10岁犬瘟热病例的诊断
2014-03-11包喜军刘文春叶俊华
包喜军,刘文春,叶俊华
(1.公安部南京警犬研究所,江苏 南京210012;2.公安部南昌警犬基地,江西 南昌330100)
犬瘟热是犬的急性传染病之一,本病由犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)引起,一年四季发病,冬春季多发,该病毒可通过空气飞沫传播、直接或间接接触传播等,本病的临床表现主要包括:精神沉郁,流脓性鼻涕,眼睛分泌物增加,咳嗽,听诊肺部有杂音,体温呈双相热型,鼻镜和足垫角质化过度,部分患犬出现肌肉痉挛和后肢瘫痪等神经症状[1]。该病毒主要侵害3~6月龄的幼犬,偶见于成年犬,但成年犬多可耐过,在临床上老龄犬发生该病的报道较少。笔者近期遇到一例10岁犬抽搐的病例,对该病例除进行常规的胶体金试纸快速诊断外,还进行了动物回归试验,上述结果均证明该病为犬瘟热。
1 材料
1.1 病例来源 病例来自公安部南昌警犬基地犬病医院,杂交犬,雌性,10岁,体重约10 kg。
1.2 试剂及仪器 CDV胶体金检测试纸(BIO⁃INDIST),血细胞分析仪(IDEXX LaserCyte),血液生化分析仪(IDEXX VETTEST)。
1.3 试验动物 健康罗威纳幼犬10头,3~6月龄,未免疫,来自公安部南昌警犬基地。
2 方法
2.1 临床检查 问诊患犬的发病时间,检查患犬的临床症状。
2.2 胶体金试纸快速诊断 用无菌棉签蘸取眼睛、鼻分泌物,将棉签放入装有稀释液的样品管中充分搅拌,用吸管吸取搅拌后的稀释液,滴注3~4滴稀释液于CDV胶体金检测试纸样品孔中,待10min后观察结果。
无菌采集血液1mL,离心,吸取血清3~4滴滴注于CDV胶体金检测试纸样品孔中,待10min后观察结果。
2.3 实验室检验 常规采集前肢头静脉血,进行血常规和部分生化指标检测。
2.4 动物回归试验 将10头幼犬分为两组,试验一组7头犬,试验二组3头犬。
将采集到的患犬的口腔、鼻腔和眼睛分泌物稀释,将稀释液直接滴入试验一组幼犬鼻腔,每只犬滴注0.5mL,第二天再滴注一次;试验二组幼犬只滴注生理盐水。
连续观察并记录两组犬的临床症状变化,在第5天和第10天分别采集犬鼻腔和眼睛分泌物用CDV胶体金检测试纸检测分泌物中有无病毒抗原。
3 结果
3.1 临床检查及快速诊断 来院就诊时病程已两日,流脓性鼻涕,眼睛分泌物增加,可视黏膜潮红,体温39.6℃,四肢抽搐、不能站立,饮食欲废绝。
眼睛、鼻腔分泌物CDV胶体金检测试纸检测呈阳性,血液CDV胶体金检测试纸检测呈阳性。
3.2 实验室检验 血常规检查表明炎性细胞升高(表1),部分生化指标结果表明患犬肝脏功能有异常(表2)。
3.3 动物回归试验 试验一组幼犬在接种后3~5天相继出现类感冒症状,表现为精神沉郁,流鼻涕,眼睛分泌物增加,咳嗽,体温升高等;在第5天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物,经CDV胶体金检测试纸检测均呈阴性,在第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物,经CDV胶体金检测试纸检测均呈阳性。试验二组幼犬在观察期内无明显病理性临床症状;在第5天和第10天采集所有犬的鼻腔和眼睛分泌物,经CDV胶体金检测试纸检测均呈阴性。
表1 患犬血常规检查
表2 患犬血液生化检查
4 结论
综合对患犬的临床检查、胶体金试纸快速诊断、实验室检验和动物回归试验,确诊该病例为犬瘟热。
5 讨论
根据对发病机理的研究,犬瘟热病毒的潜伏期一般为3~5 d,在病毒的潜伏期内,感染犬一般无明显临床症状,随后则出现犬瘟热典型症状,如:出现双相热型发热,眼、鼻有卡他性或化脓性分泌物,在第二次发热表现呕吐和腹泻,呼吸道有卡他炎症,有时发展成肺炎,鼻镜和足垫角质化过度,有神经症状[1]。在本试验中,试验一组幼犬大部分在接种后3~5 d相继出现似犬瘟热的感冒症状,本试验结果证明了CDV可以通过身体的所有分泌物排到体外,尤其是呼吸道的分泌物,将分泌物对易感犬实施各种途径的试验性接种,均可使犬发生具有临床症状的感染[1-2];在用CDV胶体金检测试纸对试验犬分泌物进行检测时,在第5天的分泌物中未检测到病毒,在第10天对分泌物检测时呈阳性,表明在第5天时病毒并未出现在上皮细胞中,在第10天时上皮细胞已有病毒存在,此研究结果与犬瘟热病毒在感染后最初主要在淋巴系统中增殖,随后出现于支气管淋巴结、扁桃体内和上皮细胞的研究结果相一致[1]。
CDV引起的免疫会持续时间很长,但不会终生免疫[2]。在本试验中,患犬年龄已达10岁的老龄犬,问诊患犬主人,该犬在1岁内时曾进行CDV疫苗接种,以后则再未接种该疫苗,在该年龄发病,表明患犬已无对CDV的免疫,由此可见,CDV不会引起终生免疫的理论是正确的,但具体的免疫保护期则有待于进一步研究。
在犬瘟热疾病发展过程中,病犬的肺可能不被感染,但在致死性病例中,患犬经常因为继发细菌感染而引起支气管肺炎[1],所以当发生感染时,患犬的血常规检查则表现明显的炎性细胞增多症状,该病例的血常规呈现炎性细胞增多,表明患犬已经继发细菌感染,所以在对该病例的治疗时应注重考虑炎症的控制;通常在患犬瘟热时,犬的血清学检查一般无特异,在疾病的初期或比较严重时,会出现白蛋白降低或球蛋白升高[2],但在该病例的部分血液生化指标检测时出现肝功能指标升高的现象,这可能是由于其他疾病所导致,此症候的出现是否与犬瘟热具有相关性需要进一步研究。
胶体金试纸快速诊断技术是一种基于单克隆抗体的胶体金免疫层析诊断技术,其在与巢式PCR进行比较时,敏感性(89.7%和85.7%)和特异性(94.6%和100%)略低[3],但因其使用方便、造价低廉、特异性高、检测时间短等,所以在临床上得到广泛应用。
[1]殷震,刘景华.动物病毒学[M].2版.北京:科学出版社,1997:756-762.
[2]施振声.译.小动物临床手册[M].4版.北京:中国农业出版社,2004:1096-1098.
[3]Dong-Jun An,Tae-Young Kim,Dae-Sub Song,et al.An immu⁃nochromatography assay for rapid antemortem diagnosis of dogs suspected to have canine distemper[J].Journal of Virological Meth⁃ods,2008,147(2):244-249.