膜联蛋白A2和波形蛋白在子宫腺肌病中的研究进展

冯 静(综述)，葛 华(审校)

(1.包头医学院，内蒙古 包头 014010； 2.包头医学院第一附属医院妇产科，内蒙古 包头 014010)

子宫腺肌病(adenomyosis,AM)是妇科常见的具有恶性肿瘤行为的良性病，多发生于30～50岁经产妇。据调查，AM主要发生在围绝经期的女性：在绝经前、更年期和绝经后所占的人数比例分别是80%、17%和3%[1]。AM是指子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层,其病理特征为异位内膜在子宫肌层多呈弥漫性生长，少数腺肌病病灶呈局限性生长形成结节或团块，但与周围肌层无明显界限。该病的临床表现主要为经量过多，经期延长和逐渐加重的进行性痛经，严重影响患者的工作和生活，而且保守治疗效果多不满意，最终以子宫切除为结局。目前尚不明确其病因及发病机制。近年来，国内外相继报道膜联蛋白A2及波形蛋白在恶性肿瘤中的异常表达。

1 膜联蛋白A2

1.1膜联蛋白A2的生物学特性 膜联蛋白是一类由Ca2+介导的具有磷脂结合特性的膜蛋白质超家族。1979年Rade和Martin首先发现膜联蛋白A2，之后学者们又陆续发现了许多其他成员，1990年将这类蛋白正式命名为膜联蛋白家族。目前发现的该家族成员约160种以上，包括真菌、原生生物、高等植物及高等脊椎动物等超过65个不同种属，可以分为A～E共5个组。其中，脊椎动物细胞中的膜联蛋白成员为膜联蛋白A家族，一共有13个成员即A1～A13[2]。

膜联蛋白A2又名p36、LIP2、LPC2等，最早是在Rous肉瘤病毒转化成的鸡胚胎成纤维细胞中发现，在人体细胞中以单体、异二聚体和异四聚体三种方式存在。一分子3-磷酸甘油酸激酶和一分子膜联蛋白A2结合成异二聚体，二分子钙结合蛋白S100A10(p11)和其每侧对称连接一分子的膜联蛋白A2组成异四聚体。膜联蛋白A2是由339个氨基酸组成，相对分子质量约36×103，包括一个相对分子质量为3×103的N端结构域和一个相对分子质量为33×103的C端结构域。人类的膜联蛋白A2基因定位于15q21～q22,长约40 kb，而仅1.4 kb是编码基因，其结构基因由13个外显子和12个内含子组成。目前有3个不同的转录异构体和3个有显著转座子特征的膜联蛋白A2假基因被发现，这3个假基因分别定位于第4号染色体的q31、第9号染色体的p13和第10号染色体的q21～22[3]。

膜联蛋白A2主要存在于人内皮细胞、单核巨噬细胞、神经细胞和一些肿瘤细胞，高表达于增生和转化的细胞，低表达于终末分化的细胞。膜联蛋白A2的主要生物学功能有：参与形成生物膜和离子通道、参与胞吞胞吐作用、稳定细胞骨架、参与合成DNA及细胞增殖、作为RNA结合蛋白等，这些均属细胞内的功能；细胞外的功能有：纤溶酶原的激活、促进破骨细胞的形成和骨的重吸收、作为细菌及病毒的识别位点和锚定蛋白等[4]。膜联蛋白A2与多种疾病相关，如心脑血管疾病、炎症性疾病、内分泌疾病、血液病、皮肤病和肿瘤等。近年来研究最多的是其与恶性肿瘤的关系，如膜联蛋白A2的上调与结直肠癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、胰腺癌、急性早幼粒细胞白血病和肾细胞癌等密切相关，而其下调与食管鳞状癌、前列腺癌、鼻咽癌和鼻窦腺癌等有关[5]。

许多不同类型的肿瘤细胞表面存在膜联蛋白A2和S100A10组成的异四聚体，其在肿瘤转移方面可能产生如下作用：①在Src激酶等因子诱导下，启动Rho/ROCK/LIMK/Co filin通路或直接调节F肌动蛋白应力纤维的解聚。与黏附分子相互作用，在细胞表面形成黏附分子-膜联蛋白A2/p11-F肌动蛋复合体，调节不同时期肿瘤细胞的黏附和去黏附，从而调控其浸润及转移等细胞骨架方面的行为[6]。②通过和抗黏附分子相互作用，减弱肿瘤细胞对细胞外基质成分的黏附，并刺激肿瘤细胞释放更多蛋白酶水解细胞外基质[7]。③通过与血管形成因子，如血管内皮生长因子及S100A4相互作用促进血管形成，在肿瘤细胞侵犯周围组织中发挥作用[8]。④与内皮细胞分泌的组织型纤溶酶原激活物及其他各因素共同作用，加速纤溶酶原生成纤溶酶，进一步激活酶原(pro-MMPs)为活化的基质金属蛋白酶，诱导胞外基质重构，促进血管生成及肿瘤浸润转移[9]。

1.2膜联蛋白A2与AM 2012年Zhou等[10]研究发现，在AM异位内膜中，膜联蛋白A2呈高表达并与上皮-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的标记紧密相关。接着在体外AM的模型中，试验分析显示雌激素可显著上调膜联蛋白A2并诱导EMT。进一步的实验表明，通过β联蛋白/Tcf信号相关方式，膜联蛋白A2发挥入侵和转移的潜能；通过激活缺氧诱导因子1a/血管内皮生长因子A信号通路，膜联蛋白A2在局部病变促进血管生成的能力加强。另外，膜联蛋白A2在异位内膜中的表达还与患者的痛经程度相关，小鼠模型实验中抑制膜联蛋白A2可有效地减弱因AM引起的痛经[10]。

2 波形蛋白

2.1波形蛋白的生物学特性 波形蛋白主要存在于中胚层起源的细胞中，如成纤维细胞、内皮细胞和白细胞等，是间质细胞中最重要的中间纤维，并与微管、微丝一同构成细胞骨架，从而维持细胞的完整性[11]。波形蛋白由464个氨基酸残基组成，相对分子质量约为57×103。编码人的波形蛋白基因位于染色体10p13，其DNA全长约10 kb，cDNA全长约1848 bp，包含9个外显子，开放读码框架为1401 bp。其序列有很高的一致性，说明进化上是保守的[12]。

波形蛋白的生物学功能主要有：①维持细胞形态完整性；②影响细胞黏附和迁移；③参与细胞信号转导；④调节细胞凋亡；⑤调节基因组DNA的表达；⑥参与病毒感染；⑦甲基化水平可作为癌症的诊断指标等[12-14]。组织病理学诊断中常将波形蛋白抗体作为间叶性标志，与其他蛋白联合使用，达到鉴别肿瘤细胞分化起源的目的。例如常与结蛋白、细胞角蛋白及白细胞共同抗原等联用，以鉴别肌源性肿瘤、上皮性肿瘤及淋巴瘤等[15-16]。

近年来，越来越多的实验表明，波形蛋白不仅在间叶细胞中表达，而且在上皮细胞中亦有表达，如肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌及鼻咽癌[17-21]等，研究发现其侵袭和转移的过程中均有EMT发生。EMT是指上皮细胞在一定条件下向间质细胞表型转化的过程。在此过程中，上皮标志物上皮钙黏素等表达下调，而间质标志物波形蛋白等表达上调。波形蛋白表达上调的可能机制:①有学者证实，GC盒能与转录因子Sp1、Sp3和c-Jun等结合，从而提高波形蛋白的表达。之后，又发现转化生长因子β及其相关信号分子通过GC盒可以对波形蛋白的表达起调节作用[22]。②Zheng等[23]研究发现，核因子κB与GGGGCTTTCC序列结合能力增强时，波形蛋白表达增高，反之，其表达降低[23]。③有实验表明，JAK激酶-信号转导及转录激活因子3通路可被表皮生长因子或白细胞介素6激活,从而使卵巢癌细胞中波形蛋白上调[24]。

2.2波形蛋白与AM 1998年Song等[25]发现，随着月经周期的变化，波形蛋白在AM的在位内膜和异位内膜出现周期性表达。2010年有学者对81例AM标本和19例正常子宫内膜标本进行免疫组织化学发现，波形蛋白在AM异位内膜的表达显著高于在位内膜(85.2% vs 71.6%,P=0.036)，与此同时上皮钙黏素的表达则相反，表明EMT发生在AM[26]。2012年Zhou等[10]用免疫印迹法在研究AM的试验中亦得出相同结论。

3 展 望

近年来，AM的发病率有上升趋势且发病年龄呈年轻化，而目前关于AM的病因及发病机制尚不十分清楚，因此其治疗效果多不理想。虽然子宫切除是最常用、最有效的方法，但仅适用于年龄较大且无生育要求的患者。膜联蛋白A2和波形蛋白在恶性肿瘤的浸润与转移中发挥重要作用。AM尽管为良性病，但却被认为具有恶性肿瘤的行为。因此，进一步研究探索膜联蛋白A2和波形蛋白在AM发生、发展中的作用，将可能为其临床治疗提供新的理论依据。

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