ret水平[（168.30± 20.80）g/L、（3.95±0.80）%]明显高于对照组[（150.16± 15.14）g/L、（2.66±0.51）%]，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后两组患儿PLT水平及治疗前、后肝肾功能指标均在正常范围，差异均无统计学意义（均P＞0.05），治疗过程中未见明显不良反应。见表3、4。

表3 两组患儿Hb、Ret、PLT水平比较（x±s）

表4 两组患儿治疗前后肝肾功能指标变化情况比较（x±s）

3 讨论

早产儿脑损伤是一种较为普遍且发生率逐年上升的疾病。早产儿脑损伤包括脑室周围白质软化（PVL）、脑室周围—脑室内出血（PVH-IVH）、出血后脑积水、缺氧缺血性脑损伤等，存活的早产儿10%～20%有不同程度的伤残，主要表现为脑性瘫痪和轻度神经发育障碍，不仅涉及运动，也涉及到认知和行为，这成为影响我国人口质量的严重隐患。引起早产儿脑损伤的因素很多，发病机制尚不完全清楚，近年研究表明，其与早产儿脑血管发育不完善而导致易损性增加、围生期窒息、缺氧缺血、宫内感染以及免疫学机制等有关[5]。针对早产儿脑损伤发生的病理生理过程，其预防与治疗的主要措施包括：预防细胞内钙离子堆积及其引起的钙超载效应、防治围生期感染和微血管损伤、亚低温疗法、脑源性神经营养因子、激素、自由基清除剂以及谷氨酸受体拮抗剂的应用等[5]，但以上均处于探索阶段，未取得令人满意的效果。

EPO是人体循环中一种具有促进红细胞生成功能的可溶性糖蛋白，临床上广泛应用于肾性贫血和早产儿贫血，近年来研究发现，EPO与EPO受体（EPOR）在脑和许多其他脏器中也有表达，并作为一种多效性的细胞因子发挥促进红细胞生成以外的其他重要功能[7]，具有明显的神经营养、神经保护和促进神经生长发育的作用。已有实验证实，外源性EPO也能通过缺氧损伤后的血脑屏障，增加Bc1-2表达，抑制凋亡，并可增加血管内皮生长因子（VEGF）的表达，来发挥其脑保护作用[8]。

本实验运用外源性EPO对脑损伤早产儿进行治疗，取得了较好的临床效果。鲍秀兰等[3]创立的NBNA能够早期发现新生儿脑功能异常，敏感性强，特异性高，为一种简便实用、经济有效、无创伤的临床评估脑功能的方法。本研究中EPO治疗组患儿在纠正胎龄40周时NBNA评分正常者较对照组明显增多（P＜0.05），提示EPO治疗能改善早产儿脑损伤预后，促进神经系统损伤修复。NSE和S-100B蛋白主要存在于构成中枢神经系统两种主要细胞中，前者以神经元细胞为主，后者以神经胶质细胞为主，当中枢神经系统细胞受损时，NSE及S-1OOB蛋白可释放至脑脊液中，并可经受损的血脑屏障进入血液循环，因此成为目前受到广泛重视的与脑损害相关的神经特异性血清标志物。早期动态监测外周血中浓度可以较敏感反映脑损害的严重程度及干预后的改善情况[9-11]，与对照组比较，EPO治疗组第3、7天血清NSE、S-100B蛋白浓度明显降低（P＜0.05），表明神经元和神经胶质细胞死亡减少，进而证实了EPO可保护受损伤神经细胞，减轻脑神经细胞的损伤程度，促进神经功能的恢复。在生后3、6个月CDCC量表随访中发现，EPO治疗组CDCC量表检查MDI、PDI评分指标均显著高于对照组（P＜0.05），提示EPO对于脑损伤早产儿的神经系统发育有远期影响。治疗过程中两组患儿肝功能、肾功能、血糖、血压均在正常范围，差异无统计学意义（P＞0.05），未见明显不良反应。

综上所述，本研究发现应用EPO可保护受损伤脑细胞，促进神经系统损伤修复，对脑损伤早产儿神经行为发育有促进作用，改善早产儿脑损伤预后。但作为一种新型的神经营养治疗药物，在用药剂量、治疗疗程、远期不良反应以及其神经保护作用的确切机制等方面还有待进一步的观察和分析，大量的临床研究还有待进一步证实。

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Study on the effect of erythropoietin on improving brain injury in preterm infants

LIU Houcun1，2YAN Ping1
1.School of Basic Medical Sciences,Wuhan University,Hubei Province,Wuhan430000,China;2.Department of Pediatrics,the Maternal and Child Health Hospital of Suizhou City,Hubei Province,Suizhou441300,China

ObjectiveTo study the clinical effects of recombinant human erythropoietin(EPO)in the improvement of the brain injury in preterm infants.Methods45 infants with brain damage(30 male and 15 female)were randomly divided into treatment group(25 cases)and control group(20 cases).The control group was given conventional treatment,treatment group was given conventional medical treatment in addition,that EPO treatment was offered after the birth 500 U/ kg at a time,3 times a week,3-4 weeks of continuous treatment.The NBNA scoring for children with corrected gestational age 40 weeks,serum neuron-specific enolase(NSE),S-100B concentration,hemoglobin(Hb),reticulocytes(Ret) and platelets(PLT),kidney and liver function and so on were monitored and compared.Results①The normal rate of NBNA scoring in treatment group was 79.81%,which was higher than that of the control group(38.00%),the difference was statistically significant(P＜0.05);②the serum NSE and S-100B of treatment group in the 3 and 7 days after treatment were obviously lower than those of the control group,the differences were statistically significant(all P＜0.05);③postnatally 3 and 6 months the MDI[(91.65±6.37),(96.70±7.34)scores]and PDI scores[(87.10±5.56),(95.80± 5.33)scores]of treatment group were higher than those of control group[MDI:(81.06±10.71),(87.00±9.37)scores;PDI: (81.88±6.68),(89.69±8.08)scores],the differences were statistically significant(P＜0.05 or P＜0.01);④2 weeks after treatment,the Hb and Ret level of treatment group[(168.30±20.80)g/L,(3.95±0.80)%]were obviously higher than those of control group[(150.16±15.14)g/L,(2.66±0.51)%],the differences were statistically significant(all P＜0.05), the PLT level and the liver kidney function indicators index of the two group were in normal range,there was no statistically significant difference(P＞0.05).ConclusionEPO can protect injury nerve cells,promote the repair of nervous system injury,and which has a positive role to improve the prognosis of brain injury in preterm infants.

Erythropoietin;Preterm infants;Cerebral injury

R742.3

A

1673-7210（2014）04（c）-0060-04

2014-01-10本文编辑：任念）

刘后存（1970-），男，副主任医师；研究方向：儿内科。