黄花三宝木化学成分研究*

2014-03-06覃其昶何翊黄光影黄荣韶李良波

医药导报 2014年10期

关键词：分子式三氯甲烷柱层析

覃其昶,何翊,黄光影,黄荣韶,李良波

(1.广西大学农学院,南宁 530004;2.广西壮族自治区马山县农业局,马山 530600)

黄花三宝木化学成分研究*

覃其昶1,何翊1,黄光影2,黄荣韶1,李良波1

(1.广西大学农学院,南宁 530004;2.广西壮族自治区马山县农业局,马山 530600)

目的研究广西黄花三宝木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)的化学成分。方法对广西黄花三宝木的枝叶乙醇提取物的石油醚萃取部分进行色谱分离,用波谱方法和理化性质鉴定各化合物的结构。结果分离得到10种化合物,分别为十四碳烷醇、1-烯-3-酮-白桦脂酸甲酯、胆甾烷-4-烯-3-酮、3β-羟基-4-烯-胆甾烷、十八碳-9, 12-二烯酸、克罗烷-4,11-二烯-17-酸甲酯、11α-羟基贝壳杉烷-16-烯、麦角甾烷-5-烯-7-酮、9-烯-齐墩果酸乙酯、3-乙酰基-9烯-齐墩果酸。结论10种化合物均为首次从黄花三宝木中分离得到。

黄花三宝木;化学成分;三萜

黄花三宝木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)属于大戟科三宝木属(Triginistemon genus)植物,是广西特有的药用植物[1]。三宝木属植物在泰国和我国是常用的民间药[2],在泰国,Trigonostemon reidioides已用作解毒剂、祛痰、润肠通便剂以及外用防腐剂[3],孟仑三宝木(Trigonostemon lutescens.Lii Y.T. Chang)在云南被当作草药用于治疗哮喘、腹泻等[4]。从三宝木属植物分离出多种化合物,如生物碱类[5]、二萜类[2,6]、菲类[7]等。研究表明,三宝木属植物具有多种药理活性,如细胞毒活性[6]、抗病毒活性[8]、灭蚤杀螨活性[6,9]、抑菌活性[7]等。笔者对黄花三宝木枝叶乙醇提取物的石油醚萃取部分进行分离、鉴定得到10种化合物,均为首次从该属植物中分离得到。

1 仪器与材料

1.1 仪器 VNMRS 600MHz磁共振光谱仪(美国Varian公司),ESQUIRE HCT质谱仪(美国Bruker. Daltonics公司),ABOROTA 4000型旋转蒸发仪(德国Heidolph仪器公司),薄层色谱用荧光硅胶板GF254、200～300 μm柱层析硅胶(青岛海洋化工厂),RP-18 40～60 μm反相硅胶(Merck公司),凝胶柱层析材料Sephadex LH-20(Pharmacia公司)。

1.2 材料黄花三宝木的新鲜枝叶于2011年4月采于广西壮族自治区崇左市,经广西植物研究所刘演研究员鉴定为大戟科三宝木属植物黄花三宝木(Trigonostemon lutescensY.T.Chang et J.Y.Liang)。植物标本保存于广西大学农学院。

2 方法与结果

2.1 提取分离取风干、粉碎黄花三宝木枝叶30 kg,用工业乙醇回流提取3次,每次1 h,过滤、减压浓缩,得到浓缩膏加水悬浮后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,减压浓缩得到石油醚萃取物475 g。将石油醚萃取物经硅胶柱层析,以石油醚-乙酸乙酯[(100∶0)～(0∶100)]梯度洗脱,得到4个流分(Fr 1,Fr 2,Fr 3,Fr 4)。Fr 3(78 g)经反相硅胶柱层析,以甲醇-水[(40∶60)～(100∶0)]梯度洗脱得到3个流分,Fr3-1、Fr3-2、Fr3-3。Fr3-1先经反相硅胶柱层析,以甲醇-水[(30∶70)～(100∶0)]梯度洗脱,再经硅胶柱层析,以石油醚-丙酮[(60∶1)～(0∶1)]梯度洗脱得到化合物5(80 mg)。Fr3-2先经硅胶柱层析,以石油醚-丙酮[(500∶1)～(1∶1)]、石油醚-乙酸乙酯[(60∶1)～(10∶1)]依次梯度洗脱,再经反相硅胶柱层析,以甲醇-水系统[(30∶70～100∶0)]洗脱,最后经凝胶柱层析,以甲醇-三氯甲烷(1∶1)洗脱,得到化合物1(60 mg)、化合物2(24 mg)、化合物3(105 mg)、化合物4(43 mg)、化合物6(90 mg)、化合物7(100 mg)、化合物8(34 mg)、化合物9(40 mg)。Fr3-3先经凝胶柱层析,以甲醇-三氯甲烷(1∶1)洗脱,再经硅胶柱层析,以石油醚-丙酮系统[(100∶1)～(1∶1)]梯度洗脱,最后重结晶得到化合物10(18 mg)。

2.2 结构鉴定结果

2.2.1 化合物1 白色细针晶,(三氯甲烷-甲醇), ESI-MS(+)m/z:215[M+H]+,结合碳氢谱推测其分子式为C14H30O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:3.57 (2 H,J=6.6 Hz,H-1),1.50(2 H,m,H-2),1.18～1.28(22 H,br),0.82(3 H,J=7.2 Hz,H-14);13CNMR(CDCl3,150 MHz)δ:62.1(t,C-1),31.8(d,C-2),24.7(t,C-3),28.9(t,C-4～C-11),31.0(t,C-12), 21.7(t,C-13),13.1(q,C-14)。以上理化性质和波谱数据与文献[10]报道十四碳烷醇一致。

2.2.2 化合物2 白色细针晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:453[M+H]+,分子式为C31H46O3。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:6.67(1 H,m,H-2), 5.53(1H,d,J=10.8 Hz,H-1),4.86(2 H,m,H-29), 3.57(3 H,s,H-OCH3),0.73(3 H,s,H-23),0.77 (3 H,s,H-24),0.83(3 H,s,H-25),0.90(3 H,s,H-26),0.93(3 H,s,H-27),0.99(3 H,s,H-29);13C-NMR (CDCl3,150 MHz)δ:135.1(d,C-1),135.0(d,C-2), 200.8(s,C-3),40.8(s,C-4),36.2(d,C-5),52.4(t,C-6),40.0(t,C-7),42.6(s,C-8),39.0(d,C-9),41.7 (s,C-10),36.3(t,C-11),34.6(t,C-12),48.0(d,C-13),44.6(s,C-14),34.0(t,C-15),26.9(t,C-16),56. 5(s,C-17),49.9(d,C-18),56.9(d,C-19),149.6(s, C-20),20.4(t,C-21),16.9(q,C-22),14.7(q,C-23), 16.1(q,C-24),16.3(q,C-25),17.0(q,C-26),24.9 (q,C-27),173.1(s,C-28),31.3(q,C-29),110.1(t, C-30),50.4(q,C-OCH3)。以上理化性质和波谱数据与文献[11]报道1-烯-3-酮-白桦脂酸甲酯一致。

2.2.3 化合物3 白色细长针晶(三氯甲烷-甲醇), ESI-MS(+)m/z:385[M+H]+,分子式为C27H44O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.69(1 H,s),0.91(6 H,d,J=7.2 Hz),0.96(3 H,d,J=7.2 Hz),1.02(3 H, s),1.04(3 H,s);13C NMR(CDCl3,150 MHz)δ:34.7 (t,C-1),38.6(t,C-2),198.7(s,C-3),122.7(d,C-4), 170.8(s,C-5),33.0(t,C-6),31.9(t,C-7),55.8(d,C-8),56.0(d,C-9),42.6(s,C-10),31.0(t,C-11),27.2 (t,C-12),38.6(s,C-13),53.8(d,C-14),25.0(t,C-15),23.2(t,C-16),45.8(d,C-17),17.7(q,C-18), 18.8(q,C-19),36.1(d,C-20),16.4(q,C-21),22.0 (t,C-22),20.0(t,C-23)32.8(t,C-24),35.6(d,C-25),11.0(q,C-26,27)。以上理化性质和波谱数据与文献[12]报道中胆甾烷-4-烯-3-酮一致。

2.2.4 化合物4 无色细针晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:387[M+H]+,分子式为C27H46O。1H-NMR (CDCl3,600 MHz)δ:5.18(1 H,d,J=7.8 Hz),0.91 (6 H,d,J=7.2 Hz),0.96(3 H,d,J=7.2 Hz),1.02 (3 H,s),1.04(3 H,s);13C-NMR(CDCl3,150 MHz) δ:42.4(t,C-1),39.8(t,C-2),70.7(d,C-3),120.6 (d,C-4),141.4(s,C-5),37.3(t,C-6),33.8(t,C-7), 55.8(d,C-8),56.0(d,C-9),42.6(s,C-10),28.1(t, C-11),25.8(t,C-12),38.6(s,C-13),53.8(d,C-14), 22.8(t,C-15),23.2(t,C-16),45.8(d,C-17),19.0(q, C-18),19.1(q,C-19),36.1(d,C-20),18.4(q,C-21), 22.0(t,C-22),20.0(t,C-23)32.8(t,C-24),35.6(d, C-25),11.3(q,C-26,27)。以上理化性质和波谱数据与文献[13]报道中3β-羟基-4-烯-胆甾烷一致。

2.2.5 化合物5 无色短针晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:281[M+H]+,结合碳氢谱推测其分子式为C18H32O2。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.24(4 H,m),2.32(2 H,m),2.0(3 H,m),1.23-1.30(19 H, brs),0.80(3 H,t,J=7.2 Hz);13C-NMR(CDCl3, 150 MHz)δ:179.4(s,C-1),126.9(d),127.0(d), 128.7(d),129.0(d),33.1(t),30.9(t),30.9(t), 30.5(t),28.6(t),28.5(t),26.2(t),26.1(t),26.1 (t),24.6(t),23.6(t),21.7(t),21.6(t),14.1(q,C-18)。以上理化性质和波谱数据与文献[14]报道中十八碳-9,12-二烯酸一致。

2.2.6 化合物6 淡黄色油状液体,ESI-MS(+)m/z: 319[M+H]+,分子式为C21H34O2。1H-NMR(CDCl3, 600 MHz)δ:4.80(1 H,d,J=1.8 Hz),4.74(1 H,d,J=1.8 Hz),4.68(1 H,d,J=1.8 Hz),4.58(1 H,d,J=1.8 Hz),3.59(3 H,s),1.04(3 H,s),1.30(3 H, s),1.06(3 H,t,J=7.2 Hz);13C-NMR(CDCl3,150 MHz)δ:21.5(t,C-1),27.3(t,C-2),33.0(t,C-3), 154.3(s,C-4),39.8(s,C-5),31.7(t,C-6),20.1(t,C-7),54.4(d,C-8),36.0(s,C-9),49.1(d,C-10),26.4 (t,C-11),32.6(t,C-12),146.4(s,C-13),28.8(t,C-14),11.8(q,C-15),112.5(t,C-16),173.6(s,C-17), 102.2(t,C-18),19.3(q,C-19),14.3(q,C-20),49.3 (q,C-OCH3)。以上理化性质和波谱数据与文献[15]报道中克罗烷-4,11-二烯-17-酸甲酯一致。

2.2.7 化合物7 白色细针晶(三氯甲烷-甲醇),ESIMS(+)m/z:289[M+H]+,分子式为C20H32O。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:4.73(1 H,s),4.67 (1 H,s),3.13(1 H,m),0.95(3 H,s),0.91(3 H,s), 0.70(3 H,s);13C-NMR(CDCl3,150 MHz)δ:38.7(t, C-1),18.2(t,C-2),41.1(t,C-3),37.8(s,C-4),54.8 (s,C-5),20.0(t,C-6),39.7(t,C-7),42.9(s,C-8), 54.2(d,C-9),38.0(s,C-10),78.0(d,C-11),33.2(t, C-12),43.0(d,C-13),27.3(t,C-14),48.0(t,C-15), 154.8(s,C-16),102.0(t,C-17),15.5(q,C-18),28.4 (q,C-19),17.6(q,C-20)。以上理化性质和波谱数据与文献[15]报道中11α-羟基贝壳杉烷-16-烯一致。

2.2.8 化合物8 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:399 [M+H]+,分子式为C28H46O。1H-NMR(CDCl3, 600 MHz)δ:6.10(1 H,s,H-6),5.17(2 H,m,H-22, 23),3.65(1 H,br s,Hax-3),2.48(1 H,m,Heq-4), 2.35(1 H,m,Hax-4),2.23(1 H,dd,J=11.0, 11.2 Hz,H-8),1.94(1 H,m,H-20),1.82(1 H,m,H-24),1.44(1 H,m,H-25),1.17(3 H,s,H-19),0.99 (3 H,d,J=6.6 Hz,H-21),0.89(3 H,d,J=6.8 Hz,H-28),0.81(3 H,d,J=6.7 Hz,H-26),0.79(3 H,d,J= 6.8 Hz,H-27),0.67(3 H,s,H-18);13C-NMR(CDCl3, 150 MHz)δ:36.3(t,C-1),31.0(t,C-2),30.4(t,C-3),41.8(t,C-4),160.4(s,C-5),125.9(d,C-6), 198.5(s,C-7),45.3(d,C-8),50.0(d,C-9),38.5(s, C-10),21.1(t,C-11),38.5(t,C-12),43.0(s,C-13), 49.9(d,C-14),26.3(t,C-15),28.6(t,C-16),54.7(d, C-17),12.2(q,C-18),17.3(q,C-19),39.9(d,C-20), 21.1(q,C-21),35.6(t,C-22),31.9(t,C-23),42.8(d, C-24),33.1(d,C-25),17.6(q,C-26),19.6(q,C-27), 20.0(q,C-28)。以上理化性质和波谱数据与文献[12]报道中麦角甾烷-5-烯-7-酮一致。

2.2.9 化合物9 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:469 [M+H]+,结合碳氢谱推测其分子式为C32H52O2。1HNMR(CD3OD,600 MHz)δ:5.69(1 H,dd,J1= 10.2 Hz,J2=15.6 Hz),4.89(2 H,q,J=7.2 Hz),1.29 (3 H,t,J=7.2 Hz),2.84(1H,dd,J=3.9,13.9 Hz,H-18),2.56(1H,ddd,J=7.4,10.8,16.1Hz,H-2β),2.40 (1H,ddd,J=3.7,7.0,16.1 Hz,H-2α),1.15(3H,s,H-27),1.08(3H,s,H-23),1.05(3H,s,H-25),1.03(3H, s,H-24),0.93(3H,s,H-30),0.90(3H,s,H-29),0.80 (3H,s,H-26);13C-NMR(CD3OD,150 MHz)δ:39.1 (t,C-1),34.2(t,C-2),27.7(t,C-3),47.4(s,C-4), 55.3(d,C-5),19.4(t,C-6),32.4(t,C-7),39.3(s,C-8),151.1(s,C-9),36.8(s,C-10),110.2(d,C-11), 32.4(t,C-12),43.6(d,C-13),41.7(s,C-14),27.7(t, C-15),23.6(t,C-16),46.9(s,C-17),41.0(d,C-18), 45.8(t,C-19),30.7(s,C-20),33.7(t,C-21),32.1(t, C-22),26.4(q,C-23),21.4(q,C-24),15.0(q,C-25), 17.0(q,C-26),26.0(q,C-27),173.0(s,C-28),33.0 (q,C-29),23.5(q,C-30),62.1(t,CH2-OCH2CH3), 14.3(q,CH3-OCH2CH3)。以上理化性质和波谱数据与文献[16]报道中9-烯-齐墩果酸乙酯一致。

2.2.10 化合物10 白色粉末,ESI-MS(+)m/z:499 [M+H]+,结合碳氢谱推测其分子式为C32H50O4。1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:5.12(1H,t,J=3.6 Hz, H-12),3.15(1H,d,J=5.0 Hz,H-3),1.06,0.92, 0.86,0.85,0.83,0.70,0.68,(each 3H,s,7×CH3);13C NMR(CDCl3,150 MHz)δ:38.4(t,C-1),34.2(t,C-2),79.0(d,C-3),38.8(s,C-4),55.2(d,C-5),18.3 (t,C-6),32.6(t,C-7),39.3(s,C-8),159.6(s,C-9), 37.1(s,C-10),115.8(d,C-11),22.6(t,C-12),34.6 (t,C-13),41.6(s,C-14),27.7(t,C-15),23.4(t,C-16),46.5(s,C-17),40.9(d,C-18),45.8(t,C-19), 30.7(s,C-20),33.7(t,C-21),32.4(t,C-22),28.1(q, C-23),15.6(q,C-24),15.5(q,C-25),17.1(q,C-26),25.9(q,C-27),183.0(s,C-28),33.1(q,C-29),23.6 (q,C-30),170.0(s,CO-COCH3),21.0(q,CH3-COCH3)。以上理化性质和波谱数据与文献[17]报道中3-乙酰基-9烯-齐墩果酸一致。

3 讨论

从本研究中,鉴定了3种三萜化合物:1-烯-3-酮-白桦脂酸甲酯(化合物2)、9-烯-齐墩果酸乙酯(化合物9)、3-乙酰基-9烯-齐墩果酸(化合物10);2种二萜化合物:克罗烷-4,11-二烯-17-酸甲酯(化合物6)、11α-羟基贝壳杉烷-16-烯(化合物7);3种甾体化合物:胆甾烷-4-烯-3-酮(化合物3)、3β-羟基-4-烯-胆甾烷(化合物4)、麦角甾烷-5-烯-7-酮(化合物8);1种醇类化合物:十四烷醇(化合物1);1种酸类化合物:十八碳-9,12-二烯酸(化合物5)。化合物1～10均为首次从黄花三宝木分离得到。

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DOI 10.3870/yydb.2014.10.011

R282.71

1004-0781(2014)10-1299-04

2013-09-26

2013-11-25

*广西大学自然科学资助研究课题(XBZ111472)