黄岩紫山药炭疽病病原菌培养条件

2014-03-10赵永彬王娇阳陈伟强唐兴国

浙江农业科学 2014年7期

关键词：黄岩炭疽病孢子

赵永彬，王娇阳，陈伟强，唐兴国

（浙江省台州市农业科学研究院，浙江临海 317000）

黄岩紫山药炭疽病病原菌培养条件

赵永彬，王娇阳，陈伟强，唐兴国

（浙江省台州市农业科学研究院，浙江临海 317000）

对自主分离的黄岩紫山药炭疽病病原菌开展培养条件研究。结果表明，PYA培养基在28℃、pH值4条件下病原菌菌落生长最好，直径为8.46cm，而PJJ培养基（PDA+山药煎汁+酵母膏培养基）在28℃、pH值5.6条件下，产孢量达到最高水平，为34.5×106个·mL-1。通过综合考虑，以PJJ培养基为首选培养基。

紫山药；炭疽病；病原菌；培养条件

炭疽病是山药主要病害［1］。黄岩紫山药又称紫莳药，为山药地方品种，其肉质深紫色，市场欢迎度高［2］。近年随着生产面积不断扩大，炭疽病已成为主产区产业发展的瓶颈。以从黄岩紫山药中分离的炭疽病菌为研究对象，通过对其培养条件进行研究，为进一步开展紫山药炭疽病防控奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株从当地黄岩紫山药中分离出来，经柯赫法则验证，为炭疽病病原菌。

1.2 处理设计

将病原菌在PDA培养基上28℃暗培养6d后，用直径5mm的打孔器在菌落边缘打取菌饼接种。

培养基筛选试验。培养基共设10种，分别为PJ（PDA+山药煎汁）、查氏、GM、PYA、MM、燕麦、PJJ（PDA+山药煎汁+酵母膏0.5g）、PCA、SJ（山药煎汁加每升20g琼脂）及PDA培养基，以清水琼脂培养基为对照（CK）。

山药煎汁。将新鲜山药茎叶200g用蒸馏水煮沸30min后，定容至1000mL。其他涉及山药煎汁的培养基，均用该溶液配制。

培养温度筛选试验，设4个温度处理，分别为20℃，25℃，28℃，32℃。培养基采用前期试验所筛选出的对菌落和孢子生长较好的培养基。

pH值试验。设5个pH值梯度，分别为3，4， 7和9，以及原培养基pH值（即不作调整，pH值5.6）。

培养基种类同温度试验。培养条件为28℃暗培养。

接种后将培养皿密封倒置，于恒温培养箱中暗培养，逐日观察菌落生长情况。6d后测量菌落生长情况，用十字交叉法测量菌落直径；10d时用血球计数板对孢子进行计数，方法参照王洪波等［3-6］，并稍作改动。每处理重复3次。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对病原菌菌落生长和产孢的影响

检测发现（表1），病原菌在PJJ培养基上生长最好，菌落直径达8.4cm；其次是PYA培养基，而在燕麦培养基上生长最差（CK除外），且菌落最薄。而PJJ培养基在产孢方面也表现最好，为34.50×106个·mL-1。因此可考虑将PJJ做为该病原菌的生长和产孢培养基。结合各培养基成分与病原菌生长情况推断，山药茎叶中含某些有利于该病菌繁殖的成分，也是山药易感染炭疽病的原因之一。

2.2 不同温度对病原菌菌落生长和产孢的影响

从上述试验中筛选出3种培养基，分别为PYA，PJJ，PDA培养基，以此进行温度试验。

表2显示，病原菌接种到3种培养基上后，在4种温度条件下，28℃表现最好，是该病原菌的最适生长温度。

表1 不同培养基对菌丝生长和孢子形成的影响

表2 不同温度对菌丝生长和孢子形成的影响

2.3 不同pH值对病原菌菌落生长和产孢的影响

表3表明，该菌在不同培养基上，随pH值变化，有不同的表现。

表3 不同pH值对菌丝生长和孢子形成的影响

当pH值为3时，在PDA培养基上不能生长，在PYA和PJJ培养基上虽能生长，但不能产孢。当pH值为4时，菌落直径以PYA表现最好，达8.46cm；但从产孢角度看，PJJ培养基在不对pH进行调整情况下，产孢量最好，达34.5×106· mL-1。综合考虑，不进行pH值调整，即各培养基pH值5.3～5.6，均有利于菌落的生长及产孢。