凋亡调控因子Survivin、XIAP、c—Jun及NF—κB在卵巢上皮性肿瘤中表达的意义

2014-02-21李望华欧阳强

中国现代医生 2014年2期

李望华+欧阳强

摘要] 目的探讨凋亡调控因子Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB在卵巢上皮性肿瘤的表达。方法选取2009年3月～2013年3月在我院进行手术切除的卵巢上皮性肿瘤标本59例，采用免疫组化SP法，对卵巢良性肿瘤、卵巢交界性肿瘤、卵巢癌中凋亡调控因子XIAP、转录因子c-Jun、NF-κB的表达进行检测。结果卵巢癌组Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB阳性表达率分别为74.29%、71.43%、82.86%及82.86%，均高于卵巢良性肿瘤组和卵巢交界性肿瘤组，差异有统计学意义（P < 0.05）。卵巢癌组织中XIAP、Survivin、c-Jun均与NF-κB表达呈正相关（P < 0.05）。结论临床上检测上皮性卵巢肿瘤中的Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB，对预防、治疗上皮性卵巢肿瘤有十分重要的价值。

[关键词] 凋亡调控因子；Survivin；XIAP；c-Jun；NF-κB；卵巢上皮性肿瘤

[中图分类号] R737.31 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）02-0021-03

Expression and its significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial tumors

LI Wanghua1 OUYANG Qiang2

1.Department of Gynaecology，Dingcheng Maternal and Child Care Service Centre of Changde City in Hunan Province， Changde 451001， China； 2.Department of Gynaecology， Hunan Provincial Tumor Hospital， Changsha 410013， China

[Abstract] Objective To explore the expression and significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial carcinoma. Methods A total of 59 patients of operation excision of ovarian epithelial tumor specimens were collected in our hospital from March 2009 to March 2013. The immunohistochemical SP method was used to detect the ovarian benign tumor， ovarian cancer， ovarian cancer， apoptosis of XIAP transcription factor AP-1 （c-Jun） and the expression of NF-κB in detection. Results The positive expression rate of survivin， XIAP， c-jun and NF-κB of ovarian cancer group were 74.29%，71.43%，82.86%，82.86% respectively， and all were higher than that in benign ovarian tumors group and borderline ovarian tumors group， and the difference was statistically significant（P < 0.05）； The XIAP， Survivin， c-Jun of ovarian cancer tissue were positively correlated with NF-κB expression （P < 0.05）. Conclusion The clinical detection of Survivin， XIAP， c-Jun， NF-κB in epithelial ovarian tumor is very important to the prevention and treatment of epithelial ovarian tumors.

[Key words] Apoptosis regulatory factors； Survivin； XIAP； c-Jun； NF-κB； Epithelial ovarian tumor

细胞凋亡的失衡与肿瘤的发生发展密切相关。XIAP蛋白在正常组织中低表达，而在多种恶性肿瘤中呈现高表达。Survivin在多种肿瘤组织和人类胚胎组织中广泛表达，其可以抑制细胞凋亡和有丝分裂。卵巢肿瘤是妇科常见肿瘤。目前凋亡调控因子XIAP、Survivin、Caspase-3和转录因子c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性肿瘤中表达报道很少[1]。本研究通过检测卵巢上皮性肿瘤中XIAP、Survivin、c-Jun及NF-κB表达，来探讨其在卵巢肿瘤发生发展中的作用及与临床病理的联系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2009年3月～2013年3月在我院就诊的卵巢上皮性肿瘤患者59例，所有患者均行手术切除。患者年龄最小23岁，最大75岁，平均（43.67±7.38）岁。其中卵巢癌35例，卵巢良性肿瘤12例，卵巢交界性肿瘤12例。endprint

1.2 方法

采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（SP法），对卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤、卵巢癌中凋亡调控因子XIAP、转录因子AP-1（c-Jun）、NF-κB的表达进行检测。方法：烤片，68℃，20 min；常规二甲苯进行脱蜡，酒精梯度脱水；灭活其内源性过氧化物酶；抗原修复；滴加适当稀释浓度的一抗：XIAP/Survivin（1∶300）和AP-1（c-Jun）（1∶50），NF-κB p65（1∶200），滴加生物素标记二抗，37℃孵育半小时，PBS冲洗3次，每次5 min；滴加链霉素卵白素工作液（辣根过氧化物酶标记），37℃孵育30 min，PBS冲洗3次，每次5 min；DAB/H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，用苏木素进行复染，常规脱水，透明，干燥，封片。

1.3 结果判读

首先要确定免疫组化技术是否合格，合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色，而阳性标志物清晰和定位明确，细胞呈棕黄色着色，阳性信号应与被测抗原所在的部位一致。按细胞染色强度分：弱阳性（+），阳性细胞数<10%，淡黄色显色或仅个别细胞呈黄至棕黄色；强阳性（+++），即阳性细胞数>60%以上，多数细胞呈黄色至棕黄色染色；中度阳性（++），阳性细胞数及显色程度介于弱阳性与强阳性之间。阴性染色结果是组织内预期特定区域中未见抗原表达[2]。

1.4 统计学方法

采用SPSS13.0统计学软件，各组间阳性表达率比较采用χ2检验，各指标表达相关性采用相关性分析，P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB阳性表达率比较

各组Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB阳性表达率比较，差异均有统计学意义（χ2=11.379、7.983、14.168、10.139，P均<0.05）。见表1。

2.2 卵巢癌组织中XIAP、Survivin和c-Jun与NF-κB表达的相关性分析

卵巢癌组织中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κB分别为0.2413±0.0178、0.2381±0.0168、0.2390±0.0217和0.2476±0.0251。XIAP、Survivin、c-Jun均与NF-κB表达呈正相关（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。

3 讨论

近年来，卵巢癌发病呈现年轻化、增高的趋势。卵巢癌发病隐匿，部分患者临床有症状去就诊时，大部分己发生远处转移，死亡率高，给妇女生命健康带来极大威胁[3]。原因主要是：早期诊断方法不完善的卵巢癌；卵巢癌早期症状隐匿，其位于盆腔的深部；就诊时已发生远处转移，病灶不能完全切除。

研究显示，肿瘤发生、发展与细胞凋亡的失衡有密切关系。卵巢肿瘤是常见的肿瘤之一，卵巢癌致死率高，占女性生殖器官肿瘤第一位，严重危及患者的生命。XIAP作为凋亡抑制蛋白，在正常组织中很少表达，而在卵巢肿瘤中高表达，参与细胞增殖与恶性转化。Survivin属于凋亡抑制蛋白家族，在人类胚胎组织、肿瘤组织及极少数正常组织中均有表达，具有抑制有丝分裂及细胞凋亡功能。XIAP与Survivin蛋白均通过直接抑制Caspase-3、7、9的活性，使细胞凋亡得到抑制。作为核转录调节因子的NF-κB，在静息状态下，NF-κB与其抑制性蛋白IκB（抑制性蛋白）结合，起到调控细胞增殖、凋亡等作用。

细胞增殖及凋亡平衡对维持细胞内稳态起着重大作用，卵巢癌的发生是细胞凋亡激活因子受到Survivin抑制的结果[4，5]。Survivin属于凋亡抑制蛋白（IAP）家族成员，是现在为止发现的最小IAP蛋白。其通过抑制蛋白水解酶级联反应过程中位于下游的Caspaae-3、Caspase-7活性，发挥抗凋亡作用，促进细胞增殖。在卵巢肿瘤中，Survivin过表达可以预测卵巢上皮细胞癌[6，7]。

NF-κB活性的失控与哺乳动物肿瘤的发生密切相关，NF-κB的异常表达及活化在许多肿瘤中均可见到。卵巢组织中NF-κB基因扩增常见于多重内外因素作用于机体，其编码的蛋白在细胞浆和细胞核中表达，细胞内多条信号转导通路被激活，恶性细胞异常增生，最终导致癌症发生[8，9]。

c-Jun是一种顺序特异性转录激活因子，或激活转录因子家族成员组成。c-Jun的活性增加与乳腺癌、结肠癌等肿瘤相关。本研究中，卵巢癌组Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB阳性表达率均显著高于卵巢良性肿瘤组和卵巢交界性肿瘤组，差异有统计学意义（P < 0.05）。表明NF-κB和c-Jun、Survivin、XIAP对卵巢癌的发生发展可能起着促进作用[10，11]。

本研究中，卵巢癌组织中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κ分别为（0.2413±0.0178）、（0.2381±0.0168）、（0.2390±0.0217）和（0.2476±0.0251）。XIAP、Survivin、c-Jun均与NF-κB表达呈正相关（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。说明凋亡调控因子XIAP、Survivin的表达与转录因子NF-κB的表达具有相关性，这提示NF-κB对XIAP、Survivin的表达可能具有促进作用。转录因子c-Jun和转录因子NF-κB在卵巢癌组织中的表达呈正相关，提示二者在卵巢癌的发生发展中可能起着相互促进的作用。

综上所述，在上皮性卵巢肿瘤中对Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB的表达进行联合检测，不仅有助于阐明上皮性卵巢肿瘤的发生、发展，对预防、治疗上皮性卵巢肿瘤也有重要价值。

[参考文献]endprint

[1] 张意茗，张向宁. XIAP、Survivin、LPA及CA125在上皮性卵巢癌中的表达[J]. 山东大学学报（医学版），2007， 12（45）：317-320.

[2] 李秀娟，廖琪，孙中华，等. Ki67和Survivin在卵巢上皮性癌中的表达及意义[J]. 中国全科医学，2011，4（16）：1534-1535.

[3] 王璐，封全灵. cyclin B1、p27在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义[J]. 河南医学研究，2008，17（1）：23-25.

[4] 徐信兰. MUC4、MUC5AC、MUC16和NF-κB/p65在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义[D]. 扬州大学硕士学位论文，2009.

[5] Uzuki T，Urano T，Miki Y，et al. Nuclear cyclinB1 in human breast carcinoma as a potent prognostic factor[J]. Cancer Sci，2007，98（5）：644-651.

[6] 刘志慧，顾振鹏，马立新，等. PTEN及Survivin在卵巢上皮性癌中的表达及相关性[J]. 中国临床医学，2011，18（1）：35-37.

[7] 卢仁泉，郭林，沈烨红. HE4在卵巢癌诊治中的临床应用评价[J]. 中国癌症杂志，2010，20（9）：680-685.

[8] 郭冰沁，俞岚，武世伍，等. HE4、NF-κBp65和MMP9在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义[J]. 中国组织化学与细胞化学杂志，2011，20（6）：578-583.

[9] 黄晓春，代维栋. Survivin与Smac在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其相关性研究[J]. 延安大学学报（医学科学版），2011，9（1）：3-7.

[10] 邓霖. 凋亡调控因子Survivin、XIAP以及c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义[D]. 贵州：遵义医学院，2011：15-26.

[11] 张炜明，宋国新，王聪，等. Survivin在结肠癌中的不同表达定位与预后的关系[J]. 临床与实验病理学杂志，2010， 26（5）：587-589.

（收稿日期：2013-08-16）endprint