结缔组织生长因子在胃癌中的临床病理分析※

毛正发 党胜春 范 昕 朱 霆 瞿建国 王旭青

胃癌是最常见的消化系肿瘤之一，其在肿瘤引起的死亡中居第2位[1]。但是约有65%的患者在确诊时有局部及远处转移，减少了根治性切除的机会，其5年生存率依然很低，尤其是进展期胃癌，只有5%～15%[2]。

虽然胃癌的治疗手段有了很大的进步，但是胃癌复发和转移似乎是不可避免的。胃癌术后的复发、转移是患者主要的致死原因，传统的治疗方法效果十分有限。肿瘤的侵袭转移是一个复杂的病变过程，涉及多个基因的改变。有研究显示[3]，在复发和转移的胃癌病灶组织中，多种基因表达异常，结缔组织生长因子（CTGF）是其中一种。CTGF是CCN蛋白家族成员之一，CTGF的表达水平与人类多种组织的恶性肿瘤的发生、进展、浸润转移及其预后密切相关。近年来其在肿瘤细胞增殖，迁移、凋亡及化疗耐药性中的作用逐渐被重视。

本研究中检测CTGF在胃癌中表达并且分析了其与临床病理参数及患者预后的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 CTGF抗体购自美国Santan Cruz公司，β- actin购自美国Sigma公司，收集江苏大学附属医院2009年～2011年病理诊断为胃癌的手术切除标本73例，其中男45例，女28例，年龄43～73岁。距肿瘤5 cm以上正组织取为对照组织（病理证实非肿瘤组织）。所有患者术前均未行放、化疗。将本组胃癌按大小分为＜5 cm和≥5 cm。胃癌组织学类型按Lauren 类型分为肠型和弥漫型；癌细胞分化为高、中、低，胃癌的临床分期根据美国癌症联合委员会（AJCC）的TNM分期为Ⅰ～Ⅳ期。

1.2 方法 免疫组织化学：胃癌组织和正常胃组织固定脱水石蜡包埋后4 μm厚的连续石蜡切片。采用ABC法进行免疫组织化学的检测，苏木精复染核。免疫球蛋白G（IgG）代替CTGF做一抗，检测CTGF的特异性。阳性定位于胃癌细胞胞浆或胞膜，细颗粒状。胃癌细胞CTGF表达强度判断：染色阳性细胞＜5%为0分，11%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分。染色强度淡黄为1分，黄为2分，棕黄为3分。阳性细胞数与染色强度相乘，≤6分低表达，＞6 分为高表达。

1.3 统计学分析 采用SPSS 16.0统计软件对数据进行处理，采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌组织中CTGF的表达检测及其临床意义 胃癌组织中免疫组织化学结果显示，与对照的正常组织相比，肿瘤组织中的免疫染色强度更强。在73例胃癌标本中，CTGF的高表达39例，低表达34例，高表达率53.4%。CTGF在胃癌中高表达与肿瘤组织分化、Lauren分型及淋巴结转移有明显相关性（P＜0.05）。但是其表达与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及转移无明显相关性（P＞0.05），见表1。

表1 CTGF的表达与胃癌患者临床病理参数的关系(n=73)

2.2 Kaplan-Meier生存分析 CTGF高表达的患者共39例，平均生存时间（33±4）个月，五年生存率28.2%（11/39），CTGF低表达患者34例，平均生存时间（42±4）个月，五年生存率52.9%（18/34）。两者比较差异有统计学意义（P=0.035）。

3 讨论

CTGF是一个富含半胱氨酸的蛋白，属于CCN蛋白家族。虽然CTGF的特异性的受体未被证实，有报道[4]CTGF参与了多个生长因子信号通路，包括转化生长因子β（TGFβ）、成骨因子（BMP）及分泌性糖蛋白（wnt）。CTGF也可以与细胞表面的整合素相结合。其参与了肿瘤细胞的增殖、粘附、迁移、血管形成及转移。越来越多的证据显示CTGF在肿瘤形成中发挥重要的作用。在乳腺癌及食管癌中均发现其表达增高，相反的，在结肠癌中其表达下降，并且在此肿 瘤细胞中，通过表达CTGF可抑制肿瘤细胞的侵袭和转移[5]。这种在不同的肿瘤中CTGF表达的差异性可能是由于CTGF表达调控是细胞类型特异性的并且在不同的肿瘤环境中CTGF有不同的功能。

本研究中结果显示，与正常的胃组织相比，胃癌组织CTGF的表达水平明显增加，提示CTGF的高表达与胃癌中的恶性表型相关。进一步的分析显示高表达的CTGF与肿瘤组织的分化、Lauren分型及淋巴结转移有明显相关性，提示其可能参与了的胃癌的分化过程及转移。生存分析显示，CTGF高表达组与低表达组的生存率之间有明显差异性。CTGF的高表达与生存率呈负相关。但是在结肠癌中，有结果显示在淋巴结转移或Ⅲ/Ⅳ肿瘤患者标本中，其表达下降；高表达的CTGF的患者比低表达的患者5年生存率要高，提示CTGF的表达与生存率呈正相关。进一步说明了CTGF在不同肿瘤环境中的功能的差异。

综上所述，CTGF在胃癌组织表达升高并且与患者的不良预后相关。但是CTGF促进肿瘤进展的具体分子机制有待进一步研究。

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